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公开(公告)号：CN113577261B
公开(公告)日：2023-10-31
申请号：CN202110882135.5
申请日：2021-08-02
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了副结核分枝杆菌抗原蛋白Bfra原核表达方法，重组蛋白Bfra‑PLGA纳米颗粒的制备方法及其在预防副结核病中的应用。通过扩增副结核分枝杆菌MAP1595基因,将其连接至pET‑30a(+)，通过大肠杆菌原核表达重组蛋白Bfra。将获得的重组蛋白Bfra通过改良复乳挥发法包载到高分子材料PLGA中制备纳米颗粒Bfra‑PLGA。用制备的Bfra‑PLGA纳米颗粒免疫小鼠，在副结核分枝杆菌感染后8周及12周均有良好的保护效果。
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公开(公告)号：CN103869080B
公开(公告)日：2016-01-27
申请号：CN201410081695.0
申请日：2014-03-06
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N27/447 , G01N27/64
Abstract: 本发明提供一种慢性神经退行性疾病早期诊断标志物，其为β型可溶性NSF附着蛋白β-SNAPs，其氨基酸序列如Seq ID No.1所示，或该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。本发明首次发现β-SNAPs的表达和含量变化可以指示慢性神经退行性疾病的早期发生，并开发出检测这种蛋白变化的蛋白质组学方法，为慢性神经退行性疾病的早期诊断和早期发现开辟了新思路，通过更深入的机理研究和损耗-时间曲线的建立，有助于将慢性神经退行性疾病的损失降到最低。
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公开(公告)号：CN103981210A
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201410168749.7
申请日：2014-04-24
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及动物医药工程技术领域，提供了一种真核表达载体，由含有牛β-防御素4成熟肽基因与真核表达载体pPIC9K构建而成的pPIC9K-mBNBD4，牛β-防御素4成熟肽基因的核苷酸序列如SEQ IDNO：1所示；还提供了一种重组菌株；还提供了一种牛β-防御素4成熟肽的制备方法，包括1)牛β-防御素4成熟肽基因的制备；2)上述真核表达载体的构建；3)上述重组菌株的制备；4)毕赤酵母阳性转化子体外诱导表达。本发明所表达的重组牛嗜中性粒细胞β-防御素4成熟肽具有抗菌活性，且有一定的抗结核活性，适合于在畜牧生产及疾病治疗中使用，而且生产成本低、生产效率高。
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公开(公告)号：CN102641501A
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201210119724.9
申请日：2012-04-17
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了NALP3-ASC炎症复合体及其激活抑制剂在制备朊病毒病药物中的应用。实验表明，朊病毒感染神经小胶质细胞，形成NALP3-ASC炎症复合体增强caspase-1和IL-1β的激活。炎症复合体NALP3抑制剂能够抑制NALP3和ASC表达，进而抑制caspase-1和IL-1β的激活和释放。本发明提供了NALP3-ASC炎症复合体抑制剂在筛选朊病毒病药物中的应用，通过将待测样品与朊病毒共刺激细胞，提取处理后细胞总RNA，用qPCR方法检测NALP3和ASC，根据PCR扩增结果判断样品对NALP3和ASC的mRNA表达抑制情况，从而筛选出抗Prion疾病的药物，起到预防、治疗或控制朊病毒疾病的作用。
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公开(公告)号：CN101550186B
公开(公告)日：2011-08-24
申请号：CN200910084226.3
申请日：2009-05-14
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及绵羊重组朊蛋白PrPC51-216及其制备方法，该蛋白具有序列表SEQ NO.2所示的氨基酸残基序列，或者是该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。本发明还涉及编码该蛋白的基因及利用该蛋白制备得到的单克隆抗体。本发明获得的针对绵羊朊蛋白PrPC51-216的特异单克隆抗体，可以作为诊断试剂用于疯牛病、羊痒病诊断和研究。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101550186A
公开(公告)日：2009-10-07
申请号：CN200910084226.3
申请日：2009-05-14
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及绵羊重组朊蛋白PrPC51－216及其制备方法，该蛋白具有序列表SEQ No.2所示的氨基酸残基序列，或者是该序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。本发明还涉及编码该蛋白的基因及利用该蛋白制备得到的单克隆抗体。本发明获得的针对绵羊朊蛋白PrPC51－216的特异单克隆抗体，可以作为诊断试剂用于疯牛病、羊痒病诊断和研究。
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公开(公告)号：CN112852848B
公开(公告)日：2022-04-29
申请号：CN202110287101.1
申请日：2021-03-17
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种密码子优化的结核分枝杆菌融合基因，以及相应融合蛋白、疫苗，在预防结核病中的应用和制备方法。通过将结核分枝杆菌感染早期分泌抗原Ag85A和潜伏期表达抗原HspX进行融合表达，两个抗原基因用柔性Linker(GGGGS)3进行连接，根据大肠杆菌的DNA密码子偏嗜性对融合基因序列进行密码子优化，随后将基因序列连接到载体pET‑30a(+)用于大肠杆菌表达。用纯化的重组蛋白Ag85A‑HspX(简称AH)和聚肌胞(PolyI：C)对小鼠进行鼻内免疫，证实其具有良好的免疫原性和抗牛分枝杆菌感染的保护作用。
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公开(公告)号：CN112891529A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202110285747.6
申请日：2021-03-17
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了牛β防御素5作为黏膜免疫佐剂在预防结核病中的应用。通过表达纯化重组蛋白牛β防御素5，联合聚肌胞(PolyI：C)和结核分枝杆菌蛋白亚单位疫苗AH，通过滴鼻方式对C57BL/6小鼠进行免疫，证实其促进蛋白亚单位疫苗AH免疫效果的作用。与聚肌胞和AH免疫相比，使用牛β防御素5可促进抗原AH特异性细胞免疫和体液免疫水平、促进亚单位疫苗AH的抗牛分枝杆菌感染的保护作用。
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公开(公告)号：CN103014032A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210494882.2
申请日：2012-11-28
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了用于MST1基因定量检测的标准质粒及试剂盒，还提供了检测MST1基因的引物，其具有如SEQ ID NO.2和SEQ IDNO.3所示的核苷酸序列。利用本发明的引物摸索出合适的实时荧光定量PCR反应体系与反应条件，实现对MST1基因的定量检测。本发明的检测方法及其试剂盒具有检测准确，灵敏度高、特异性强，简便快速的优点，能够很好地检测哺乳动物组织或细胞中MST1基因的表达量，为进一步研究MST1基因在哺乳动物系统中的调控作用提供有效工具。
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公开(公告)号：CN102887949A
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201210374797.2
申请日：2012-09-29
Applicant: 中国农业大学
IPC: C07K14/47 , C07K1/16 , C12N15/12 , C12N15/63 , C12N5/10 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12N15/66 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供了一种重组人朊蛋白hPrP及其制备方法和应用，该重组hPrP蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明以人全血基因为模板，以SEQ ID No3、4所示核苷酸序列为引物通过PCR方法获得带有酶切位点的人朊蛋白DNA序列，将其连接到pPROEX-htb质粒上，通过定点突变技术除去表达载体中目的基因之前的多余酶切位点，获得hPrP全真表达载体。将该载体在大肠杆菌中表达、过高亲和力层析柱纯化、复性，得到了重组人朊蛋白。本发明所得到的重组人朊蛋白hPrP具有较好的生物活性，可用于开发人朊蛋白多克隆抗体、单克隆抗体以及针对人的朊病毒病诊断试剂盒。
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