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公开(公告)号:CN113215084A
公开(公告)日:2021-08-06
申请号:CN202110656119.4
申请日:2021-06-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种羊胎儿皮肤成纤维细胞、其分离方法与应用,其中,所述成纤维细胞的保藏号为CCTCC No:C2019202。本发明在羊胎儿皮肤成纤维细胞SFSFS的分离过程中分别采用含0.05%胰蛋白酶和0.02%EDTA的消化液以及Ⅳ型胶原酶处理羊胎儿皮肤组织,然后用含0.01‑0.05%胰蛋白酶‑EDTA消化液处理细胞;并采用3%胎牛血清+10‑40ng/ml的h‑EGF替代10%的胎牛血清培养羊胎儿皮肤成纤维细胞,使胎牛血清使用量大大减少,降低了SFSFS培养成本和羊口疮病毒生产成本,节约了资源。本发明的细胞株能够明显提高羊口疮病毒的分离率、缩短分离时间,且分离的羊口疮病毒毒价和病毒拷贝数也更高,可以为羊口疮病毒的规模化繁殖及病毒感染致病机制研究提供工具。
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公开(公告)号:CN113215084B
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202110656119.4
申请日:2021-06-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种羊胎儿皮肤成纤维细胞、其分离方法与应用,其中,所述成纤维细胞的保藏号为CCTCC No:C2019202。本发明在羊胎儿皮肤成纤维细胞SFSFS的分离过程中分别采用含0.05%胰蛋白酶和0.02%EDTA的消化液以及Ⅳ型胶原酶处理羊胎儿皮肤组织,然后用含0.01‑0.05%胰蛋白酶‑EDTA消化液处理细胞;并采用3%胎牛血清+10‑40ng/ml的h‑EGF替代10%的胎牛血清培养羊胎儿皮肤成纤维细胞,使胎牛血清使用量大大减少,降低了SFSFS培养成本和羊口疮病毒生产成本,节约了资源。本发明的细胞株能够明显提高羊口疮病毒的分离率、缩短分离时间,且分离的羊口疮病毒毒价和病毒拷贝数也更高,可以为羊口疮病毒的规模化繁殖及病毒感染致病机制研究提供工具。
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