公开(公告)号：CN117721145A

公开(公告)日：2024-03-19

申请号：CN202410129373.2

申请日：2024-01-31

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 金双侠 ,  王福秋 ,  梁思佳 ,  王冠英 ,  王琼琼 ,  许忠平

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  A01H5/00 ,  A01H6/60

Abstract: 本发明提供了GhMPK31基因在调控陆地棉虫害防御能力中的应用，属于基因工程技术领域。本发明提供GhMPK31基因在调控陆地棉虫害防御能力中的应用，所述GhMPK31基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过超表达陆地棉中GhMPK31基因获得转基因陆地棉，其叶片中的基因超表达导致了类似于过敏反应的细胞死亡表型，损害了棉花对植食性昆虫的防御能力，表明GhMPK31基因与陆地棉虫害防御能力的相关性，为MAPK家族基因在植物与植食性昆虫互作中的作用提供了有价值的见解。

公开(公告)号：CN111286515A

公开(公告)日：2020-06-16

申请号：CN201910011587.9

申请日：2019-01-05

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 金双侠 ,  梁思佳 ,  罗静 ,  马伟华 ,  陈利珍 ,  张献龙

IPC: C12N15/84 ,  A01H4/00 ,  A01H5/00 ,  A01H6/60

Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及利用植物介导的RNAi创造棉花抗绿盲蝽种质的方法。本发明以绿盲蝽LIM基因的保守序列作为靶序列构建了RNAi载体，利用农杆菌介导的遗传转化方法将所述的绿盲蝽LIM基因成功导入棉花宿主，得到了表达绿盲蝽LIM基因双链RNA的转基因棉花。将该转基因棉花种植于室外网室中，接虫实验表明该转基因棉花可以导致绿盲蝽LIM基因的表达量下调,进而导致其无法完成正常羽化而死亡，最终导致绿盲蝽种群数量减少，从而达到抗虫的效果。本发明的转基因棉花对绿盲蝽具有抵抗能力。且转基因棉花可以与BT棉杂交生产多抗虫棉花的新种质。

公开(公告)号：CN108203714B

公开(公告)日：2021-03-02

申请号：CN201611188402.4

申请日：2016-12-20

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 金双侠 ,  张献龙 ,  张军 ,  王鹏程 ,  涂礼莉 ,  梁思佳 ,  孙琳

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种棉花基因的编辑方法。公开了用于棉花基因组编辑的CRISPR‑Cas9系统及其构建方法。本发明克隆得到两个陆地棉U6启动子pGhU6‑7和pGhU6‑9，并突变了Bsa Ⅰ酶切位点。利用优化后的启动子构建了在棉花中具有编辑能力的CRISPR‑Cas9载体的两个载体pRGEB32‑GhU6.7‑NPT Ⅱ、pRGEB32‑GhU6.9‑NPT Ⅱ。选取1个棉花内源基因GhCLA为目标基因，设计四个靶向该基因的sgRNA，引导Cas9蛋白在GhCLA的特异位点进行切割。通过棉花的白化表型、酶切图、测序验证，表明pGhU6‑7I和pGhU6‑9I驱动的CRISPR‑Cas9基因编辑系统在棉花内具有编辑能力。

公开(公告)号：CN118546949A

公开(公告)日：2024-08-27

申请号：CN202410789006.5

申请日：2024-06-19

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 金双侠 ,  王福秋 ,  王冠英 ,  扶春阳 ,  胡天域 ,  许忠平 ,  王琼琼 ,  梁思佳 ,  李波

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/60

Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，具体涉及GhCPK74基因及含有GhCPK74基因的组合基因在棉花抗虫性能上的应用。本发明提供了GhCPK74基因，所述GhCPK74基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，将该基因与GhCPK33基因同时敲除后，有利于提升棉花防治虫害的性能。因此，将目的植物中的GhCPK33基因和GhCPK74基因同时敲除后，能够提升棉花的抗虫性能，培育抗虫棉花，为棉花产业的健康发展奠定基础。

公开(公告)号：CN116875612A

公开(公告)日：2023-10-13

申请号：CN202311087404.4

申请日：2023-08-28

Applicant: 黄淮学院 ,  华中农业大学

Inventor： 梁思佳 ,  金双侠 ,  李婉宁 ,  刘军和 ,  王福秋 ,  李波

IPC: C12N15/12 ,  C07K14/435 ,  C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00 ,  A01N57/16 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明涉及植物基因工程技术领域。本发明提供了一种绿盲蝽CtsL基因及其对应的dsRNA序列和应用，所述绿盲蝽CtsL基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还包括靶向绿盲蝽CtsL基因的dsRNA序列，该序列对绿盲蝽CtsL基因具有良好的沉默效果。注射该dsRNA序列可显著降低绿盲蝽的存活率。因此，本发明所提供的CtsL基因及其致死dsRNA序列可用于转基因抗虫植物或新型杀虫剂的开发。

公开(公告)号：CN108203714A

公开(公告)日：2018-06-26

申请号：CN201611188402.4

申请日：2016-12-20

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 金双侠 ,  张献龙 ,  张军 ,  王鹏程 ,  涂礼莉 ,  梁思佳 ,  孙琳

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  C12N15/113

CPC classification number: C12N15/8205 ,  C12N9/1247 ,  C12N15/66 ,  C12Y207/07006

Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种棉花基因的编辑方法。公开了用于棉花基因组编辑的CRISPR‑Cas9系统及其构建方法。本发明克隆得到两个陆地棉U6启动子pGhU6‑7和pGhU6‑9，并突变了Bsa Ⅰ酶切位点。利用优化后的启动子构建了在棉花中具有编辑能力的CRISPR‑Cas9载体的两个载体pRGEB32‑GhU6.7‑NPT Ⅱ、pRGEB32‑GhU6.9‑NPT Ⅱ。选取1个棉花内源基因GhCLA为目标基因，设计四个靶向该基因的sgRNA，引导Cas9蛋白在GhCLA的特异位点进行切割。通过棉花的白化表型、酶切图、测序验证，表明pGhU6‑7I和pGhU6‑9I驱动的CRISPR‑Cas9基因编辑系统在棉花内具有编辑能力。