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公开(公告)号：CN102239801A
公开(公告)日：2011-11-16
申请号：CN201010172180.3
申请日：2010-05-13
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及涉及一种兰科植物试管内授粉及结实的方法。本发明通过兰科植物组织培养的方法得到子二代植株，有效地缩短了兰科植物尤其是铁皮石斛的育种周期，可将自然状态下4-5年的育种周期缩短到1年之内，培养时间短，成本低，有利于缩短兰花的育种周期，提高育种效率。
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公开(公告)号：CN101892250A
公开(公告)日：2010-11-24
申请号：CN201010162014.5
申请日：2010-04-08
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
Abstract: 本发明涉及一种高产油酸的浅白隐球酵母工程菌株的构建方法，提供一种高产油酸的酵母工程菌株，该载体以pCAMBIA2300为基本骨架，含有千年桐VeSAD基因，可以改变产油酵母脂肪酸成分从而提高油酸含量，该方法的步骤如下：(1)含酶切位点千年桐VeSAD基因cDNA编码区全长序列获得；(2)VeSAD正义表达载体构建；(3)重组农杆菌菌株获得；(4)浅白隐球酵母工程菌株的获得。本发明有益的效果是：本发明将从千年桐种子总RNA中分离的VeSAD基因构建到酵母表达载体pCAMBIA2300上，并采用农杆菌介导法将VeSAD基因导入浅白隐球酵母，使植物脂肪酸合成基因在酵母中高效表达，增加了浅白隐球酵母的产油率，特别是提高了油脂中油酸的含量。
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公开(公告)号：CN101558742A
公开(公告)日：2009-10-21
申请号：CN200910098398.6
申请日：2009-05-12
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明主要涉及一种茶花愈伤组织再生植株的方法，按以下步骤进行：剥去山茶花果实种子的内外种皮，接种在1/2MS培养基上；无菌苗长至3厘米以上时，将小植株幼嫩叶片和茎段接种在愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基为MS+0.5mg·L－16－BA+1.0mg·L－12，4－D；愈伤组织长至直径为1厘米大小时，转移至愈伤组织分化培养基上，愈伤组织分化培养基为MS+mg·L－16－BA20+0.1mg·L－1IBA+mg·L－1KT0.1；不定芽长至0.5cm时进行分离，壮芽培养基为MS+0.2mg·L－16－BA+0.05mg·L－1NAA；当芽条长至4－5cm时，切掉芽条基部，以1000g·L－1的IBA浸泡芽条的基部，然后接种在MW+0.2mg·L－1IBA+0.2mg·L－1NAA的培养基上。本发明的有益效果是：本发明培养基配方简单，操作工艺简便，培养时间短，再生频率高，扩繁系数大，有利于大规模生产珍稀山茶花植株及实现外源基因的遗传转化。
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公开(公告)号：CN110959530A
公开(公告)日：2020-04-07
申请号：CN201911276084.0
申请日：2019-12-12
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种无距虾脊兰野外回归方法。本发明通过组织培养的无距虾脊兰繁殖速度快、繁殖系数大，克服了野外萌发率极低的现状，从种子转化到再生植株的时间极短，确定了适宜无距虾脊兰野外回归的林分环境，提高了无距虾脊兰野外回归的存活率。
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公开(公告)号：CN104012523B
公开(公告)日：2016-03-09
申请号：CN201410230993.1
申请日：2014-05-28
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
IPC: A01N3/00
Abstract: 本发明涉及一种白及种子的包埋玻璃化超低温保存方法。该方法包括如下步骤：采集完整果实，洗净后用乙醇擦拭表面，再用乙醇浸泡，无菌水冲洗，然后用0.1％升汞浸泡，冲洗后吸干，纵向剖开果荚，取出粉末状种子；将种子投入藻酸钠包埋液，搅拌均匀后将其滴入至钙离子包埋液中，置于室温下凝固成包埋珠；将包埋珠置于PVS2溶液中脱水处理20-160min；放入冷冻管中，并加入PVS2溶液，然后将冷冻管置于液氮中冷冻保存；当需要使用种子时，将冷冻管取出，解冻后除去PVS2溶液，并洗涤；将洗涤后的包埋珠接种到固体VW培养基上培养，使种子萌发，待幼苗长至6-10cm高时可驯化移栽。该方法得到的种子萌发率高，且可节约成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101993881A
公开(公告)日：2011-03-30
申请号：CN201010162005.6
申请日：2010-04-08
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
Abstract: 本发明涉及一种高产油酸的丝状真菌工程菌株的构建方法，反义千年桐VeFAD2基因构建在表达载体pBI121质粒上，以pBI121为基本骨架，将千年桐VeFAD2基因反向连接在该载体上，采用农杆菌介导法将VeFAD2基因反向转入少根根霉后，可以改变脂肪酸成分提高油酸含量。该方法的步骤如下：(1)含酶切位点千年桐VeFAD2基因cDNA编码区全长序列获得；(2)VeFAD2反义表达载体构建；(3)农杆菌转化子的获得；(4)少根根霉工程菌株的获得。本发明有益的效果是：本发明将从千年桐种子总RNA中分离的VeFAD2基因构建到表达载体pBI121上，并采用农杆菌介导法将VeFAD2基因反向导入少根根霉，使植物脂肪酸合成基因在酵母中高效表达，提高了油脂中油酸的含量。
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公开(公告)号：CN104012523A
公开(公告)日：2014-09-03
申请号：CN201410230993.1
申请日：2014-05-28
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
IPC: A01N3/00
Abstract: 本发明涉及一种白及种子的包埋玻璃化超低温保存方法。该方法包括如下步骤：采集完整果实，洗净后用乙醇擦拭表面，再用乙醇浸泡，无菌水冲洗，然后用0.1％升汞浸泡，冲洗后吸干，纵向剖开果荚，取出粉末状种子；将种子投入藻酸钠包埋液，搅拌均匀后将其滴入至钙离子包埋液中，置于室温下凝固成包埋珠；将包埋珠置于PVS2溶液中脱水处理20-160min；放入冷冻管中，并加入PVS2溶液，然后将冷冻管置于液氮中冷冻保存；当需要使用种子时，将冷冻管取出，解冻后除去PVS2溶液，并洗涤；将洗涤后的包埋珠接种到固体VW培养基上培养，使种子萌发，待幼苗长至6-10cm高时可驯化移栽。该方法得到的种子萌发率高，且可节约成本。
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公开(公告)号：CN101558742B
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN200910098398.6
申请日：2009-05-12
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明主要涉及一种茶花愈伤组织再生植株的方法，按以下步骤进行：剥去山茶花果实种子的内外种皮，接种在1/2MS培养基上；无菌苗长至3厘米以上时，将小植株幼嫩叶片和茎段接种在愈伤组织诱导培养基上，愈伤组织诱导培养基为MS+0.5mg·L-16-BA+1.0mg·L-12，4-D；愈伤组织长至直径为1厘米大小时，转移至愈伤组织分化培养基上，愈伤组织分化培养基为MS+mg·L-16-BA20+0.1mg·L-1IBA+mg·L-1KT0.1；不定芽长至0.5cm时进行分离，壮芽培养基为MS+0.2mg·L-16-BA+0.05mg·L-1NAA；当芽条长至4-5cm时，切掉芽条基部，以1000g·L-1的IBA浸泡芽条的基部，然后接种在MW+0.2mg·L-1IBA+0.2mg·L-1NAA的培养基上。本发明的有益效果是：本发明培养基配方简单，操作工艺简便，培养时间短，再生频率高，扩繁系数大，有利于大规模生产珍稀山茶花植株及实现外源基因的遗传转化。
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公开(公告)号：CN101665802A
公开(公告)日：2010-03-10
申请号：CN200910152864.4
申请日：2009-09-18
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
Abstract: 本发明主要涉及一种用Zeocin筛选千年桐SAD基因的产油酵母表达载体，该载体以pCAMBIA2300为基本骨架，产油酵母表达载体含有千年桐SAD基因，或同时含有Sh ble基因；其构建方法步骤如下：1.千年桐SAD基因cDNA编码区全长序列获得；2.SAD正义表达载体构建；3.Zeocin抗性标记基因Sh ble的克隆；4、酵母表达载体构建及农杆菌转化。本发明有益的效果：本发明将从千年桐种子总RNA中分离的SAD基因构建到酵母表达载体pCAMBIA2300上，为产油酵母油酸含量的提高提供基因转移供体。本发明根据毕赤酵母表达载体pPICZ B设计引物分离了Zeocin抗性基因Sh ble，与上述重组载体连接组成新载体，大大简化了产油酵母遗传转化过程，对于筛选具有Zeocin抗性的转SAD基因的产油酵母具有重要作用。
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公开(公告)号：CN101558743A
公开(公告)日：2009-10-21
申请号：CN200910098400.X
申请日：2009-05-12
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明主要涉及一种山茶未成熟胚再生胚状体的方法，按以下步骤进行：将种子剥去内外种皮，去除胚根和胚芽，将子叶切成薄片，接种在胚状体诱导培养基上，培养温度为25±2℃，光照光强为2500～3000Lx，光照时间为12h/d，胚状体诱导培养基为MS+1.0mg·L－16－BA+0.2mg·L－1NAA；将诱导的子叶形胚状体从母体上分离下来，接种在胚状体生长培养基上，胚状体生长培养基为MS+0.16－BA mg·L－1+0.01NAA mg·L－1+40g·L－1sugar，在苗高1－2厘米时移至1/2MS培养基上。本发明的有益效果是：本发明培养基配方简单，操作工艺简便，培养时间短，再生频率高，成本低，有利于大规模生产山茶及实现外源基因的遗传转化。
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