公开(公告)号：CN118813623B

公开(公告)日：2025-04-22

申请号：CN202410962747.9

申请日：2024-07-18

Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院

Inventor： 周建华 ,  杨媛 ,  邓林霞 ,  尹晓玲 ,  周兰琪 ,  熊博 ,  张瑜

IPC: C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/89 ,  A01K67/0276 ,  A61K49/00

Abstract: 本申请涉及生物技术领域，尤其涉及一种ttc21b基因缺失动物模型的构建方法及其应用；该构建方法包括：设计靶向ttc21b基因的sgRNA序列；使用sgRNA序列对模板PCR扩增，得到转录模板gDNA，分别对转录模板gDNA和pT3‑Cas9质粒体外转录并混合，得到sgRNA和Cas9mRNA混合物；向斑马鱼单细胞期受精卵中注射该混合物，得到含突变基因的斑马鱼；饲养含突变基因的斑马鱼后筛选得到ttc21b基因缺失的斑马鱼模型；本申请通过CRISPR/Cas9基因编辑技术得到ttc21b基因缺失的斑马鱼模型，可以为探究肾单位肾痨及其相关纤毛病的发病机制研究和治疗药物的筛选提供一种理想的动物模型。

公开(公告)号：CN118773200A

公开(公告)日：2024-10-15

申请号：CN202410962617.5

申请日：2024-07-18

Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院

Inventor： 周建华 ,  杨媛 ,  邓林霞 ,  尹晓玲 ,  周兰琪 ,  熊博 ,  张瑜

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/89 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6888 ,  A01K67/0276

Abstract: 本申请涉及生物技术领域，尤其涉及一种ttc21b基因突变位点及其应用；所述基因突变位点包括ttc21b基因的第6号外显子靶位点，第6号外显子靶位点的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；通过设计靶向ttc21b基因的第6号外显子的sgRNA，采用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除ttc21b基因，使ttc21b基因翻译提前终止并形成异常的截短蛋白，长期降低生物体内ttc21b基因的表达。

公开(公告)号：CN118813623A

公开(公告)日：2024-10-22

申请号：CN202410962747.9

申请日：2024-07-18

Applicant: 华中科技大学同济医学院附属同济医院

Inventor： 周建华 ,  杨媛 ,  邓林霞 ,  尹晓玲 ,  周兰琪 ,  熊博 ,  张瑜

IPC: C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/55 ,  C12N15/89 ,  A01K67/0276 ,  A61K49/00

Abstract: 本申请涉及生物技术领域，尤其涉及一种ttc21b基因缺失动物模型的构建方法及其应用；该构建方法包括：设计靶向ttc21b基因的sgRNA序列；使用sgRNA序列对模板PCR扩增，得到转录模板gDNA，分别对转录模板gDNA和pT3‑Cas9质粒体外转录并混合，得到sgRNA和Cas9mRNA混合物；向斑马鱼单细胞期受精卵中注射该混合物，得到含突变基因的斑马鱼；饲养含突变基因的斑马鱼后筛选得到ttc21b基因缺失的斑马鱼模型；本申请通过CRISPR/Cas9基因编辑技术得到ttc21b基因缺失的斑马鱼模型，可以为探究肾单位肾痨及其相关纤毛病的发病机制研究和治疗药物的筛选提供一种理想的动物模型。