增强的蛋白质表达及其方法

    公开(公告)号:CN108473946A

    公开(公告)日:2018-08-31

    申请号:CN201680077278.6

    申请日:2016-10-27

    IPC分类号: C12N1/20 C12N9/12

    摘要: 本公开总体上涉及产生增加量的一种或多种目的蛋白的经修饰的革兰氏阳性细菌细胞和具有增强的遗传感受态的经修饰的革兰氏阳性细菌细胞。因此,本公开的某些实施例涉及相对于表达目的蛋白的未修饰(亲本)革兰氏阳性细菌细胞,表达增加量的相同目的蛋白的经修饰的革兰氏阳性细菌细胞,其中所述经修饰的细菌细胞在编码变体RNA聚合酶(RNAP)β'-亚基多肽的rpoC基因中包含至少一个突变。在某些实施例中,将所述编码变体β'-亚基多肽的rpoC基因整合到所述经修饰的细胞的染色体中。在其他实施例中,将所述编码变体β'-亚基多肽的rpoC基因包含在引入所述经修饰的细胞的染色体外质粒中。在其他实施例中,本公开涉及感受态芽孢杆菌属宿主细胞,所述感受态芽孢杆菌属宿主细胞包含至少一个拷贝的核酸构建体,其编码经修饰的rpoC多肽,所述经修饰的rpoC多肽包含与SEQ ID NO:8的90%的序列同一性和在SEQ ID NO:8的位置796处的天冬氨酸至甘氨酸的取代,其中所述编码rpoC多肽的多核苷酸对于在引入所述第一核酸构建体之前是非感受态的芽孢杆菌属宿主细胞而言是外源的。

    增强的蛋白质表达及其方法

    公开(公告)号:CN108473946B

    公开(公告)日:2023-01-03

    申请号:CN201680077278.6

    申请日:2016-10-27

    IPC分类号: C12N1/20 C12N9/12

    摘要: 本公开总体上涉及产生增加量的一种或多种目的蛋白的经修饰的革兰氏阳性细菌细胞和具有增强的遗传感受态的经修饰的革兰氏阳性细菌细胞。因此,本公开的某些实施例涉及相对于表达目的蛋白的未修饰(亲本)革兰氏阳性细菌细胞,表达增加量的相同目的蛋白的经修饰的革兰氏阳性细菌细胞,其中所述经修饰的细菌细胞在编码变体RNA聚合酶(RNAP)β'‑亚基多肽的rpoC基因中包含至少一个突变。在某些实施例中,将所述编码变体β'‑亚基多肽的rpoC基因整合到所述经修饰的细胞的染色体中。在其他实施例中,将所述编码变体β'‑亚基多肽的rpoC基因包含在引入所述经修饰的细胞的染色体外质粒中。在其他实施例中,本公开涉及感受态芽孢杆菌属宿主细胞,所述感受态芽孢杆菌属宿主细胞包含至少一个拷贝的核酸构建体,其编码经修饰的rpoC多肽,所述经修饰的rpoC多肽包含与SEQ ID NO:8的90%的序列同一性和在SEQ ID NO:8的位置796处的天冬氨酸至甘氨酸的取代,其中所述编码rpoC多肽的多核苷酸对于在引入所述第一核酸构建体之前是非感受态的芽孢杆菌属宿主细胞而言是外源的。