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公开(公告)号：CN114878289B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210812369.7
申请日：2022-07-12
Applicant: 北京大学
IPC: G01N1/34 , G01N23/20008 , G01N23/04
Abstract: 本发明公开了一种耐低温低盐的蓝藻藻胆体样品的制备方法。与常规的蓝藻藻胆体体外纯化方法相比，本发明包含了一特殊处理步骤：在蔗糖梯度纯化的磷酸盐缓冲液中加入终浓度为0.0075~0.015%（w/v）的1,5‑戊二醛（GA）和10~500 nM的BS3两种交联剂。所得到的藻胆体样品在4℃和10 mM磷酸盐的低温低盐条件下，可以在48 h内维持其稳定结构，而不会解聚。该耐低温低盐的藻胆体为冷冻电镜解析藻胆体结构，体外研究藻胆体与光系统复合体的相互作用以及能量传递的机制等提供了可能性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113025545B
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN202110264337.3
申请日：2021-03-11
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种高效固氮的蓝藻工程菌及其制备方法和应用，通过敲除野生型鱼腥藻PCC 7120的细胞分裂相关因子FTN的基因，得到异形胞体积约是正常异形胞体积2倍大小的鱼腥藻工程菌△FTN。该鱼腥藻工程菌△FTN的固氮酶活性是野生型的2.3倍，且生长速度较快，代时约为20小时，具有在农业上推广应用的前景，为固氮蓝藻在农业生产上的应用提供了一个新的选择。
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公开(公告)号：CN113025545A
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN202110264337.3
申请日：2021-03-11
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种高效固氮的蓝藻工程菌及其制备方法和应用，通过敲除野生型鱼腥藻PCC 7120的细胞分裂相关因子FTN的基因，得到异形胞体积约是正常异形胞体积2倍大小的鱼腥藻工程菌△FTN。该鱼腥藻工程菌△FTN的固氮酶活性是野生型的2.3倍，且生长速度较快，代时约为20小时，具有在农业上推广应用的前景，为固氮蓝藻在农业生产上的应用提供了一个新的选择。
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公开(公告)号：CN110846340A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201911148764.4
申请日：2019-11-21
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种一步转化进行蓝藻基因无痕敲除的方法，通过一步遗传转化将两个同向loxP序列以及序列之间包括的诱导型启动子驱动的Cre基因和选择标记基因序列替换目的基因，然后利用诱导型启动子诱导Cre重组酶的表达，最终获得无痕敲除的突变体。该方法只需要进行一步遗传转化，通过控制培养基中诱导条件来达到蓝藻基因的无痕敲除，大幅度缩短了在蓝藻中进行无痕敲除的时间，且能降低培养成本，减少抗生素使用和基因对环境的污染，也为今后更快速地开发各种优质无抗性的蓝藻工程菌底盘生物提供了一种方法。
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公开(公告)号：CN114878289A
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202210812369.7
申请日：2022-07-12
Applicant: 北京大学
IPC: G01N1/34 , G01N23/20008 , G01N23/04
Abstract: 本发明公开了一种耐低温低盐的蓝藻藻胆体样品的制备方法。与常规的蓝藻藻胆体体外纯化方法相比，本发明包含了一特殊处理步骤：在蔗糖梯度纯化的磷酸盐缓冲液中加入终浓度为0.0075~0.015%（w/v）的1,5‑戊二醛（GA）和10~500 nM的BS3两种交联剂。所得到的藻胆体样品在4℃和10 mM磷酸盐的低温低盐条件下，可以在48 h内维持其稳定结构，而不会解聚。该耐低温低盐的藻胆体为冷冻电镜解析藻胆体结构，体外研究藻胆体与光系统复合体的相互作用以及能量传递的机制等提供了可能性。
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公开(公告)号：CN110846340B
公开(公告)日：2021-03-23
申请号：CN201911148764.4
申请日：2019-11-21
Applicant: 北京大学
Abstract: 本发明公开了一种一步转化进行蓝藻基因无痕敲除的方法，通过一步遗传转化将两个同向loxP序列以及序列之间包括的诱导型启动子驱动的Cre基因和选择标记基因序列替换目的基因，然后利用诱导型启动子诱导Cre重组酶的表达，最终获得无痕敲除的突变体。该方法只需要进行一步遗传转化，通过控制培养基中诱导条件来达到蓝藻基因的无痕敲除，大幅度缩短了在蓝藻中进行无痕敲除的时间，且能降低培养成本，减少抗生素使用和基因对环境的污染，也为今后更快速地开发各种优质无抗性的蓝藻工程菌底盘生物提供了一种方法。
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