一种牛副流感3型病毒3种基因型多重RT-PCR检测方法

    公开(公告)号:CN107058630B

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN201710314596.6

    申请日:2017-05-06

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/686 C12R1/93

    摘要: 根据Genbank上发表的牛副流感3型病毒(Bovine parainfluenza 3 virus,BPI3V)3种基因型分离株的HN基因进行序列比较分析,参考3个基因型分离株NM09、TVMDL15、SD0835各自的HN基因序列保守区设计特异性引物,建立了在同一体系内检测BPI3V的3种基因型的多重RT‑PCR方法。方法可同时检测出A型BPI3V长度为150bp、B型BPI3V长度为253bp和C型BPI3V长度为342bp的特异性片段,且最低阳性质粒检测分别为0.89×104copies/µL、0.92×104copies/µL、1.53×104copies/µL,具有良好的稳定性和特异性。

    用于检测猪流行性腹泻病毒的单域重链抗体、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN108892723B

    公开(公告)日:2021-09-21

    申请号:CN201810761629.6

    申请日:2018-07-12

    摘要: 本发明公开了一种用于检测猪流行性腹泻病毒的单域重链抗体、制备方法及应用。本发明采用猪流行性腹泻病毒免疫阿拉善双峰驼,利用其外周血淋巴细胞建立针对猪流行性腹泻病毒的单域重链抗体库,将表达纯化的猪流行性腹泻病毒S蛋白偶联在酶标板上作为抗原,利用噬菌体展示技术对单域重链抗体库进行免疫性筛选,获得针对猪流行性腹泻病毒S蛋白的单域重链抗体基因,将单域重链抗体基因转入大肠杆菌中,建立在大肠杆菌中高效表达的单域重链抗体株,分析每个单域重链抗体株的基因序列,获得针对猪流行性腹泻病毒S蛋白的单域重链抗体VHH链的氨基酸序列SEQ ID NO.8。本发明的抗体稳定性和特异性良好,可用于检测和治疗PEDV。