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公开(公告)号:CN107278230B
公开(公告)日:2021-10-29
申请号:CN201580076140.X
申请日:2015-12-11
Applicant: 丹尼斯科美国公司
Abstract: 本发明总体上涉及具有导致感兴趣的蛋白质的表达增加的遗传改变的细菌细胞,以及制造和使用此类细胞的方法。本发明的方面包含具有遗传改变的革兰氏阳性微生物,如芽孢杆菌属的成员,该遗传改变延迟、降低、或阻断用于孢子形成的基因的表达或激活,从而导致感兴趣的蛋白质表达的增强。该遗传改变是降低kinA基因、phrA基因或phrE基因的表达的遗传改变。
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公开(公告)号:CN108473946A
公开(公告)日:2018-08-31
申请号:CN201680077278.6
申请日:2016-10-27
Applicant: 丹尼斯科美国公司
CPC classification number: C12N9/1247 , C12P21/00 , C12P21/02
Abstract: 本公开总体上涉及产生增加量的一种或多种目的蛋白的经修饰的革兰氏阳性细菌细胞和具有增强的遗传感受态的经修饰的革兰氏阳性细菌细胞。因此,本公开的某些实施例涉及相对于表达目的蛋白的未修饰(亲本)革兰氏阳性细菌细胞,表达增加量的相同目的蛋白的经修饰的革兰氏阳性细菌细胞,其中所述经修饰的细菌细胞在编码变体RNA聚合酶(RNAP)β'-亚基多肽的rpoC基因中包含至少一个突变。在某些实施例中,将所述编码变体β'-亚基多肽的rpoC基因整合到所述经修饰的细胞的染色体中。在其他实施例中,将所述编码变体β'-亚基多肽的rpoC基因包含在引入所述经修饰的细胞的染色体外质粒中。在其他实施例中,本公开涉及感受态芽孢杆菌属宿主细胞,所述感受态芽孢杆菌属宿主细胞包含至少一个拷贝的核酸构建体,其编码经修饰的rpoC多肽,所述经修饰的rpoC多肽包含与SEQ ID NO:8的90%的序列同一性和在SEQ ID NO:8的位置796处的天冬氨酸至甘氨酸的取代,其中所述编码rpoC多肽的多核苷酸对于在引入所述第一核酸构建体之前是非感受态的芽孢杆菌属宿主细胞而言是外源的。
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公开(公告)号:CN109071615A
公开(公告)日:2018-12-21
申请号:CN201780025872.5
申请日:2017-03-06
Applicant: 丹尼斯科美国公司
Abstract: 本公开总体上涉及来自芽孢杆菌属的新颖工程化杂合核糖体启动子。在某些实施例中,本公开涉及一种或多种核酸组合物,其包含与编码目的蛋白质的核酸有效地连接的所述工程化启动子。因此,本文所阐述的公开描述了使用本公开的一种或多种新颖工程化杂合核糖体启动子产生目的蛋白质的方法和组合物。
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公开(公告)号:CN104053780A
公开(公告)日:2014-09-17
申请号:CN201280059922.9
申请日:2012-12-06
Applicant: 丹尼斯科美国公司
IPC: C12N15/75
CPC classification number: C12N9/54 , C12N15/75 , C12Y304/21062
Abstract: 本发明提供了微生物中改善的表达系统的方法和组合物。所述方法和组合物包含来源于芽孢杆菌属(Bacillus)菌种微生物的核糖体启动子,例如核糖体RNA启动子或核糖体蛋白启动子。
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公开(公告)号:CN108779154B
公开(公告)日:2022-12-27
申请号:CN201680082390.9
申请日:2016-12-21
Applicant: 丹尼斯科美国公司
Abstract: 本公开总体上涉及产生增加的量的一种或多种目的蛋白质的经修饰的革兰氏阳性细菌细胞。因此本公开的某些实施例针对相对于未经修饰的(即,亲本)革兰氏阳性细菌细胞,表达增加的量的POI的经修饰的革兰氏阳性细菌细胞,其中所述经修饰的(即,子)细菌细胞包含增加rasP基因表达的修饰。在某些实施例中,本公开涉及修饰细菌细胞的方法,使得经修饰的(子)细胞产生增加水平的目的蛋白质。在其他实施例中,本公开涉及通过发酵本公开的经修饰的细菌细胞产生的目的蛋白质。本公开的某些其他实施例针对包含如此制备的一种或多种目的蛋白质的一种或多种蛋白质性组合物。
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