一种基于真空渗透法的辣椒转基因方法

    公开(公告)号:CN117867014A

    公开(公告)日:2024-04-12

    申请号:CN202311614850.6

    申请日:2023-11-27

    Abstract: 本发明提供一种基于真空渗透法的辣椒转基因方法,包括以下步骤:S1、取辣椒种子进行培养,待其长到两片子叶时,即得待转化受体材料;S2、制备含有表达载体和目标基因的农杆菌侵染液,所述农杆菌侵染液OD600值为0.6~1.4;S3、将上述待转化受体材料去除茎顶端生长点及一片子叶,在压强‑0.1~‑0.06Mpa条件下,对伤口处进行侵染2~10min,得浸染植株;S4、将上述浸染植株进行培养,生长一至两周后,筛选出阳性植株即得。本发明通过严格控制真空侵染压强、菌液侵染浓度和侵染时间等参数,可快速、高效的实现辣椒的多种表达载体的转化,最高转化率达到73.81%;此外,本发明操作简单且周期短、无需无菌环境、成本低,更容易实现批量转化操作。

    miR9474调控植物抗坏血酸积累的应用及方法

    公开(公告)号:CN117264994A

    公开(公告)日:2023-12-22

    申请号:CN202311042361.8

    申请日:2023-08-17

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,尤其涉及miR9474调控植物抗坏血酸积累的应用及方法。本发明基于差异积累抗坏血酸的番茄材料进行小RNA测序,筛选出差异表达miRNA,根据预测获得的miRNA靶基因信息,与已报道的番茄抗坏血酸(AsA)生物合成途径基因进行比对,筛选出调控番茄AsA生物合成的关键miRNA—miR9474,miR9474对番茄AsA表现出负调控关系。miR9474可以通过降低靶基因SlGMP、SlGalUR的表达量进而影响AsA合成和积累,为调控植物AsA合成和积累提供了新的调控靶点,同时为改善番茄品质与提高番茄抗性提供了新的育种思路。

    GSK3家族同源基因在调控番茄果实形状中的应用

    公开(公告)号:CN116590335A

    公开(公告)日:2023-08-15

    申请号:CN202310218537.4

    申请日:2023-03-07

    Abstract: 本发明属于基因编辑技术领域,具体涉及GSK3家族同源基因在调控番茄果实形状中的应用。所述GSK3家族同源基因为SlGSK4、SlGSK6和SlGSK8基因。本发明分别设计了该三个基因的靶点,并构建含有这些靶点的表达盒和重组表达载体,将重组表达载体转入农杆菌培养,挑选出阳性克隆侵染番茄子叶外植体,经诱导生芽、生根培养、提取DNA进行编辑鉴定和移栽、观察和统计分析纯合突变体的表型等步骤,发现单突变体的果实形状基本不变,三突变体果实形状显著变长。说明SlGSK4、SlGSK6、SlGSK8三个基因同时突变时能显著调控番茄果实形状,为番茄果实形状改良提供了新的基因资源和方法。

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