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公开(公告)号：CN117965585B
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202410370650.9
申请日：2024-03-29
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12N15/62 , C07K19/00 , C12N15/70 , C07K1/36 , C07K1/30 , C07K1/34 , C07K1/18 , C07K1/16 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61P31/20 , C12R1/19
Abstract: 猪圆环病毒2d型佐剂嵌合病毒样颗粒疫苗及其制备方法，属于生物制药技术领域。解决了PCV2d型病毒样颗粒在大肠杆菌中难以高效和可溶性表达，抗体产生时间较长等问题。本发明通过在PCV2d的ORF2基因优化序列的N端添加C3d特异性表位基因序列来提高猪圆环病毒2d型佐剂嵌合病毒样颗粒疫苗的免疫效果，基于该方法获得了核苷酸序列SEQ2。进一步，通过将PCV2d的ORF2基因序列优化并在N端添加C3d特异性表位基因序列，插入pET28a载体，再转化到大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达蛋白rC3d‑Cap。最后，疫苗的制备方法是将所述蛋白rC3d‑Cap通过硫酸铵沉淀技术、AKTA蛋白纯化系统和分子筛进行纯化，在与水包油佐剂进行乳化，获得的一种猪圆环病毒PCV2d病毒样颗粒疫苗。本发明适用于疫苗生产加工技术领域。
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公开(公告)号：CN117965585A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410370650.9
申请日：2024-03-29
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12N15/62 , C07K19/00 , C12N15/70 , C07K1/36 , C07K1/30 , C07K1/34 , C07K1/18 , C07K1/16 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61P31/20 , C12R1/19
Abstract: 猪圆环病毒2d型佐剂嵌合病毒样颗粒疫苗及其制备方法，属于生物制药技术领域。解决了PCV2d型病毒样颗粒在大肠杆菌中难以高效和可溶性表达，抗体产生时间较长等问题。本发明通过在PCV2d的ORF2基因优化序列的N端添加C3d特异性表位基因序列来提高猪圆环病毒2d型佐剂嵌合病毒样颗粒疫苗的免疫效果，基于该方法获得了核苷酸序列SEQ2。进一步，通过将PCV2d的ORF2基因序列优化并在N端添加C3d特异性表位基因序列，插入pET28a载体，再转化到大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达蛋白rC3d‑Cap。最后，疫苗的制备方法是将所述蛋白rC3d‑Cap通过硫酸铵沉淀技术、AKTA蛋白纯化系统和分子筛进行纯化，在与水包油佐剂进行乳化，获得的一种猪圆环病毒PCV2d病毒样颗粒疫苗。本发明适用于疫苗生产加工技术领域。
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公开(公告)号：CN109293747B
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN201811126936.3
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3B抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系2H1，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强，并且与检测血清有强竞争性。本发明准确鉴定了单抗2H1所识别的抗原表位，其序列为SEQ ID No.2所示；本发明对该抗原表位肽突变得到系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体与口蹄疫感染猪、牛、羊的FMDV抗体阳性血清呈现良好反应能力，用其作为包被抗原建立的抗体ELISA试剂盒能准确区分FMDV感染血清与抗原免疫血清，并且用一种该检测试剂盒就能检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN109295006A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811126938.2
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体3A10的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号为CGMCC NO.16213的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强，与血清竞争性强，可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明还提供了采用该单抗为检测抗体建立的阻断ELISA检测试剂盒，采用该一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN109295005A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811126187.4
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体2H1的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号是CGMCC NO.16212的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强,与血清竞争性强，可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明进一步提供了采用该单抗为检测抗体所建立的阻断ELISA检测试剂盒，采用一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、竞争性强、检测更为快捷方便等优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113321712A
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN202110819705.6
申请日：2021-07-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/08 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 一组猪繁殖与呼吸综合征病毒的抗原多肽及其应用，它涉及生物检测技术领域，本发明要解决在血清学上无法有效区分疫苗免疫和野毒感染的PRRS基因工程标记弱毒疫苗的问题，本发明的抗原肽是由序列表中SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2中的一种或者两种所示的多肽组成的组合物。它用于制备ELISA诊断试剂盒。本发明筛选可用于鉴别诊断的蛋白多肽，并建立相应的间接ELISA检测方法。为今后PRRS基因工程标记弱毒疫苗株提供候选标签蛋白，为PRRS疫苗株和野毒株的鉴别诊断提供技术支持。本发明应用于猪用疫苗及诊断领域。
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公开(公告)号：CN109293748A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811126944.8
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3A抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系3A10，其分泌的单抗具有广谱性及高亲和力，并且与血清竞争性强。本发明进一步对单抗3A10所识别的抗原表位进行了精确鉴定，其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示，位于口蹄疫病毒非结构蛋白3A蛋白。本发明进一步对该抗原表位肽进行突变得到一系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体作为包被抗原建立的口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒能够特异性区分FMDV感染血清与抗原免疫血清，采用一种该检测试剂盒即能准确检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN117427154A
公开(公告)日：2024-01-23
申请号：CN202311763141.4
申请日：2023-12-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开一种用于制备猪繁殖与呼吸综合征mRNA疫苗的序列组合及其应用。属于疫苗技术领域。本发明的目的是为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗刺激机体产生更强的体液免疫应答。本发明提供一种猪繁殖与呼吸综合征病毒的重组蛋白，所述组合蛋白是将重组蛋白1和重组蛋白2按照质量比1:1混合获得组合蛋白；所述重组蛋白1是利用Linker将GP2蛋白和GP4蛋白融合获得的；所述重组蛋白2是利用GP3蛋白和Nsp9蛋白融合获得重组蛋白2。开发的PRRSV多抗原融合mRNA疫苗对PRRSV具有一定的保护效果，为开发PRRSV安全高效的理想疫苗奠定基础。
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公开(公告)号：CN109295006B
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN201811126938.2
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体3A10的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号为CGMCC NO.16213的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强，与血清竞争性强，可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明还提供了采用该单抗为检测抗体建立的阻断ELISA检测试剂盒，采用该一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN109293748B
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN201811126944.8
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3A抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系3A10，其分泌的单抗具有广谱性及高亲和力，并且与血清竞争性强。本发明进一步对单抗3A10所识别的抗原表位进行了精确鉴定，其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示，位于口蹄疫病毒非结构蛋白3A蛋白。本发明进一步对该抗原表位肽进行突变得到一系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体作为包被抗原建立的口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒能够特异性区分FMDV感染血清与抗原免疫血清，采用一种该检测试剂盒即能准确检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测快捷方便等优点。
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