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公开(公告)号:CN109321598A
公开(公告)日:2019-02-12
申请号:CN201811128501.2
申请日:2018-09-27
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术开发公司
Abstract: 本发明公开了一种蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)的反向遗传方法和应用。本发明将辅助质粒和蓝舌病病毒PCR产物分两次转染BHK-21细胞从而拯救病毒。本发明的蓝舌病病毒反向遗传拯救方法可用于BTV的致病机制研究、免疫机制研究以及重组疫苗的制备。
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公开(公告)号:CN102776152B
公开(公告)日:2014-07-09
申请号:CN201210213073.X
申请日:2012-06-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 哈尔滨维科生物技术开发公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒VP7蛋白的单克隆抗体,分泌该抗体的杂交瘤细胞株及应用。本发明以原核表达的BTV-VP7蛋白免疫BALB/c小鼠,分离免疫后小鼠的脾细胞,使其与SP2/0细胞进行融合,用原核表达的BTV-VP7蛋白检测分泌相应单克隆抗体的杂交瘤细胞,并采用有限稀释法对筛选到的杂交瘤细胞进行分离纯化,最终得到一株可以稳定分泌抗BTV-VP7蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并将其所分泌的单克隆抗体命名为BTV-4H7。IFA实验结果显示BTV-4H7可以与1~24型BTV发生特异性反应。利用该单克隆抗体建立的C-ELISA可以快速、准确的检出1~24型BTV感染动物阳性血清。
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公开(公告)号:CN102776152A
公开(公告)日:2012-11-14
申请号:CN201210213073.X
申请日:2012-06-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 哈尔滨维科生物技术开发公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒VP7蛋白的单克隆抗体,分泌该抗体的杂交瘤细胞株及应用。本发明以原核表达的BTV-VP7蛋白免疫BALB/c小鼠,分离免疫后小鼠的脾细胞,使其与SP2/0细胞进行融合,用原核表达的BTV-VP7蛋白检测分泌相应单克隆抗体的杂交瘤细胞,并采用有限稀释法对筛选到的杂交瘤细胞进行分离纯化,最终得到一株可以稳定分泌抗BTV-VP7蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并将其所分泌的单克隆抗体命名为BTV-4H7。IFA实验结果显示BTV-4H7可以与1~24型BTV发生特异性反应。利用该单克隆抗体建立的C-ELISA可以快速、准确的检出1~24型BTV感染动物阳性血清。
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公开(公告)号:CN116773806A
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202310403801.1
申请日:2023-04-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/68 , G01N33/531
Abstract: 本发明公开了一种牛传染性胸膜肺炎竞争ELISA检测试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有微生物保藏号是CGMCCNO.45502的杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体以及丝状支原体丝状亚种小菌落假蛋白的胞外区29至166位氨基酸组成的抗原包被的ELISA板。本发明通过对丝状支原体丝状亚种小菌落(Mycoplasma mycoidessubsp.mycoides,Mmm)全蛋白分析方法成功筛选到了候选诊断标识蛋白。以此蛋白筛选单克隆抗体建立的检测方法可以特异性检测出CBPP阳性血清而与其他相关疫病阳性血清无交叉反应。本发明建立的竞争ELISA检测方法特异性与WOAH推荐方法相当,而敏感性比WOAH推荐方法约高25%。本发明的提出为牛传染性胸膜肺炎的检测提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN105238761A
公开(公告)日:2016-01-13
申请号:CN201510677458.5
申请日:2015-10-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K7/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了抗蓝舌病病毒(Bluetongue Virus,BTV)NS1蛋白的群特异性单克隆抗体BTV-NS1-1F11及其识别的B细胞表位和应用。本发明还公开了一株经筛选得到的,能够稳定分泌抗BTV1-24型NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为BTV-NS1-1F11,其微生物保藏号为:CGMCC NO.10208,该杂交瘤细胞株分泌的抗BTV1-24NS1蛋白单克隆抗体与BTV1-24型的NS1蛋白均发生特异性反应。此外,本发明还公开了该单克隆抗体所识别的BTV NS1蛋白特异性B细胞表位。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的BTV NS1蛋白特异性B细胞表位可用于制备鉴别、诊断、预防或治疗BTV感染的试剂,同时为以表位为基础的诊断方法建立和表位标记疫苗的设计奠定基础,并为进一步研究和治疗BTV提供物质储备。
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公开(公告)号:CN118903475B
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202411400858.7
申请日:2024-10-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了重组蛋白rMmm604在抗丝状支原体丝状亚种感染中的应用,本发明属于医药技术领域。本发明提出了一种新的抗丝状支原体丝状亚种感染的药物,该药物为重组蛋白rMmm604,研究显示,该重组蛋白rMmm604不会对EBL细胞产生细胞毒性,并且重组蛋白rMmm604孵育EBL细胞后,感染EBL的两种Mmm菌株(Ben1和Mu1)数量与对照组(标签蛋白rMBP孵育组)相比均明显减少。因此,本发明为牛传染性胸膜肺炎的治疗提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN117187423A
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202311250345.8
申请日:2023-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明属于微生物检测技术领域,具体的涉及一种牛支原体与丝状支原体丝状亚种双重荧光定量PCR检测方法的构建以及应用。本发明根据丝状支原体丝状亚种和牛支原体两种病原的基因组保守特异性区域分别设计引物与探针,建立了一种可以同时检测这两种病原的荧光定量PCR检测方法,在对检测方法的特异性和敏感性进行了评估的基础上,对少量临床样品进行了检测,结果显示,该方法具有良好的特异性和敏感性,可用于牛肺疫和牛支原体病的病原学检测。
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公开(公告)号:CN103740649B
公开(公告)日:2016-07-06
申请号:CN201310652907.1
申请日:2013-12-06
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K14/14 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒血清16型VP2蛋白单克隆抗体BTV16-2B4及其识别的B细胞表位多肽和应用,属于蓝舌病防治领域。本发明还涉及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株以及由该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体,间接免疫荧光试验显示该单克隆抗体只与BTV16呈现特异性反应,而不与蓝舌病病毒其他血清型,茨城病病毒,中山病病毒产生交叉反应。进一步的,本发明利用截短表达抗原短肽和肽扫描技术鉴定出该抗体所识别的BTV16-VP2蛋白B细胞表位多肽。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的BTV16-VP2蛋白B细胞表位可用于制备成BTV16型特异性鉴别诊断试剂,并为BTV表位标记疫苗的研制奠定了基础。
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公开(公告)号:CN105255837A
公开(公告)日:2016-01-20
申请号:CN201510677372.2
申请日:2015-10-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K7/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)NS3蛋白的单克隆抗体及其识别的B细胞表位和应用。本发明还公开了一株通过筛选得到的,能够稳定分泌所述单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为BTV-NS3-3D8,其微生物保藏号是:CGMCC No.10209,实验证明由该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体能够与BTV1~24型的NS3蛋白发生群特异性反应。此外,本发明还公开了该单克隆抗体所识别的BTV NS3蛋白的特异性B细胞表位。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的BTV NS3蛋白的特异性B细胞表位可用于建立BTV抗原群鉴别诊断方法以及为NS3蛋白结构和功能的基础研究奠定一定的基础。
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公开(公告)号:CN105219733A
公开(公告)日:2016-01-06
申请号:CN201510662588.1
申请日:2015-10-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C07K7/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了抗蓝舌病病毒(Bluetongue Virus,BTV)12型NS1蛋白的单克隆抗体BTV12-NS1-IF8及其识别的B细胞表位和应用。所述的单克隆抗体是由本发明筛选得到的微生物保藏号为CGMCC No.10207的杂交瘤细胞株分泌产生,实验证明该杂交瘤细胞株分泌的抗BTV12 NS1蛋白单克隆抗体能够与BTV12型NS1蛋白发生特异性反应。此外,本发明还公开了该单克隆抗体所识别的BTV12 NS1蛋白特异性B细胞表位。本发明的单克隆抗体以及该单克隆抗体所识别的BTV12 NS1蛋白特异性B细胞表位可用于制备鉴别、诊断、预防或治疗BTV12型感染的试剂,同时为以表位为基础的诊断方法建立和表位标记疫苗的设计奠定基础,为进一步研究和治疗BTV12型提供物质储备。
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