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公开(公告)号：CN112326773A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011109978.3
申请日：2020-10-16
Applicant: 华中科技大学鄂州工业技术研究院 , 华中科技大学
IPC: G01N27/64
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种高通量分析IgG糖肽的方法，包括：将IgG进行变性处理，得到变性IgG；将变性IgG进行酶切处理，得到IgG糖肽混合物；将IgG糖肽混合物进行固相萃取，分离富集IgG糖肽，得到IgG糖肽；采用基质辅助激光解析电离‑飞行时间‑质谱分析IgG糖肽，得到质谱数据；所述将变性IgG进行酶切处理，包括：将变性IgG和胰蛋白酶trypsin以质量比例为(48～53):1进行混合，后于温度为37℃下孵育10～15h。本发明提供的高通量分析IgG糖肽的方法，具有通量高、速度快和稳定性高的特点，适合于批量IgG糖肽样品的分析。
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公开(公告)号：CN111057537B
公开(公告)日：2023-05-19
申请号：CN201911412133.9
申请日：2019-12-31
Applicant: 华中科技大学鄂州工业技术研究院 , 华中科技大学
Abstract: 本发明公开了一种甘露糖功能化的蛋白金纳米簇及其制备方法、应用，所述方法包括，S1，将牛血清白蛋白和NH2‑甘露糖溶解于缓冲液中后，与EDC混合，并依次进行搅拌、纯化和浓缩，获得甘露糖‑牛血清白蛋白结合物；所述牛血清白蛋白、所述NH2‑甘露糖和所述EDC的质量比为9～11:3:1；S2，将甘露糖‑牛血清白蛋白结合物与氯金酸溶液在缓冲液中混合后，调节pH值，并依次进行搅拌和纯化，获得蛋白金纳米簇。本发明公开的蛋白金纳米簇的制备方法方便、简单、快速、高效，且该方法合成的蛋白金纳米簇无毒，生物相容性好，分散性好，荧光性强，检测灵敏度高。
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公开(公告)号：CN109652432A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201811595046.7
申请日：2018-12-25
Applicant: 华中科技大学鄂州工业技术研究院 , 华中科技大学
Abstract: 本发明提供了一种高纯度隐地蛋白的制备方法，步骤包括：(1)将所述目的蛋白的编码基因与TEV蛋白酶、T4噬菌体Hoc蛋白基因片段依次连接，制备融合重组蛋白编码基因；(2)将所述融合重组蛋白的编码基因转入质粒中；(3)将质粒转入大肠杆菌宿主中；(4)使用Hoc蛋白缺失的Hoc-T4噬菌体感染所述的大肠杆菌宿主，培养宿主表达展示所述融合重组蛋白的T4噬菌体；(5)分离展示有融合重组蛋白的T4噬菌体；(6)从所述T4噬菌体中分离融合重组蛋白，TEV蛋白酶切后获得所述目的蛋白。该方法能够简便快速的获取高纯度的隐地蛋白，且所得的隐地蛋白溶液直接用作农用抗菌抑菌剂能够达到明显促进植物生长的效果，具备良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN107367564A
公开(公告)日：2017-11-21
申请号：CN201710522447.9
申请日：2017-06-30
Applicant: 华中科技大学鄂州工业技术研究院 , 华中科技大学
Inventor： 刘欣
CPC classification number: G01N30/06 , G01N30/02 , G01N2030/067
Abstract: 本发明一种利用高效液相色谱快速高效的N-糖定性与定量分析方法，属于糖组学分析领域。本发明提供一种高效液相色谱快速高效的N-糖定性与定量分析方法，利用微波辅助的手段加快N-糖的去糖基化反应，并结合衍生试剂AQC来标记直接通过酶切获得的葡糖胺，从而达到高效和高灵敏度的N-糖的定性和定量分析。
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公开(公告)号：CN107325186A
公开(公告)日：2017-11-07
申请号：CN201710522448.3
申请日：2017-06-30
Applicant: 华中科技大学鄂州工业技术研究院 , 华中科技大学
CPC classification number: C12N9/80 , C07K2319/21 , C12N11/14 , C12Y305/01052
Abstract: 本发明公开了一种基于His标签的PNGase F固定方法，属于固定化酶领域，本发明将His标签的PNGase F与含有修饰IDA/Ni的磁性颗粒(MNP-IDA/Ni)进行固定，将MNP-IDA/N作为固定材料，不仅体积小、比表面积大，而且能够方便快捷地被磁分离，得到相对纯净的反应底物，且本发明对PNGase F的固定效率远远高于传统的物理方法，不易被普通缓冲液或反应液洗脱，而且不同于一般的非定向化学固定，不干扰酶活性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112326773B
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202011109978.3
申请日：2020-10-16
Applicant: 华中科技大学鄂州工业技术研究院 , 华中科技大学
IPC: G01N27/64
Abstract: 法，具有通量高、速度快和稳定性高的特点，适合本发明属于生物技术领域，具体涉及一种高 于批量IgG糖肽样品的分析。通量分析IgG糖肽的方法，包括：将IgG进行变性处理，得到变性IgG；将变性IgG进行酶切处理，得到IgG糖肽混合物；将IgG糖肽混合物进行固相萃取，分离富集IgG糖肽，得到IgG糖肽；采用基质辅助激光解析电离‑飞行时间‑质谱分析IgG糖肽，得到质谱数据；所述将变性IgG进行酶切处理，包括：将变性IgG和胰蛋白酶trypsin以质量比例为(56)对比文件Si Liu 等.A comprehensive analysis ofsubclass-specific IgG glycosylation incolorectal cancer progression by nanoLC-MS/MS.Analyst.2020,第145卷3136-3147.卢庄;贾伟;宋丽娜;蔡耘;邓玉林;张玉奎;钱小红.基于膜超滤的糖肽富集新方法.分析测试学报.2009,(第06期),644-648.
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公开(公告)号：CN107449650B
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN201710508392.6
申请日：2017-06-28
Applicant: 华中科技大学鄂州工业技术研究院 , 华中科技大学
Abstract: 本发明公开了一种基于MALDI‑MS及稳定同位素标记的N聚糖快速定量分析方法及应用，属于糖蛋白组学分析领域，本方法为：(1)在微波辅助下PNGase F使N聚糖以糖胺的形式释放，(2)d0/d5‑苯甲酰氯分别与糖胺发生亲核反应，之后纯化，(3)将d0‑苯甲酰氯和d5‑苯甲酰氯衍生的聚糖以摩尔比1:1的比例进行混合，(4)对混合后的d0/d5‑苯甲酰氯衍生的N聚糖进行甲胺化反应，(5)MALDI‑MS检测，(6)数据分析；本发明实现对中性糖和酸性糖的同时定量分析、降低实验成本、提升实验效率、缩短反应时间、有比较广的线性定量范围、可用于血清聚糖分析，具有医学应用价值。
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公开(公告)号：CN109679982A
公开(公告)日：2019-04-26
申请号：CN201811595939.1
申请日：2018-12-25
Applicant: 华中科技大学鄂州工业技术研究院 , 华中科技大学
Abstract: 本发明提供了一种利用短短芽孢杆菌制备高纯度隐地蛋白的方法，步骤包括：S1、将隐地蛋白的编码基因插入到以短短芽孢杆菌为宿主的质粒中；S2、将步骤S1所得质粒转入短短芽孢杆菌宿主中；S3、发酵培养步骤S2所得短短芽孢杆菌，所述发酵培养的培养条件为：T2培养基、温度30～33℃、转速120～200rpm、发酵培养时间24～60h；S4、收集发酵后的菌液，分离提取隐地蛋白液；所述分离提取方法包括：离心菌液收集上清，对上清液进行切向流超滤获得滤液、超滤浓缩滤液即得隐地蛋白液。该方法能够简便快速的获取高纯度的隐地蛋白，且所得的隐地蛋白溶液直接用作农用抗菌抑菌剂能够达到明显促进植物生长的效果，具备良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN109666686A
公开(公告)日：2019-04-23
申请号：CN201811593161.0
申请日：2018-12-25
Applicant: 华中科技大学鄂州工业技术研究院 , 华中科技大学
Abstract: 本发明提供了一种高纯度隐地蛋白的制备方法，步骤包括：(1)将所述目的蛋白的编码基因与TEV蛋白酶、T4噬菌体Soc蛋白基因片段依次连接，制备融合重组蛋白编码基因；(2)将所述融合重组蛋白的编码基因转入质粒中；(3)将质粒转入大肠杆菌宿主中；(4)使用Soc蛋白缺失的Soc-T4噬菌体感染所述的大肠杆菌宿主，培养宿主表达展示所述融合重组蛋白的T4噬菌体；(5)分离展示有融合重组蛋白的T4噬菌体；(6)从所述T4噬菌体中分离融合重组蛋白，TEV蛋白酶切后获得所述目的蛋白。该方法能够简便快速的获取高纯度的隐地蛋白，且所得的隐地蛋白溶液直接用作农用抗菌抑菌剂能够达到明显促进植物生长的效果，具备良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN117890457A
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202410065269.1
申请日：2024-01-16
Applicant: 华中科技大学鄂州工业技术研究院 , 华中科技大学
IPC: G01N27/62
Abstract: 本申请涉及生物技术领域，尤其涉及一种血清特征N‑聚糖组合在卵巢癌早期病变检测中的应用；所述应用包括将多种血清特征N‑聚糖作为卵巢癌早期病变中生物标志物。其中，所述血清特征N‑聚糖包括以下至少一种：H3N4F1、H4N4F1、H5N4F1、H5N5F1、H4N4S1、H5N4F1S1和H5N5F1S1。通过对卵巢癌早期病变患者和卵巢癌卵巢良性人群中血清糖蛋白的特征N‑聚糖进行质谱检测与统计分析，发现七种特征N‑聚糖的表达水平存在显著差异，说明这七种血清特征N‑聚糖可以作为卵巢癌早期病变的生物标志物，填补了现有技术中暂无血清中的特征性N‑聚糖用于预测卵巢癌早期病变的空白。
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