公开(公告)号：CN104928350A

公开(公告)日：2015-09-23

申请号：CN201510136327.6

申请日：2015-03-24

Applicant: 中国药科大学

Inventor： 王广基 ,  彭英 ,  孙建国 ,  吴慧 ,  张雪媛 ,  冯冬 ,  祁欢欢 ,  张凤逸 ,  仲云熙 ,  肖亚楠 ,  尤国皎

IPC: C12Q1/26

Abstract: 本发明公开了应用14种探针底物与16种探针反应全面评估9种人肝CYP450代谢酶体外抑制效应的快速筛选方法。本发明主要涉及采用体外混合探针孵育法与LC/MS/MS联用监测9种人肝CYP450酶的代谢活性变化，快速全面的评估受试化合物对代谢酶的抑制效应。该方法综合考虑了探针底物的专一性与多样性，探针底物之间的相互影响、温孵体系中不同孵育条件(有机溶剂、缓冲液、BSA的加入等)对探针反应的活性影响，以及16种探针反应在所选孵育条件下的酶动力学特征等各项因素，并结合高灵敏度、高选择性的LC-MS/MS技术，建立了一种全新的体外评估体系，以期在新药开发的高通量筛选中能更准确更全面的预测受试化合物对9种人肝主要代谢酶可能产生的抑制效应，提高后期代谢性相互作用的预见性。

公开(公告)号：CN104928350B

公开(公告)日：2017-11-14

申请号：CN201510136327.6

申请日：2015-03-24

Applicant: 中国药科大学

Inventor： 王广基 ,  彭英 ,  孙建国 ,  吴慧 ,  张雪媛 ,  冯冬 ,  祁欢欢 ,  张凤逸 ,  仲云熙 ,  肖亚楠 ,  尤国皎

IPC: C12Q1/26

Abstract: 本发明公开了应用14种探针底物与16种探针反应全面评估9种人肝CYP450代谢酶体外抑制效应的快速筛选方法。本发明主要涉及采用体外混合探针孵育法与LC/MS/MS联用监测9种人肝CYP450酶的代谢活性变化，快速全面的评估受试化合物对代谢酶的抑制效应。该方法综合考虑了探针底物的专一性与多样性，探针底物之间的相互影响、温孵体系中不同孵育条件(有机溶剂、缓冲液、BSA的加入等)对探针反应的活性影响，以及16种探针反应在所选孵育条件下的酶动力学特征等各项因素，并结合高灵敏度、高选择性的LC‑MS/MS技术，建立了一种全新的体外评估体系，以期在新药开发的高通量筛选中能更准确更全面的预测受试化合物对9种人肝主要代谢酶可能产生的抑制效应，提高后期代谢性相互作用的预见性。