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公开(公告)号：CN118127078A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202410123235.3
申请日：2024-01-29
摘要： 本发明提供了pJEV‑CMV‑p54复制子质粒及制备方法和应用，属于分子生物学技术领域。本发明以缺失了C、prM和E结构蛋白基因的基因I型日本脑炎病毒基因组为骨架，在缺失结构蛋白的部位插入非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白基因，成功构建了能够高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白的pJEV‑CMV‑p54复制子质粒，pJEV‑CMV‑p54具有自我复制能力，并能高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白，为ASFV疫苗的研发进一步提供思路。
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公开(公告)号：CN116179572A
公开(公告)日：2023-05-30
申请号：CN202310208576.6
申请日：2023-03-04
IPC分类号： C12N15/31 , C12N15/70 , C12N15/66 , C07K14/315
摘要： 本发明涉及猪链球菌保护性抗原ESPss的基因序列、表达方法及其应用，属于动物免疫技术领域。本发明通过人工合成的ESPss蛋白的核苷酸序列；使用带有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物对对核苷酸序列进行扩增，得到目的基因PCR产物和pET‑28a阳性质粒使用EcoRⅠ和XhoⅠ酶进行双酶切处理后连接后，诱导重组ESPss蛋白的表达，得到保护性抗原ESPss，其可以显著提高小鼠的抗体水平，可以显著提升宿主动物血清及脏器细胞因子IL‑4和IFN‑γ的表达水平，并为2型、7型和9型猪链球菌感染提供较好的免疫保护作用。
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公开(公告)号：CN113981151B
公开(公告)日：2023-01-24
申请号：CN202111478453.1
申请日：2021-12-06
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种鉴别基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒的方法及其试剂盒，属于病毒分子检测领域。为克服临床上缺少对基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒鉴别的方法，本发明提供一种基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒的鉴别方法以及引物和探针，所涉及引物和TaqMan探针是依据乙脑病毒的prM/M基因保守区和盖他病毒的E2基因保守区进行设计，其可以有效鉴别乙脑病毒和盖他病毒，具有较高特异性和灵敏度的优点，可以为乙脑病毒和盖他病毒基因型的快速检测、临床诊断以及流行病学调查提供更好的方法支持。
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公开(公告)号：CN117778629A
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202410052803.5
申请日：2024-01-12
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明提供一种利用三重RT‑qPCR检测蜱传脑炎、乙型脑炎和山羊关节炎脑炎的方法及试剂盒，属于分子生物学和核酸检测领域。该方法通过设置针对蜱传脑炎的C基因、乙型脑炎病毒的NS2A基因和山羊关节炎脑炎病毒基因组的gag基因的三组引物对和探针，通过RT‑qPCR方式测定达到荧光值的Ct值，依据判定规则确定是否感染病毒以及种类，该检测方法具有检测灵敏度高，特异性好、操作简便、快速的特点，适合在实际检测中推广应用。
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公开(公告)号：CN113135997B
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202110336260.6
申请日：2021-03-29
IPC分类号： C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/81 , C12N15/66 , C12N15/64 , C12P21/02 , A23B4/20 , A23C3/08 , C12R1/865
摘要： 本发明提供了一种用于食品保鲜的杂合肽及其在酿酒酵母表达系统的基因表达方法，属于功能多肽筛选技术领域。为了克服现有技术的不足，本发明提供一种用于食品保鲜的杂合肽及其在酿酒酵母表达系统的基因表达方法，该杂合肽融合了猪源抗菌肽cecropin P1的活性区域和牛源抗菌肽的活性区域的优势获得新型的杂合肽，通过人工合成杂合肽基因并将目的基因连接在质粒pYES2‑ɑ上获得新型杂合肽重组酵母菌株，使用半乳糖诱导其表达，上清液进一步纯化后即可用于食品保鲜，尤其对于新鲜猪肉保鲜和牛奶保鲜具有很好的效果。
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公开(公告)号：CN114181953A
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202111572371.3
申请日：2021-12-21
摘要： 本发明涉及一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法及其应用，属于分子生物学领域。为了克服黄病毒NS2A研究过程中缺乏针对NS2A的特异性抗体的技术不足，本发明提供一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法，并公开了其应用。本发明通过在NS1与NS2A之间插入HA标签，通过HA标签来指示NS2A，同时为避免影响NS2A荧光信号的观察，对NS2A第30个氨基酸进行点突变，以干扰NS2A的茎环结构，消除病毒复制过程的‑1核糖体移码。本发明所述的携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆对于黄病毒的研究具有重要的价值。
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公开(公告)号：CN110396502A
公开(公告)日：2019-11-01
申请号：CN201910736306.6
申请日：2019-08-09
IPC分类号： C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/65
摘要： 本发明公开了一种对JEV易感的猪扁桃体细胞系的构建方法，该方法包含：获得原代猪扁桃体细胞，并进行培养；以pHY-sv40-Puro作为慢病毒载体，以psPAX2和pCMV-VSV-G作为辅助包装载体，共同转染进入293T细胞中，获得慢病毒颗粒；将慢病毒颗粒感染经培养后的原代猪扁桃体细胞系；经过感染后，将猪扁桃体细胞在含血清的DMEM/F12培养液中添加嘌呤霉素进行细胞筛选，获得阳性细胞；将阳性细胞用不含嘌呤霉素的培养液扩大培养，得到扁桃体上皮细胞传代细胞系。本发明的方法以猪扁桃体细胞作为宿主细胞，通过感染的方法得到JEV易感的猪扁桃体细胞系，该细胞系对JEV敏感，可以用于相关研究。
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公开(公告)号：CN118460486A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410670240.6
申请日：2024-05-27
IPC分类号： C12N9/00 , C07K16/40 , C07K16/06 , G01N33/573
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体公开了一种猪源TRIM32蛋白的抗原肽、多克隆抗体及其应用。为了克服现有技术缺少快速检测TRIM32的特异性抗体的方法或工具的技术不足，本发明的目的在于提供一种猪源TRIM32蛋白的抗原肽及其多克隆抗体及应用。本发明通过提供一种猪源TRIM32蛋白的抗原肽的氨基酸序列，利用Fmoc固相法合成所述抗原肽，将获得的抗原肽免疫新西兰大白兔，制备抗TRIM32蛋白的多克隆抗体，该抗体能有效地与不同猪组织及人源、猪源、猴源和鼠源细胞中的TRIM32蛋白反应从而确定其表达量，为进行TRIM32蛋白的检测和生物学功能研究提供了有力的工具。
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公开(公告)号：CN118006568A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202410211443.9
申请日：2024-02-26
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域。本发明提供了一种GV型乙型脑炎病毒感染性克隆弱毒疫苗株JEV‑XZ‑E5及其制备方法，利用GV型乙型脑炎病毒XZ2012株进行反向遗传操作获得，所述弱毒疫苗株JEV‑XZ‑E5的cDNA序列如SEQ ID NO.24所示。本发明还提供了一种包含所述弱毒疫苗株JEV‑XZ‑E5的cDNA序列的核酸分子，该核酸分子在所述cDNA序列的5’端设有转录启动子。本发明所述弱毒疫苗株JEV‑XZ‑E5对GV型乙型脑炎病毒具有免疫原性和保护效果，为预防GV型乙型脑炎病毒病疫苗的研发进一步提供思路。
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公开(公告)号：CN117925545A
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202310553757.2
申请日：2023-05-17
摘要： 本发明提供一种PRRSV弱毒株及其制备方法和应用。所述PRRSV弱毒株是将猪繁殖与呼吸综合征病毒PRRSV的非结构蛋白NSP4进行突变获得的，所述NSP4蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO:1具有至少95％、或至少98％、或至少99％的序列一致性，所述突变是在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的第76位、第111位、第115位、第155位、第173位、第183位进行单位点突变或多位点突变。本发明提供的PRRSV弱毒株能够促进β2M分子以及SLA‑1分子的表达,不仅能够诱导更好的细胞免疫，而且能够使其毒力进一步降至到更低的水平。
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