公开(公告)号：CN117625755A

公开(公告)日：2024-03-01

申请号：CN202210975288.9

申请日：2022-08-15

Applicant: 北京大学第一医院

Inventor： 李学松 ,  周利群 ,  何世明 ,  熊耕砚 ,  夏漫城

IPC: C12Q1/6858 ,  C12Q1/6806 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了GDF15基因甲基化检测方法，包括以下步骤：步骤一，引物设计；步骤二，样本收集；步骤三，核酸提取；步骤四，亚硫酸氢盐转化；步骤五，甲基化检测；本发明采用耐U特异性Taq酶进行PCR扩增，避免了普通Taq酶和高保真Taq酶与亚硫酸氢盐转化过程中大量未甲基化的C转变为U，造成无法PCR扩增的情况出现；利用以亚硫酸氢盐转化产物为模板，分别测试不同退火温度下的PCR扩增情况，温度梯度为55℃，56℃，57℃，58℃，59℃，60℃，61℃，62℃，保证适宜的反应温度；对于GDF15基因甲基化修饰的实验流程合理高效，对不同浓度的引物进行测试，得出0.4μM浓度的时候的GDF15‑F4/R4引物对的扩增效果最好，有利于保证引物对的合理选择。

公开(公告)号：CN117587123A

公开(公告)日：2024-02-23

申请号：CN202210974727.4

申请日：2022-08-15

Applicant: 北京大学第一医院

Inventor： 周利群 ,  李学松 ,  熊耕砚 ,  何世明 ,  夏漫城

IPC: C12Q1/6886 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了TMEFF2基因启动子甲基化检测方法，包括以下步骤：步骤一，引物设计；步骤二，样本收集；步骤三，样本核酸提取；步骤四，亚硫酸氢盐转化；步骤五，TMEFF2基因启动子区甲基化序列检测；本发明相较于现有的TMEFF2生物标志物蛋白水平的检测，通过对TMEFF2基因甲基化状态进行检测，可以更早的发现基因表达水平的变化，能够在早期发现相应标志物的表达趋势，进而对疾病状态做出相应的预测，有利于判断受检者的患病风险，实现早筛早诊；本发明采用了最优的Taq酶、退火温度、引物对、引物浓度和模板input量设计，以及精确的参数控制，保证了检测结果的准确性，所提供的详细操作过程对基因甲基化检测具有重要的指导意义。

公开(公告)号：CN116063264A

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202310361478.6

申请日：2023-04-06

Applicant: 北京大学第一医院

Inventor： 关瑞礼 ,  谭晓辉 ,  李学松 ,  袁亦铭 ,  方冬 ,  夏漫城

IPC: C07D311/30 ,  A61P9/00 ,  A61P15/10

Abstract: 本发明涉及医药合成技术领域，具体提供了一种改善内皮功能障碍的化合物的制备方法，创新地先以式1所示的化合物与式2所示的化合物在催化剂的作用下反应得到式3所示的化合物，然后式3所示的化合物与式4所示的化合物在催化剂的作用下反应，酸化后得到式5所示的化合物，再式5所示的化合物在吡啶的存在下与碘单质进行反应，得到4'‑甲基醚金连木黄酮。本发明工艺路线合理、原料易得、操作简单、生产成本降低，是一种经济的可规模化制备4'‑甲基醚金连木黄酮的方法。