公开(公告)号：CN108753681B

公开(公告)日：2022-02-15

申请号：CN201810400123.2

申请日：2018-04-28

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 李春炜 ,  洪玥 ,  何根 ,  谢曦

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种鼻上皮干细胞培养方法，包括以下步骤：1)在培养皿中铺被滋养层细胞；2)从鼻黏膜组织中分离鼻上皮干细胞原代细胞；3)将鼻上皮干细胞原代细胞铺在滋养层细胞上，将培养基替换为鼻上皮干细胞增殖培养基，移除其余的组织细胞；4)当鼻上皮干细胞增殖到80％密度，通过胰酶消化，传代继续扩增；5)将鼻上皮干细胞转移到气‑液相培养体系和PneumaCult‑ALI分化培养基进行分化培养。本发明还公开了一种鼻上皮干细胞增殖培养基，包括以下组分：DMEM/F12、胎牛血清、青霉素、链霉素、胰岛素、表皮生长因子、氢化可的松、3,3',5‑三碘‑L‑甲腺原氨酸钠、ROCK抑制剂。本发明为鼻上皮干细胞临床移植的转化应用提供关键的实施基础。

公开(公告)号：CN108753681A

公开(公告)日：2018-11-06

申请号：CN201810400123.2

申请日：2018-04-28

Applicant: 中山大学附属第一医院

Inventor： 李春炜 ,  洪玥 ,  何根 ,  谢曦

IPC: C12N5/071

CPC classification number: C12N5/0625 ,  C12N2501/11 ,  C12N2501/30 ,  C12N2501/33

Abstract: 本发明公开了一种鼻上皮干细胞培养方法，包括以下步骤：1)在培养皿中铺被滋养层细胞；2)从鼻黏膜组织中分离鼻上皮干细胞原代细胞；3)将鼻上皮干细胞原代细胞铺在滋养层细胞上，将培养基替换为鼻上皮干细胞增殖培养基，移除其余的组织细胞；4)当鼻上皮干细胞增殖到80％密度，通过胰酶消化，传代继续扩增；5)将鼻上皮干细胞转移到气‑液相培养体系和PneumaCult‑ALI分化培养基进行分化培养。本发明还公开了一种鼻上皮干细胞增殖培养基，包括以下组分：DMEM/F12、胎牛血清、青霉素、链霉素、胰岛素、表皮生长因子、氢化可的松、3,3',5‑三碘‑L‑甲腺原氨酸钠、ROCK抑制剂。本发明为鼻上皮干细胞临床移植的转化应用提供关键的实施基础。