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公开(公告)号：CN103923940B
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201410152886.1
申请日：2014-04-16
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了一种定点整合外源基因的方法。本发明公开了一种定点整合外源基因到牛β?酪蛋白基因的第二外显子的方法，包括如下步骤：使TALE蛋白?Ⅰ和TALE蛋白?Ⅱ在离体的牛细胞中表达，得到第二外显子靶序列发生突变的细胞；同时将外源基因同源重组到靶序列位置，实现外源基因在牛β?酪蛋白基因的第二外显子上的定点整合。本发明的人溶菌酶基因或其它目的基因在乳腺中转录非常活跃的β?酪蛋白基因座定点整合，克服位置效应，避免目的基因表达沉默，可以实现人溶菌酶或其它重组蛋白在乳腺中较高水平表达，提高了转基因育种的成功率，同时可以节约后期生产纯化重组蛋白的成本。
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公开(公告)号：CN104450673A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410646037.1
申请日：2014-11-14
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N15/09 , C12N15/11 , C12N15/877 , A01K67/027
CPC分类号： A01K67/027 , C12N15/09 , C12N15/11 , C12N15/877
摘要： 本发明公开了一种Y染色体修饰方法及其应用。本发明公开一种动物Y染色体修饰方法，是利用TALEN方法对离体的动物体细胞的Y染色体进行特异性的自杀元件修饰。本发明为选择性培育特定性别的动物、提高育种效率奠定基础。
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公开(公告)号：CN103923940A
公开(公告)日：2014-07-16
申请号：CN201410152886.1
申请日：2014-04-16
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了一种定点整合外源基因的方法。本发明公开了一种定点整合外源基因到牛β-酪蛋白基因的第二外显子的方法，包括如下步骤：使TALE蛋白-Ⅰ和TALE蛋白-Ⅱ在离体的牛细胞中表达，得到第二外显子靶序列发生突变的细胞；同时将外源基因同源重组到靶序列位置，实现外源基因在牛β-酪蛋白基因的第二外显子上的定点整合。本发明的人溶菌酶基因或其它目的基因在乳腺中转录非常活跃的β-酪蛋白基因座定点整合，克服位置效应，避免目的基因表达沉默，可以实现人溶菌酶或其它重组蛋白在乳腺中较高水平表达，提高了转基因育种的成功率，同时可以节约后期生产纯化重组蛋白的成本。
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公开(公告)号：CN103923215A
公开(公告)日：2014-07-16
申请号：CN201410149606.1
申请日：2014-04-15
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了使ACC-α基因启动子PⅢ失活的物质在生产产低脂奶的奶牛中的应用。本发明首先保护一种蛋白组，由TALE蛋白甲-Ⅰ和TALE蛋白甲-Ⅱ组成；所述TALE蛋白甲-Ⅰ包括序列表的序列14自N末端第180-791位氨基酸残基组成的结合域和序列表的序列14第867-1062位氨基酸残基组成的功能域；所述TALE蛋白甲-Ⅱ包括序列表的序列15自N末端第190-733位氨基酸残基组成的结合域和序列表的序列15自N末端第809-1004位氨基酸残基组成的功能域。本发明发现了可以高效沉默ACC-α基因启动子的靶点，并基于该靶点设计了蛋白组、基因组、质粒组和RNA组，可以成功沉默了ACC-α基因启动子，且敲除效率非常高。
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公开(公告)号：CN104450673B
公开(公告)日：2017-07-21
申请号：CN201410646037.1
申请日：2014-11-14
申请人： 中国农业大学
IPC分类号： C12N15/09 , C12N15/11 , C12N15/877 , A01K67/027
CPC分类号： A01K67/027 , C12N15/09 , C12N15/11 , C12N15/877
摘要： 本发明公开了一种Y染色体修饰方法及其应用。本发明公开一种动物Y染色体修饰方法，是利用TALEN方法对离体的动物体细胞的Y染色体进行特异性的自杀元件修饰。本发明为选择性培育特定性别的动物、提高育种效率奠定基础。
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公开(公告)号：CN103923215B
公开(公告)日：2016-02-10
申请号：CN201410149606.1
申请日：2014-04-15
申请人： 中国农业大学
摘要： 本发明公开了使ACC-α基因启动子PⅢ失活的物质在生产产低脂奶的奶牛中的应用。本发明首先保护一种蛋白组，由TALE蛋白甲-Ⅰ和TALE蛋白甲-Ⅱ组成；所述TALE蛋白甲-Ⅰ包括序列表的序列14自N末端第180-791位氨基酸残基组成的结合域和序列表的序列14第867-1062位氨基酸残基组成的功能域；所述TALE蛋白甲-Ⅱ包括序列表的序列15自N末端第190-733位氨基酸残基组成的结合域和序列表的序列15自N末端第809-1004位氨基酸残基组成的功能域。本发明发现了可以高效沉默ACC-α基因启动子的靶点，并基于该靶点设计了蛋白组、基因组、质粒组和RNA组，可以成功沉默了ACC-α基因启动子，且敲除效率非常高。
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