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公开(公告)号：CN116059223A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202210818853.0
申请日：2022-07-12
Applicant: 华中科技大学
IPC: A61K31/7032 , A61K36/41 , A61P1/00 , A61P31/04 , A61P35/00 , A61P29/00 , A61P39/06 , C12P19/44 , C12N9/38 , C12N15/56 , C12N15/70 , A23L33/125
Abstract: 本发明涉及酪醇‑β‑半乳糖苷在调整肠道微生物中的应用。酪醇‑β‑半乳糖苷的分子式为C14H20O7，通过酶法以半乳糖和酪醇制备得到的酪醇‑β‑半乳糖苷可以显著抑制疾病相关菌瘤胃球菌和布劳特氏菌的生长，促进有益菌乳酸杆菌、双歧杆菌和艾克曼氏菌的增殖。并且酪醇‑β‑半乳糖苷还能使得小鼠的异黄酮类合成代谢通路明显增强，使得小鼠代谢物中存在大量具有优异的生物活性即抗癌、抗炎、抗氧化活性的异黄酮类化合物，促进肠道健康。
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公开(公告)号：CN116004604A
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202211551224.2
申请日：2022-12-05
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明涉及一种交联包涵体的制备方法及其在水解大豆低聚糖中的应用。包括如下步骤：(1)培养含有α‑半乳糖苷酶基因的重组大肠杆菌，收集包涵体；(2)向包涵体悬液中加入交联剂溶液，构建交联体系；搅拌交联0.5～4小时，经洗涤后，得到交联包涵体。本发明还提供了该方法制备的交联包涵体在水解豆浆中大豆低聚糖的应用。本发明首次将含有α‑半乳糖苷酶催化活性的包涵体进行交联，得到交联包涵体。无需对重组α‑半乳糖苷酶进行纯化，有效地减少酶纯化制备的时间和成本，具有操作简单、成本低廉、无需高纯度酶等优点。同时在酶的固定化过程中，无需添加任何沉淀剂，可进一步降低成本与工作量。
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公开(公告)号：CN116064704A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202210818872.3
申请日：2022-07-12
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明涉及一种酪醇‑β‑半乳糖苷的制备方法及其应用。所述方法包括：构建半乳糖浓度为0.25～2M、酪醇浓度为50～400mM、β‑半乳糖苷酶浓度为5～50U/mL的反应体系，然后在40～75℃条件下反应6～24h，升温至90～100℃终止反应，离心，将上清液真空冷冻干燥后，经分离制得酪醇‑β‑半乳糖苷；所述β‑半乳糖苷酶的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明首次采用特定的β‑半乳糖苷酶，以半乳糖单糖为糖基供体合成酪醇‑β‑半乳糖苷。相比于现有以乳糖为糖基供体的制备酪醇‑β‑半乳糖苷的方法，本发明的整个制备过程中不存在水解副反应，无水解副产物，糖苷产物分离方便，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN116004604B
公开(公告)日：2025-02-18
申请号：CN202211551224.2
申请日：2022-12-05
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明涉及一种交联包涵体的制备方法及其在水解大豆低聚糖中的应用。包括如下步骤：(1)培养含有α‑半乳糖苷酶基因的重组大肠杆菌，收集包涵体；(2)向包涵体悬液中加入交联剂溶液，构建交联体系；搅拌交联0.5～4小时，经洗涤后，得到交联包涵体。本发明还提供了该方法制备的交联包涵体在水解豆浆中大豆低聚糖的应用。本发明首次将含有α‑半乳糖苷酶催化活性的包涵体进行交联，得到交联包涵体。无需对重组α‑半乳糖苷酶进行纯化，有效地减少酶纯化制备的时间和成本，具有操作简单、成本低廉、无需高纯度酶等优点。同时在酶的固定化过程中，无需添加任何沉淀剂，可进一步降低成本与工作量。
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公开(公告)号：CN116064477A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202210818850.7
申请日：2022-07-12
Applicant: 华中科技大学
IPC: C12N9/24 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/12 , C12P19/00 , C12P19/14 , C12P19/44 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种糖苷酶家族43的β‑糖苷酶及其编码基因与应用。所述糖苷酶家族43的β‑糖苷酶来源于山东泰安土壤宏基因组，核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明提供了一种新型GH43的β‑糖苷酶基因，为低聚半乳糖、烷基半乳糖苷、酪醇半乳糖苷等产品的合成提供了新的工具酶。本发明提供的β‑糖苷酶能以半乳糖为底物直接合成低聚半乳糖，与传统的以乳糖底物合成寡糖的工艺显著不同，使用本发明β‑糖苷酶反应获得的低聚半乳糖粗品不含葡萄糖，容易纯化获得纯品供糖尿病患者使用，拓展应用范围；该酶还能够以半乳糖为糖基供体、多种羟基化合物为受体合成糖苷产物，在食品、医药、化工等领域有重要应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115094104A
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN202210818830.X
申请日：2022-07-12
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明涉及一种利用固定化细胞以单糖为糖基供体合成烷基半乳糖苷的方法。包括：(1)培养产β‑半乳糖苷酶的酵母；(2)使用乙醇处理酵母细胞；(3)向乙醇处理后的酵母细胞中加入京尼平，构建交联体系；将交联体系反应0.5～4h，离心，得到固定化细胞；(4)将半乳糖和烷基醇混合均匀，加入固定化细胞，反应2～16h，经离心固液分离，取上清液，得到烷基半乳糖苷。本发明提供了一种绿色高效合成烷基半乳糖苷的方法，首次采用固定化酵母细胞以单糖为糖基供体一步合成糖苷。反应体系完成后仅含有烷基糖苷与剩余底物，产物种类少，容易纯化，适合于烷基糖苷的大规模合成，具有广大的应用前景。
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公开(公告)号：CN115976156A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202211603783.3
申请日：2022-12-13
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明涉及一种GPI转酰胺酶的酶活测定方法。该方法是以丙氨酸‑苏氨酸‑赖氨酸‑天冬氨酸‑7‑氨基‑4‑甲基香豆素为底物，使用待测GPI转酰胺酶水解该底物，测定荧光强度，然后根据7‑氨基‑4‑甲基香豆素标准品的线性关系回归方程计算待测GPI转酰胺酶的相应酶活。本发明设计并合成的多肽底物A‑T‑K‑D‑7‑氨基‑4‑甲基香豆素亲水性较好，溶解度大，其疏水系数为‑6.3，容易构建酶反应体系。基于该多肽底物，本发明提供了一种测定GPI转酰胺酶活性的新方法，实现了GPI转酰胺酶的定量分析。
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公开(公告)号：CN115947771B
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202210821496.3
申请日：2022-07-12
Applicant: 华中科技大学
Abstract: 本发明涉及一种酪醇衍生物及其制备方法与应用。所述酪醇‑α‑半乳糖苷的制备方法包括：构建蜜二糖浓度为0.25～1.5M、酪醇浓度为10～500mM、α‑半乳糖苷酶浓度为1.25～10U/mL的反应体系，然后在40～75℃条件下反应0.5～6h，升温至90～100℃终止反应，离心，将上清液真空冷冻干燥后，经分离制得酪醇‑α‑半乳糖苷；所述α‑半乳糖苷酶的氨基酸序列如SEQ IDNo.2所示，核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供的酪醇‑α‑半乳糖苷对于神经炎症具有抑制作用，可作为新的治疗神经炎症的先导化合物。并且本发明是采用特定的α‑半乳糖苷酶，以蜜二糖为糖基供体，一步高效合成酪醇‑α‑半乳糖苷，条件温和，环保绿色，步骤简单，大大降低了生产成本，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN116064477B
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202210818850.7
申请日：2022-07-12
Applicant: 华中科技大学
IPC: C12N9/24 , C12N15/56 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/12 , C12P19/00 , C12P19/14 , C12P19/44 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种糖苷酶家族43的β‑糖苷酶及其编码基因与应用。所述糖苷酶家族43的β‑糖苷酶来源于山东泰安土壤宏基因组，核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明提供了一种新型GH43的β‑糖苷酶基因，为低聚半乳糖、烷基半乳糖苷、酪醇半乳糖苷等产品的合成提供了新的工具酶。本发明提供的β‑糖苷酶能以半乳糖为底物直接合成低聚半乳糖，与传统的以乳糖底物合成寡糖的工艺显著不同，使用本发明β‑糖苷酶反应获得的低聚半乳糖粗品不含葡萄糖，容易纯化获得纯品供糖尿病患者使用，拓展应用范围；该酶还能够以半乳糖为糖基供体、多种羟基化合物为受体合成糖苷产物，在食品、医药、化工等领域有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN116059223B
公开(公告)日：2023-11-07
申请号：CN202210818853.0
申请日：2022-07-12
Applicant: 华中科技大学
IPC: A61K31/7032 , A61K36/41 , A61P1/00 , A61P31/04 , A61P35/00 , A61P29/00 , A61P39/06 , C12P19/44 , C12N9/38 , C12N15/56 , C12N15/70 , A23L33/125
Abstract: 本发明涉及酪醇‑β‑半乳糖苷在调整肠道微生物中的应用。酪醇‑β‑半乳糖苷的分子式为C14H20O7，通过酶法以半乳糖和酪醇制备得到的酪醇‑β‑半乳糖苷可以显著抑制疾病相关菌瘤胃球菌和布劳特氏菌的生长，促进有益菌乳酸杆菌、双歧杆菌和艾克曼氏菌的增殖。并且酪醇‑β‑半乳糖苷还能使得小鼠的异黄酮类合成代谢通路明显增强，使得小鼠代谢物中存在大量具有优异的生物活性即抗癌、抗炎、抗氧化活性的异黄酮类化合物，促进肠道健康。
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