公开(公告)号：CN108103090B

公开(公告)日：2021-06-15

申请号：CN201711334357.3

申请日：2017-12-12

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 纪卫东 ,  应小玲 ,  张海青 ,  王敏

IPC: C12N15/79 ,  C12N15/66 ,  C12N15/52 ,  A61K31/711

Abstract: 本发明公开了一种靶向mRNA的6‑甲基腺嘌呤修饰载体系统，所述载体系统包括失活的Cas9核酸酶融合6‑甲基腺嘌呤修饰酶的酶活性功能区的蛋白表达载体、靶向CDCP1的mRNA的3’UTR区中至少一个位点的sgRNA表达载体以及与作为标靶的mRNA错配的寡核苷酸。同时，本发明还公开了靶向mRNA的6‑甲基腺嘌呤修饰载体系统的制备方法及其应用。采用本发明的6‑甲基腺嘌呤修饰载体系统，可以对RNA 6‑甲基腺嘌呤修饰异常引起的疾病进行靶向修饰6‑甲基腺嘌呤，准确而高效，可以从根本上治疗RNA修饰缺陷引起的疾病。

公开(公告)号：CN117757907A

公开(公告)日：2024-03-26

申请号：CN202311776802.7

申请日：2023-12-22

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 纪卫东 ,  应小玲

IPC: C12Q1/686 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/6806 ,  A61K31/7088 ,  A61P35/00

Abstract: 本申请涉及一种m7G修饰tsRNA的检测和提取方法，属于生物小分子技术领域。本申请首先将提取得到的总RNA与抗体‑磁珠结合物孵育，抽提与磁珠结合的RNA，抗体沉淀下来的RNA经处理后5′端磷酸化；随后，将一个5′RNA接头连接到tsRNA，然后针对tsRNA设计特定茎环反转录引物并进行茎环法逆转录；再是设计定量PCR引物，使用qPCR或PCR法进行PCR，实现对m7G修饰tsRNA的检测及定量。RIP能够在总RNA中分离出m7G修饰的RNA，茎环法逆转录则是针对目标tsRNA进行逆转录，具有高度特异性，结合qPCR进行定量或PCR进行检测，弥补了现有技术中无法检测m7G修饰tsRNA的缺陷。

公开(公告)号：CN111440826A

公开(公告)日：2020-07-24

申请号：CN202010184015.3

申请日：2020-03-16

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 纪卫东 ,  应小玲 ,  张海青

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/85 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明涉及一种RNA编辑技术领域，尤指一种靶向RNA的6-甲基腺嘌呤修饰CasRx载体系统及制备方法和应用，所述的载体系统包括失活的CasRx核酸酶融合6-甲基腺嘌呤修饰酶的酶活性功能区的蛋白表达载体、寡核苷酸，以及包括启动子序列、基于靶点序列的gRNA、gRNA支架序列和酶切位点序列的表达载体；本发明采用的载体系统可以对RNA修饰异常引起的疾病进行靶向修饰6-甲基腺嘌呤，准确而高效，可以从根本上治疗RNA修饰缺陷引起的疾病。

公开(公告)号：CN108103090A

公开(公告)日：2018-06-01

申请号：CN201711334357.3

申请日：2017-12-12

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 纪卫东 ,  应小玲 ,  张海青 ,  王敏

IPC: C12N15/79 ,  C12N15/66 ,  C12N15/52 ,  A61K31/711

Abstract: 本发明公开了一种靶向mRNA的6‑甲基腺嘌呤修饰载体系统，所述载体系统包括失活的Cas9核酸酶融合6‑甲基腺嘌呤修饰酶的酶活性功能区的蛋白表达载体、靶向CDCP1的mRNA的3’UTR区中至少一个位点的sgRNA表达载体以及与作为标靶的mRNA错配的寡核苷酸。同时，本发明还公开了靶向mRNA的6‑甲基腺嘌呤修饰载体系统的制备方法及其应用。采用本发明的6‑甲基腺嘌呤修饰载体系统，可以对RNA 6‑甲基腺嘌呤修饰异常引起的疾病进行靶向修饰6‑甲基腺嘌呤，准确而高效，可以从根本上治疗RNA修饰缺陷引起的疾病。