本发明公开了一种定点整合外源基因的方法。本发明公开了一种定点整合外源基因到牛β?酪蛋白基因的第二外显子的方法，包括如下步骤：使TALE蛋白?Ⅰ和TALE蛋白?Ⅱ在离体的牛细胞中表达，得到第二外显子靶序列发生突变的细胞；同时将外源基因同源重组到靶序列位置，实现外源基因在牛β?酪蛋白基因的第二外显子上的定点整合。本发明的人溶菌酶基因或其它目的基因在乳腺中转录非常活跃的β?酪蛋白基因座定点整合，克服位置效应，避免目的基因表达沉默，可以实现人溶菌酶或其它重组蛋白在乳腺中较高水平表达，提高了转基因育种的成功率，同时可以节约后期生产纯化重组蛋白的成本。