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公开(公告)号：CN113444816A
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN202110515707.6
申请日：2021-05-12
申请人： 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/07
摘要： 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas系统可视化检测炭疽芽胞杆菌及其耐药性的方法。该方法将DNAzyme中ssDNA设计成探针，结合CRISPR‑Cas12a系统对单链DNA的反式剪切活性，完成了对炭疽芽胞杆菌的鉴定和耐药基因的检测，检测结果可以根据反应液颜色变化来判断，方法简单便携，非常适合现场及临床标本的快速检测。本发明具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN108503698B
公开(公告)日：2021-03-05
申请号：CN201810510029.2
申请日：2018-05-24
申请人： 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
摘要： 本发明公开了鲍曼不动杆菌Ata蛋白的免疫原性。本发明提供了一种蛋白质，包括鲍曼不动杆菌Ata蛋白N‑端α‑螺旋部分39个氨基酸和佐剂蛋白；所述鲍曼不动杆菌Ata蛋白N‑端α‑螺旋部分39个氨基酸的氨基酸序列分别为序列2第127‑165位。本发明将鲍曼不动杆菌的表面蛋白Ata(Acinetobacter trimeric autotransporter)，截取N‑端α‑螺旋部分39个氨基酸，与CTB进行融合，在BL21中表达。经镍柱纯化，以40μg/只小鼠进行腹腔免疫，通过动物实验验证其免疫原性和免疫保护性，证明其具有良好的抗鲍曼不动杆菌的侵染。
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公开(公告)号：CN111333734A
公开(公告)日：2020-06-26
申请号：CN202010242030.9
申请日：2020-03-31
申请人： 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
IPC分类号： C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , C07K16/12 , A61K39/10 , A61P31/04 , A61P11/00
摘要： 本发明涉及一种百日咳丝状血凝素融合蛋白及其应用，所述融合蛋白以百日咳FHA氨基酸残基1877-2250片段和StxB通过肽链连接构成，并以融合蛋白来构建亚单位疫苗，并在大肠杆菌中成功诱导表达，通过Western-blot和ELISA鉴定了该融合蛋白的免疫原性；免疫小鼠后发现能产生高水平的抗体效价，为百日咳疫苗的研究提供了新思路。
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公开(公告)号：CN108690824A
公开(公告)日：2018-10-23
申请号：CN201810510030.5
申请日：2018-05-24
申请人： 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
IPC分类号： C12N1/21 , A61K39/112 , A61P31/04 , C12R1/01
摘要： 本发明公开了yfeCD基因敲除重组志贺氏菌的制备及应用。本发明提供了一种构建重组菌的方法，为抑制或沉默福氏志贺氏菌基因组上的yfeCD基因表达，得到重组菌。本发明利用λRED同源重组的方法成功敲除了301中的yfeC/D基因，得到yfeC/D基因缺失株，并利用豚鼠角膜实验、III型分泌系统诱导分泌及小鼠肺竞争性侵袭三个毒力评价模型，初步断定其中yfeC/D基因缺失株的毒力有明显减弱，表明yfeC/D基因在志贺氏菌致病过程中有可能起到重要作用，得到的yfeC/D基因缺失株可以用作减毒疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN108410790A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810510367.6
申请日：2018-05-24
申请人： 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
IPC分类号： C12N1/21 , A61K39/112 , A61P31/04 , C12R1/01
CPC分类号： Y02A50/476 , C07K14/25 , A61K39/0283 , A61K2039/522 , A61P31/04
摘要： 本发明公开了ebgR基因敲除重组志贺氏菌的制备及应用。本发明提供了构建重组菌的方法，为抑制或沉默福氏志贺氏菌基因组上的ebgR基因表达，得到重组菌。本发明利用λRED同源重组的方法成功敲除了301中的ebgR基因，得到ebgR缺失株，并利用豚鼠角膜实验、III型分泌系统诱导分泌及小鼠肺竞争性侵袭三个毒力评价模型，初步断定其中ebgR基因缺失株的毒力有明显减弱，表明ebgR基因在志贺氏菌致病过程中有可能起到重要作用，得到的ebgR基因缺失株可以用作减毒疫苗的制备。
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公开(公告)号：CN113462799B
公开(公告)日：2023-06-20
申请号：CN202110895338.8
申请日：2021-08-05
申请人： 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6816 , C12Q1/04 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一种基于染色体特异探针的炭疽芽胞杆菌鉴定方法。本发明提供了一种用于鉴定或者辅助鉴定炭疽芽胞杆菌的探针组，由SEQ ID No.1至SEQ ID No.51所示的51条探针组成。本发明探针对于未知样品的测序结果(包括二代或三代)进行检测，由于采用多达51条特异探针，只要有任何一条探针检测出来，就可以判定为阳性，检测出来的探针越多，可信度越高，并且这些探针均匀分布在整个染色体上，从而保证了即使测序质量差及覆盖度不高的基因组序列，也可以用这些电子探针进行查询，快速简便高效地鉴定出该样品是否携带有炭疽芽胞杆菌。
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公开(公告)号：CN111333733B
公开(公告)日：2022-05-03
申请号：CN202010175401.6
申请日：2020-03-13
申请人： 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
IPC分类号： C07K19/00 , C12N15/62 , A61K39/385 , A61K39/095 , A61P31/04
摘要： 本发明涉及重组融合蛋白和多糖结合疫苗。更具体地，本发明涉及包含五聚体的底物蛋白与可形成三聚体的肽序列的融合蛋白，包含所述融合蛋白的免疫原性组合物，所述融合蛋白在免疫中的用途，以及编码所述融合蛋白的多核苷酸序列，包含所述多核苷酸序列的表达载体，以及包含所述表达载体的宿主细胞。
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公开(公告)号：CN113444817A
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN202110515789.4
申请日：2021-05-12
申请人： 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
摘要： 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12a系统的炭疽芽胞杆菌检测方法。本发明采用恒温扩增技术，结合CRISPR‑Cas12a蛋白高灵敏度的反式剪切特性，再通过可视化检测，建立了一种可以对炭疽芽孢杆菌快速检测的方法。与之前炭疽杆菌的检测方法相比，本发明具有特异性高，检测时间短，无需电力装置等优点，尤其适用于基层及现场检测。本发明具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN110055255A
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201910379859.0
申请日：2019-05-08
申请人： 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/90 , C12N1/21 , C12R1/07
摘要： 本发明公开了切除炭疽芽胞杆菌中pXO1和pXO2质粒的方法。本发明提供的切除炭疽芽胞杆菌中pXO1和pXO2质粒的方法采用CRISPR/Cas9系统进行，CRISPR/Cas9系统中包含名称分别为sgRNA1和sgRNA2的两个sgRNA，sgRNA1识别的靶序列为pXO1质粒含有而炭疽芽胞杆菌不含有的特异序列；sgRNA2识别的靶序列为pXO2质粒含有而炭疽芽胞杆菌不含有的特异序列。本发明成功得到了不含有pXO1和pXO2质粒的炭疽芽胞杆菌，构建方法简单，切除效率高，且一次能筛选到三种不同质粒丢失表型的菌株，为构建新的疫苗株提供了更快捷、更方便新的手段，为炭疽芽胞杆菌的防治提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN108690824B
公开(公告)日：2019-05-14
申请号：CN201810510030.5
申请日：2018-05-24
申请人： 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
IPC分类号： C12N1/21 , A61K39/112 , A61P31/04 , C12R1/01
摘要： 本发明公开了yfeCD基因敲除重组志贺氏菌的制备及应用。本发明提供了一种构建重组菌的方法，为抑制或沉默福氏志贺氏菌基因组上的yfeCD基因表达，得到重组菌。本发明利用λRED同源重组的方法成功敲除了301中的yfeC/D基因，得到yfeC/D基因缺失株，并利用豚鼠角膜实验、III型分泌系统诱导分泌及小鼠肺竞争性侵袭三个毒力评价模型，初步断定其中yfeC/D基因缺失株的毒力有明显减弱，表明yfeC/D基因在志贺氏菌致病过程中有可能起到重要作用，得到的yfeC/D基因缺失株可以用作减毒疫苗的制备。
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