公开(公告)号：CN117646032B

公开(公告)日：2024-05-17

申请号：CN202410114328.X

申请日：2024-01-29

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 尹鑫 ,  汪孟航 ,  郭永琪

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  C12N7/00 ,  A61K39/265 ,  A61P31/22 ,  C12R1/93

Abstract: BHV‑1的反向遗传操作系统及其在病毒拯救中的应用，属于病毒遗传操作技术领域。为解决现有BHV‑1的基因编辑方法存在效率低、耗时长、重组病毒纯化困难等问题，本发明通过将BHV‑1基因组剪切后分段克隆入Fosmid粘粒载体pCC1Fos，构建了BHV‑1基因组Fosmid文库；在对该文库进行基因组测序的基础上，从中挑选出5个克隆有BHV‑1基因组片段，且相互含有重叠区域，并可以拼接覆盖BHV‑1全基因组的重组粘粒；用这5个粘粒共转染人胚胎肾细胞，成功拯救BHV‑1，获得了BHV‑1的反向遗传操作系统。

公开(公告)号：CN117646032A

公开(公告)日：2024-03-05

申请号：CN202410114328.X

申请日：2024-01-29

Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)

Inventor： 尹鑫 ,  汪孟航 ,  郭永琪

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  C12N7/00 ,  A61K39/265 ,  A61P31/22 ,  C12R1/93

Abstract: BHV‑1的反向遗传操作系统及其在病毒拯救中的应用，属于病毒遗传操作技术领域。为解决现有BHV‑1的基因编辑方法存在效率低、耗时长、重组病毒纯化困难等问题，本发明通过将BHV‑1基因组剪切后分段克隆入Fosmid粘粒载体pCC1Fos，构建了BHV‑1基因组Fosmid文库；在对该文库进行基因组测序的基础上，从中挑选出5个克隆有BHV‑1基因组片段，且相互含有重叠区域，并可以拼接覆盖BHV‑1全基因组的重组粘粒；用这5个粘粒共转染人胚胎肾细胞，成功拯救BHV‑1，获得了BHV‑1的反向遗传操作系统。