公开(公告)号：CN108103090B

公开(公告)日：2021-06-15

申请号：CN201711334357.3

申请日：2017-12-12

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 纪卫东 ,  应小玲 ,  张海青 ,  王敏

IPC: C12N15/79 ,  C12N15/66 ,  C12N15/52 ,  A61K31/711

Abstract: 本发明公开了一种靶向mRNA的6‑甲基腺嘌呤修饰载体系统，所述载体系统包括失活的Cas9核酸酶融合6‑甲基腺嘌呤修饰酶的酶活性功能区的蛋白表达载体、靶向CDCP1的mRNA的3’UTR区中至少一个位点的sgRNA表达载体以及与作为标靶的mRNA错配的寡核苷酸。同时，本发明还公开了靶向mRNA的6‑甲基腺嘌呤修饰载体系统的制备方法及其应用。采用本发明的6‑甲基腺嘌呤修饰载体系统，可以对RNA 6‑甲基腺嘌呤修饰异常引起的疾病进行靶向修饰6‑甲基腺嘌呤，准确而高效，可以从根本上治疗RNA修饰缺陷引起的疾病。

公开(公告)号：CN106047877B

公开(公告)日：2019-01-11

申请号：CN201610487032.8

申请日：2016-06-24

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 纪卫东 ,  苏甲林 ,  阙彪 ,  张海青 ,  王敏

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种靶向敲除FTO基因的sgRNA及CRISPR/Cas9慢病毒系统与应用。该sgRNA选自DNA序列如下的FTOsgRNAsp2或FTOsgRNAsp3。该sgRNA对FTO基因的切割效率高。将含有该sgRNA的CRISPR/Cas9慢病毒系统转染SV‑HUC‑1，得到的细胞株FTO蛋白表达水平显著降低。因此，本发明提供的sgRNA能有效靶向敲除FTO基因，将其构建入CRISPR/Cas9慢病毒系统，该系统能敲除FTO基因，得到敲除FTO基因的细胞株，从而有利于研究细胞株中的FTO的作用机制。

公开(公告)号：CN106047877A

公开(公告)日：2016-10-26

申请号：CN201610487032.8

申请日：2016-06-24

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 纪卫东 ,  苏甲林 ,  阙彪 ,  张海青 ,  王敏

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10

CPC classification number: C12N15/1137 ,  C12N9/0071 ,  C12N15/66 ,  C12N15/86 ,  C12N2310/10 ,  C12N2740/15043 ,  C12N2800/107 ,  C12N2800/80 ,  C12N2810/10 ,  C12Y114/11033

Abstract: 本发明公开了一种靶向敲除FTO基因的sgRNA及CRISPR/Cas9慢病毒系统与应用。该sgRNA选自DNA序列如下的FTOsgRNAsp2或FTOsgRNAsp3。该sgRNA对FTO基因的切割效率高。将含有该sgRNA的CRISPR/Cas9慢病毒系统转染SV‑HUC‑1，得到的细胞株FTO蛋白表达水平显著降低。因此，本发明提供的sgRNA能有效靶向敲除FTO基因，将其构建入CRISPR/Cas9慢病毒系统，该系统能敲除FTO基因，得到敲除FTO基因的细胞株，从而有利于研究细胞株中的FTO的作用机制。

公开(公告)号：CN111440826A

公开(公告)日：2020-07-24

申请号：CN202010184015.3

申请日：2020-03-16

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 纪卫东 ,  应小玲 ,  张海青

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明涉及一种RNA编辑技术领域，尤指一种靶向RNA的6-甲基腺嘌呤修饰CasRx载体系统及制备方法和应用，所述的载体系统包括失活的CasRx核酸酶融合6-甲基腺嘌呤修饰酶的酶活性功能区的蛋白表达载体、寡核苷酸，以及包括启动子序列、基于靶点序列的gRNA、gRNA支架序列和酶切位点序列的表达载体；本发明采用的载体系统可以对RNA修饰异常引起的疾病进行靶向修饰6-甲基腺嘌呤，准确而高效，可以从根本上治疗RNA修饰缺陷引起的疾病。

公开(公告)号：CN108103090A

公开(公告)日：2018-06-01

申请号：CN201711334357.3

申请日：2017-12-12

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 纪卫东 ,  应小玲 ,  张海青 ,  王敏

IPC: C12N15/79 ,  C12N15/66 ,  C12N15/52 ,  A61K31/711

Abstract: 本发明公开了一种靶向mRNA的6‑甲基腺嘌呤修饰载体系统，所述载体系统包括失活的Cas9核酸酶融合6‑甲基腺嘌呤修饰酶的酶活性功能区的蛋白表达载体、靶向CDCP1的mRNA的3’UTR区中至少一个位点的sgRNA表达载体以及与作为标靶的mRNA错配的寡核苷酸。同时，本发明还公开了靶向mRNA的6‑甲基腺嘌呤修饰载体系统的制备方法及其应用。采用本发明的6‑甲基腺嘌呤修饰载体系统，可以对RNA 6‑甲基腺嘌呤修饰异常引起的疾病进行靶向修饰6‑甲基腺嘌呤，准确而高效，可以从根本上治疗RNA修饰缺陷引起的疾病。