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公开(公告)号：CN102952793B
公开(公告)日：2014-01-08
申请号：CN201210388546.X
申请日：2012-10-12
申请人： 中国科学院上海高等研究院
摘要： 本发明公开了一种利用短同源序列进行克雷伯氏肺炎杆菌基因重组的方法，包括：1）PCR扩增抗性基因片段，其中在引物上添加目的重组基因的同源序列；2）抗性基因片段与克隆质粒连接后，转化至大肠杆菌中，经筛选得到克隆质粒；3）以步骤2）得到的克隆质粒为模板，设计引物PCR扩增包含抗性基因、短同源臂以及相邻的上下游序列，得到用于敲除目的基因的同源重组DNA片段；4）将同源重组DNA片段电击转化至含有pDK6-red质粒的克雷伯氏肺炎杆菌感受态细胞内；5）转化后的克雷伯氏肺炎杆菌细胞进行培养，筛选获得阳性重组子。该方法不需要将目的重组基因克隆，简单、快捷，且能进行多次基因操作，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN106148257A
公开(公告)日：2016-11-23
申请号：CN201510171345.8
申请日：2015-04-13
申请人： 中国科学院上海高等研究院
摘要： 本发明公开了一种改造的克雷伯氏肺炎杆菌及其生产葡萄糖酸的应用。该改造的克雷伯氏肺炎杆菌为葡萄糖酸脱氢酶失活的克雷伯氏肺炎杆菌。通过将克雷伯氏肺炎杆菌中葡萄糖酸脱氢酶的编码基因进行失活来获得所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌。利用所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌生产葡萄糖酸，具有较高的底物转化率，较高的生产强度和较高的产物终浓度。
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公开(公告)号：CN105543193B
公开(公告)日：2019-04-30
申请号：CN201610105269.5
申请日：2016-02-26
申请人： 中国科学院上海高等研究院
摘要： 本发明公开了一种N‑酰基高丝氨酸内酯酶及其编码基因和重组菌。所述N‑酰基高丝氨酸内酯酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了含有所述N‑酰基高丝氨酸内酯酶编码基因的重组菌，所述重组菌是将所述N‑酰基高丝氨酸内酯酶编码基因构建大肠杆菌重组表达载体，然后导入到大肠杆菌中，筛选得到表达N‑酰基高丝氨酸内酯酶的转基因重组菌。本发明所述的N‑酰基高丝氨酸内酯酶对不同碳链长度及修饰的N‑酰基高丝氨酸内酯(AHL分子)均有良好的降解作用。
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公开(公告)号：CN102702338B
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201210232705.7
申请日：2012-07-06
申请人： 中国科学院上海高等研究院
CPC分类号： Y02E50/16
摘要： 本发明提供一种提取小麦麸皮蛋白并联产丙酮、丁醇及乙醇的方法，包括如下步骤：将过筛的小麦麸皮用碱液浸泡进行碱提；将碱提产物进行固液分离获得液体与固形物；将分离得到的液体加酸酸沉；获得的沉淀物干燥处理；将分离得到的固形物加水蒸煮，接种丙酮丁醇梭菌后培养获得发酵产物；从发酵液中分离获得丙酮、丁醇及乙醇。本发明可以在工业上大规模提取小麦麸皮蛋白以及联产丙酮丁醇，不仅提高了麸皮的综合利用价值,也为丙酮丁醇发酵开发了一种廉价原料。
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公开(公告)号：CN103045661B
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201310012784.5
申请日：2013-01-14
申请人： 中国科学院上海高等研究院
摘要： 本发明公开了一种利用克雷伯氏肺炎杆菌两段发酵生产2-酮基-D-葡萄糖酸的方法，包括：第一阶段主要进行克雷伯氏肺炎杆菌的菌体生长，第二阶段主要进行2-酮基-D-葡萄糖酸合成。本发明生产2-酮基-D-葡萄糖酸的方法，具有较高底物转化效率，又具有较快的生产强度并获得较高2-酮基-D-葡萄糖酸产物终浓度。
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公开(公告)号：CN106148257B
公开(公告)日：2019-08-13
申请号：CN201510171345.8
申请日：2015-04-13
申请人： 中国科学院上海高等研究院
摘要： 本发明公开了一种改造的克雷伯氏肺炎杆菌及其生产葡萄糖酸的应用。该改造的克雷伯氏肺炎杆菌为葡萄糖酸脱氢酶失活的克雷伯氏肺炎杆菌。通过将克雷伯氏肺炎杆菌中葡萄糖酸脱氢酶的编码基因进行失活来获得所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌。利用所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌生产葡萄糖酸，具有较高的底物转化率，较高的生产强度和较高的产物终浓度。
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公开(公告)号：CN105543193A
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201610105269.5
申请日：2016-02-26
申请人： 中国科学院上海高等研究院
CPC分类号： C12N9/18 , C12Y301/01081
摘要： 本发明公开了一种N-酰基高丝氨酸内酯酶及其编码基因和重组菌。所述N-酰基高丝氨酸内酯酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了含有所述N-酰基高丝氨酸内酯酶编码基因的重组菌，所述重组菌是将所述N-酰基高丝氨酸内酯酶编码基因构建大肠杆菌重组表达载体，然后导入到大肠杆菌中，筛选得到表达N-酰基高丝氨酸内酯酶的转基因重组菌。本发明所述的N-酰基高丝氨酸内酯酶对不同碳链长度及修饰的N-酰基高丝氨酸内酯(AHL分子)均有良好的降解作用。
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公开(公告)号：CN104630100A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201510033927.X
申请日：2015-01-23
申请人： 中国科学院上海高等研究院
摘要： 本发明公开了一种改造的克雷伯氏肺炎杆菌及其生产R-乙偶姻的应用。该改造的克雷伯氏肺炎杆菌为乙偶姻脱氢酶系失活的克雷伯氏肺炎杆菌，所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌还可以为乙偶姻脱氢酶系和乙偶姻还原酶基因budC均失活的克雷伯氏肺炎杆菌。通过将克雷伯氏肺炎杆菌中乙偶姻脱氢酶系的编码基因和调节基因中的一个或多个基因进行失活来获得所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌。利用所述改造的克雷伯氏肺炎杆菌生产R-乙偶姻，能够提高R-乙偶姻的产能，R-乙偶姻的发酵水平和原料转化率均得到提高。
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公开(公告)号：CN102653777B
公开(公告)日：2014-09-10
申请号：CN201210139927.4
申请日：2012-05-08
申请人： 中国科学院上海高等研究院
摘要： 本发明公开了一种利用小麦麸皮发酵生产丙酮-丁醇-乙醇的方法，包括步骤：1）发酵原料预处理；2）接丙酮-丁醇-乙醇菌种发酵；3）发酵液过滤，蒸馏，得到丙酮-丁醇-乙醇产品。本发明利用小麦麸皮中残留的淀粉等碳水化合物进行ABE发酵，不仅为ABE的生产提供了一种经济有效的新途径，而且还提高了小麦麸皮的利用率和附加值，体现出良好的经济效益。
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