公开(公告)号：CN110699493A

公开(公告)日：2020-01-17

申请号：CN201911224525.2

申请日：2019-12-04

申请人： 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所 ,  吉林农业大学

发明人： 冯娜 ,  高玉伟 ,  王建忠 ,  黄培 ,  王铁成 ,  赵永坤 ,  杨松涛 ,  夏咸柱

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开了一种用于大熊猫犬瘟热病毒检测的引物、探针及试剂盒，引物及探针的设计以大熊猫源犬瘟热病毒giant panda/SX/2014株(Genbank：KP793921)为模板，旨在提高检测特异性，与犬细小病毒(CPV)、犬冠状病毒(CCV)、犬副流感病毒(CPIV)、犬轮状病毒(CRV)等其他病毒不存在交叉反应，在用于大熊猫犬瘟热病毒检测时，灵敏度高，检出限为5×101拷贝/μL，检测结果稳定可靠，与现有RT-PCR方法具有很高的符合度，可以实现便携式的现场快速诊断。

公开(公告)号：CN116656730B

公开(公告)日：2024-03-19

申请号：CN202310594359.5

申请日：2023-05-25

申请人： 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所

发明人： 冯娜 ,  孟宪踊 ,  闫飞虎 ,  王铁成 ,  王建忠 ,  高玉伟 ,  赵永坤 ,  夏咸柱

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/39 ,  C12N15/47 ,  C12N15/65 ,  C12N15/90 ,  C12N15/113 ,  C12N7/01 ,  C12R1/93

摘要： 本发明公开了一种表达狂犬病病毒G、M蛋白的重组金丝雀痘病毒及其构建方法，相较于传统的同源重组方法不仅提高了构建重组病毒的成功率，同时引入的荧光标记蛋白使病毒的筛选过程可视化，经过3‑5轮病毒噬斑筛选，即可获得纯化的重组病毒，大大减少了大量复杂繁琐的筛选、纯化过程，缩短了获得重组病毒的时间，提高了效率。通过本发明方法构建的重组金丝雀痘病毒，相较于原始病毒基因组替换了串联表达的基因，可以同时表达狂犬病病毒G和M蛋白，并在感染细胞时形成病毒样颗粒，因此可为狂犬病免疫预防提供候选疫苗株，应用于疫苗免疫时可以发挥其免疫效应，拓展了CRISPR/Cas9技术的应用范围，为狂犬病病毒疫苗开发提供了新的方向。

公开(公告)号：CN116656730A

公开(公告)日：2023-08-29

申请号：CN202310594359.5

申请日：2023-05-25

申请人： 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所

发明人： 冯娜 ,  孟宪踊 ,  闫飞虎 ,  王铁成 ,  王建忠 ,  高玉伟 ,  赵永坤 ,  夏咸柱

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/39 ,  C12N15/47 ,  C12N15/65 ,  C12N15/90 ,  C12N15/113 ,  C12N7/01 ,  C12R1/93

摘要： 本发明公开了一种表达狂犬病病毒G、M蛋白的重组金丝雀痘病毒及其构建方法，相较于传统的同源重组方法不仅提高了构建重组病毒的成功率，同时引入的荧光标记蛋白使病毒的筛选过程可视化，经过3‑5轮病毒噬斑筛选，即可获得纯化的重组病毒，大大减少了大量复杂繁琐的筛选、纯化过程，缩短了获得重组病毒的时间，提高了效率。通过本发明方法构建的重组金丝雀痘病毒，相较于原始病毒基因组替换了串联表达的基因，可以同时表达狂犬病病毒G和M蛋白，并在感染细胞时形成病毒样颗粒，因此可为狂犬病免疫预防提供候选疫苗株，应用于疫苗免疫时可以发挥其免疫效应，拓展了CRISPR/Cas9技术的应用范围，为狂犬病病毒疫苗开发提供了新的方向。