公开(公告)号：CN101949921B

公开(公告)日：2014-03-12

申请号：CN201010253930.X

申请日：2010-08-13

申请人： 中国农业大学

发明人： 王保民 ,  赵洪伟 ,  南铁贵 ,  谭桂玉 ,  曹振 ,  高巍 ,  王敏 ,  孙硕 ,  李召虎

IPC分类号： G01N33/535 ,  G01N33/577 ,  C07K16/44 ,  C12N5/20 ,  C12R1/91

摘要： 本发明公开了一种酶标物及其应用。该重金属酶标物，是络合物与酶形成的交联物；所述络合物为螯合剂与载体蛋白的偶联物与重金属形成的络合物。本发明所提供的制备铜离子酶标物的制备方法简单，合成成本低，HRP活性损失小。用本发明方法制备的酶标物所建立的ELISA检测方法具有很高的灵敏度。本发明的制备铜离子ELISA检测用酶标物的方法对其他重金属ELISA检测用酶标物的成功制备具有重要的参考价值，由该方法建立的铜离子快速免疫检测方法将有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN102199211B

公开(公告)日：2013-08-28

申请号：CN201110090869.6

申请日：2011-04-12

申请人： 中国农业大学

发明人： 王保民 ,  谭桂玉 ,  南铁贵 ,  赵洪伟 ,  高巍 ,  王敏 ,  孙硕 ,  曹振 ,  李召虎

IPC分类号： C07K16/38 ,  C12N5/20 ,  G01N33/577 ,  G01N33/543 ,  G01N21/31 ,  C12R1/91

摘要： 本发明公开了检测豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法及其专用酶联免疫试剂盒。本发明所提供的酶联免疫试剂盒含有豇豆胰蛋白酶抑制剂单克隆抗体；所述豇豆胰蛋白酶抑制剂单克隆抗体，是由保藏编号为CGMCC No.4617的豇豆胰蛋白酶抑制剂单克隆抗体杂交瘤细胞株CpTI 3D6分泌产生的。本发明应用抗CpTI多克隆抗体及酶标记抗CpTI单克隆抗体，采用双抗夹心ELISA方法进行试剂盒制备，并应用制备的试剂盒鉴定转基因作物真伪，具有快速、灵敏的优点。

公开(公告)号：CN101694494B

公开(公告)日：2012-10-10

申请号：CN200910236140.8

申请日：2009-10-20

申请人： 中国农业大学

发明人： 王保民 ,  南铁贵 ,  赵洪伟 ,  谭桂玉 ,  刘威 ,  高巍 ,  谭伟明 ,  李召虎

IPC分类号： C07K17/14 ,  G01N33/543 ,  G01N33/577 ,  G01N21/31 ,  B81C99/00 ,  B81B7/02

摘要： 本发明公开了一种制备修饰有抗体的微悬臂梁的方法。该方法，由如下步骤组成：1)通过巯基化将抗抗体连接到带有金膜的微悬臂梁上，得到修饰有抗抗体的微悬臂梁；2)通过抗体与抗抗体的相互结合作用，将抗体连接到所述修饰有抗抗体的微悬臂梁上，得到修饰有抗体的微悬臂梁。结果表明，本发明所制备的修饰有抗体的微悬臂梁的方法与现有的方法相比具有反应步骤少、操作时间短、避免因巯基化反应对抗体活性的损失、使抗体定向结合从而暴露更多的抗原作用位点的优点。因此，本发明的方法及产品在微悬臂梁免疫传感技术领域具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN101407549A

公开(公告)日：2009-04-15

申请号：CN200810227450.9

申请日：2008-11-25

申请人： 中国农业大学

发明人： 王保民 ,  谭伟明 ,  南铁贵 ,  何素平 ,  刘威 ,  赵洪伟 ,  高巍 ,  李召虎

IPC分类号： C07K17/14

摘要： 本发明公开了一种在微悬臂梁的金膜上修饰抗体的方法。本发明所公开的在微悬臂梁的金膜上修饰抗体的方法，是将带有金膜的微悬臂梁投入到金黄色葡萄球菌A蛋白溶液中，得到结合有金黄色葡萄球菌A蛋白的微悬臂梁；再将所述结合有金黄色葡萄球菌A蛋白的微悬臂梁投入到抗体溶液中，将抗体修饰到微悬臂梁的金膜上。本发明的在微悬臂梁的金膜上修饰抗体的方法与现有的方法相比具有反应步骤少、操作时间短、避免因巯基化反应对抗体活性的损失等优点，并且为所有鼠源或兔源抗体在悬臂梁上的固定提供了一种通用的方法。

公开(公告)号：CN101914152B

公开(公告)日：2012-11-14

申请号：CN201010259922.6

申请日：2010-08-20

申请人： 中国农业大学

发明人： 王保民 ,  南铁贵 ,  赵洪伟 ,  谭桂玉 ,  高巍 ,  谭伟明 ,  李召虎

IPC分类号： C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53

摘要： 本发明公开了一种汞离子抗原及其制备方法与应用。本发明提供的方法包括如下步骤：1)活化4-巯基苯基乙酸，得到活化的4-巯基苯基乙酸；2)将步骤1)得到的活化的4-巯基苯基乙酸与载体蛋白偶联，得到活化的4-巯基苯基乙酸与载体蛋白的偶联物；3)将步骤2)得到的所述活化的4-巯基苯基乙酸与载体蛋白的偶联物与汞离子螯合，得到所述偶联物和汞离子的螯合物，即得到汞离子抗原。本发明的制备汞离子抗原的方法能够方便、快捷地获得汞离子抗原，且合成步骤简洁明了、合成成本低，效果好。

公开(公告)号：CN102492671A

公开(公告)日：2012-06-13

申请号：CN201110378381.3

申请日：2011-11-24

申请人： 中国农业大学

发明人： 王保民 ,  谭桂玉 ,  南铁贵 ,  赵洪伟 ,  高巍 ,  王敏 ,  孙硕 ,  曹振

IPC分类号： C12N9/10 ,  C07K16/40 ,  G01N33/573

摘要： 本发明公开了5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶的多肽抗原及其制备方法与应用。本发明所提供的制备5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶的多肽抗原的方法，包括如下步骤：(1)将载体蛋白与双功能试剂进行反应，得到反应产物I；所述双功能试剂选自4-马来酰亚胺基丁酸-N-琥珀酰亚胺酯、琥珀酰亚胺基4-[p-马来酰亚胺苯基]丁酸盐或N-[ε-马来酰亚胺乙酰基氧]硫代琥珀酰亚胺酯；(2)将所述步骤(1)得到的反应产物I与序列表中序列1所示的多肽进行反应，得到反应产物II，即得到5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶抗体的免疫原。本发明所提供的制备EPSPS多肽抗原的方法以及由该方法获得的EPSPS多肽抗原，将在EPSPS蛋白的酶联免疫检测中有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN101968481B

公开(公告)日：2013-12-11

申请号：CN201010253926.3

申请日：2010-08-13

申请人： 中国农业大学

发明人： 王保民 ,  赵洪伟 ,  南铁贵 ,  谭桂玉 ,  曹振 ,  高巍 ,  王敏 ,  孙硕 ,  李召虎

IPC分类号： G01N33/53 ,  G01N33/566 ,  C07K16/44 ,  C12N5/20 ,  C12R1/91

摘要： 本发明公开了一种检测样品中是否含有重金属的方法及其专用试剂盒。该试剂盒，包括包被原、抗待检重金属的抗体；所述包被原与抗待检重金属的抗体相互作用，且所述包被原与所述抗待检重金属的抗体的亲和力小于所述待检重金属与所述抗待检重金属的抗体的亲和力。实验证明，本发明所提供的制备铜离子非均等竞争ELISA检测法中，包被抗原的制备方法简单，且合成步骤简洁明了、合成成本低，效果好。用本发明方法制备的包被抗原对ELISA检测灵敏度有明显提高。本发明的制备包被抗原的方法及由该方法建立的铜离子快速免疫检测方法将有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN102492671B

公开(公告)日：2013-02-27

申请号：CN201110378381.3

申请日：2011-11-24

申请人： 中国农业大学

发明人： 王保民 ,  谭桂玉 ,  南铁贵 ,  赵洪伟 ,  高巍 ,  王敏 ,  孙硕 ,  曹振

IPC分类号： C12N9/10 ,  C07K16/40 ,  G01N33/573

摘要： 本发明公开了5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶的多肽抗原及其制备方法与应用。本发明所提供的制备5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶的多肽抗原的方法，包括如下步骤：(1)将载体蛋白与双功能试剂进行反应，得到反应产物I；所述双功能试剂选自4-马来酰亚胺基丁酸-N-琥珀酰亚胺酯、琥珀酰亚胺基4-[p-马来酰亚胺苯基]丁酸盐或N-[ε-马来酰亚胺乙酰基氧]硫代琥珀酰亚胺酯；(2)将所述步骤(1)得到的反应产物I与序列表中序列1所示的多肽进行反应，得到反应产物II，即得到5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶抗体的免疫原。本发明所提供的制备EPSPS多肽抗原的方法以及由该方法获得的EPSPS多肽抗原，将在EPSPS蛋白的酶联免疫检测中有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN102190723A

公开(公告)日：2011-09-21

申请号：CN201110090978.8

申请日：2011-04-12

申请人： 中国农业大学

发明人： 王保民 ,  孙硕 ,  赵洪伟 ,  南铁贵 ,  高巍 ,  谭桂玉 ,  王敏 ,  曹振 ,  何丽珊 ,  张炜 ,  李召虎

IPC分类号： C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53

摘要： 本发明公开了铬离子抗原及其制备方法与应用。本发明所提供的制备铬离子抗原的方法，包括如下步骤：(1)将螯合剂进行重氮化反应，得到重氮化螯合剂；(2)将所述步骤(1)得到的重氮化的螯合剂与载体蛋白进行偶联反应，得到偶联产物；(3)将所述步骤(2)得到的偶联产物与铬离子进行络合反应，得到络合物，即得到铬离子抗原。本发明所提供的制备铬离子抗原的方法能够方便、快捷地获得铬离子抗原，且合成步骤简洁明了、合成成本低，效果好。用本发明方法制备的铬离子抗原进行免疫得到的抗体特异性好、最低检测限值低。因此，本发明所提供的制备铬离子抗原的方法以及由该方法获得的铬离子抗原，将在铬离子的酶联免疫检测中有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN101949921A

公开(公告)日：2011-01-19

申请号：CN201010253930.X

申请日：2010-08-13

申请人： 中国农业大学

发明人： 王保民 ,  赵洪伟 ,  南铁贵 ,  谭桂玉 ,  曹振 ,  高巍 ,  王敏 ,  孙硕 ,  李召虎

IPC分类号： G01N33/535 ,  G01N33/577 ,  C07K16/44 ,  C12N5/20 ,  C12R1/91

摘要： 本发明公开了一种酶标物及其应用。该重金属酶标物，是络合物与酶形成的交联物；所述络合物为螯合剂与载体蛋白的偶联物与重金属形成的络合物。本发明所提供的制备铜离子酶标物的制备方法简单，合成成本低，HRP活性损失小。用本发明方法制备的酶标物所建立的ELISA检测方法具有很高的灵敏度。本发明的制备铜离子ELISA检测用酶标物的方法对其他重金属ELISA检测用酶标物的成功制备具有重要的参考价值，由该方法建立的铜离子快速免疫检测方法将有广阔的应用前景。