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公开(公告)号:CN116008564A
公开(公告)日:2023-04-25
申请号:CN202310036265.6
申请日:2023-01-09
Applicant: 中南大学湘雅二医院
IPC: G01N33/68 , G01N33/72 , G01N33/53 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,尤其涉及一种检测2‑NBDG阳性B细胞的试剂在制备诊断和/或预后自身免疫糖尿病制剂中的应用。目前自身免疫糖尿病尚缺乏有效的疾病标志物,早期的筛查与治疗面临巨大挑战。迫切需要寻找新的疾病标志物以提高诊疗效能。
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公开(公告)号:CN111560430A
公开(公告)日:2020-08-21
申请号:CN202010555343.X
申请日:2020-06-17
Applicant: 中南大学湘雅二医院
IPC: C12Q1/6883 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于分子生物学和医学领域,涉及一种检测rs1766位点多态性的试剂及其应用。通过该位点基因型的检测结果来预测1型糖尿病(T1DM)、成人隐匿性自身免疫糖尿病(LADA)或2型糖尿病(T2DM)的患病风险。本发明还公开了相应的检测试剂盒,该试剂盒含有扩增rs1766位点的引物以及检测该位点基因型的测序引物。利用本发明检测rs1766位点的基因型,方法简单易行,快速高效,成本低廉,为糖尿病的诊断和治疗提供了一个简捷的新途径。
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公开(公告)号:CN108785390A
公开(公告)日:2018-11-13
申请号:CN201810609580.2
申请日:2018-06-13
IPC: A61K36/61 , A61K9/22 , A61P3/10 , A61K127/00
CPC classification number: A61K36/61 , A61K9/2018 , A61K9/2054 , A61K2236/331 , A61K2236/39 , A61K2236/51 , A61K2236/53 , A61P3/10
Abstract: 本发明公开了一种番石榴叶降糖提取物缓释片剂的制备方法,包括如下步骤:将番石榴叶洗净、干燥、粉碎后过筛,加入蒸馏水,用超声波控温处理,收集提取液,浓缩后得到的番石榴叶提取物与低聚果糖、缓释剂、淀粉进行预混后干燥,喷入粘合剂,加入崩解剂、微晶纤维素,进行干燥,整粒,压片得片芯,磨边后进行包衣。该方法操作简便,成本较低,且产品外观光滑平整,能够长期储存。制备得到的番石榴叶降糖提取物缓释片剂,其原料均为药食同源且有降糖功效的物质,且缓释片剂能够在12h内使药物持续作用,治疗效果更佳;经动物功能学试验证明,具有辅助降糖的保健功能,适合糖尿病患者长期服用。
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公开(公告)号:CN108949570A
公开(公告)日:2018-12-07
申请号:CN201810804172.2
申请日:2018-07-20
Abstract: 本发明公开了一种番石榴叶内生菌的分离方法,包括以下步骤:(1)在夏季采集具有10年以上树龄的新鲜番石榴老叶,低温放置;(2)对番石榴老叶进行表面灭菌处理得到备用叶片;(3)将步骤(2)中得到的备用叶片剪碎后,加入生理盐水与纤维素酶后研磨成匀浆,将匀浆稀释后涂布到培养平板上培养;(4)待培养平板上长出菌落时,挑选单菌落,进行划线分离纯化,即得到番石榴叶内生菌。本发明的方法特别适合于从番石榴叶中分离内生菌,其工艺步骤简单,操作方便。
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公开(公告)号:CN106399336A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610771314.0
申请日:2016-08-30
Applicant: 中南大学湘雅二医院
Abstract: 本发明提供一种高表达人GAD65蛋白的基因序列和蛋白制备方法,真核宿主为果蝇S2细胞。通过探讨密码子使用种属偏好性,对人GAD65的原始基因序列进行密码子优化,得到一个可提高重组蛋白表达效率的全新GAD65基因序列,如SEQ NO.1所示。本发明提供了承载人全新GAD65序列的果蝇细胞高表达载体,包含如SEQ NO.1所示的GAD65基因序列。GAD65含有StrepII标签,通过一步亲和层析纯化即可获得高纯度、高免疫原性的GAD65蛋白,大大提高了重组蛋白的得率并降低了成本。本发明改变了传统的用酵母或昆虫杆状病毒表达系统获得人GAD65的方法,首次利用果蝇S2细胞这一高密度连续培养体系大量表达GAD65,通过StrepII标签快速制备高纯度、低成本并具有良好免疫原性的人GAD65蛋白。
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公开(公告)号:CN116218982B
公开(公告)日:2025-04-01
申请号:CN202210814048.0
申请日:2022-07-12
Applicant: 中南大学湘雅二医院
IPC: C12Q1/6883 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及医药技术领域,尤其涉及Hsa_circRNA_100632作为暴发性1型糖尿病(FT1D)诊断标志物的应用。FT1D患者外周血单个核细胞(PBMC)中hsa_circRNA_100632水平显著增高,与1型糖尿病患者及正常对照具有显著性差异,临床上可以作为诊断性生物标志物用于对FT1D患者诊断及鉴别诊断。并且,上调hsa_circRNA_100632水平可以构建FT1D的模型。
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公开(公告)号:CN108760932B
公开(公告)日:2021-04-27
申请号:CN201810673039.8
申请日:2018-06-26
Abstract: 本发明公开了一种番石榴叶中化学成分的鉴定方法,包括如下步骤:采用乙醇溶液对番石榴叶粉末进行浸提,用微孔滤膜滤去残渣后收集提取液;得到的提取液采用超高效液相色谱法进行分离,得到不同馏分;采用飞行时间质谱法采集数据,结合目标化合物的一级质谱、二级质谱、同位素分布和化合物裂解规律进行化学成分的鉴定。本发明的鉴定方法,采用有机溶剂沉淀法浸提提取番石榴叶中化学成分,处理简单,操作简便,无需繁琐的提取步骤;采用超高效液相色谱法对番石榴叶的化学成分进行分离,极大提高了化学成分的纯度和鉴定的效率,检测时间短,检测限、精密度和回收率方面的效果优良;采用质谱法采集数据,灵敏度高,准确性强。
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公开(公告)号:CN108410863B
公开(公告)日:2020-10-16
申请号:CN201810524524.9
申请日:2018-05-28
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种番石榴叶片基因组DNA的高效提取方法,主要包括以下步骤:(1)向番石榴叶片中加入液氮,磨成粉末,再加入洗液,超声处理后在冰中静置,离心得到上清液a与底渣a;(2)向底渣a中加入酶,在冰中静置后,离心得到上清液b与底渣b;(3)向底渣b中加入CTAB抽提缓冲液,离心得到上清液c与底渣c;(4)向上清液c中加入Tris饱和酚、氯仿与异戊醇,离心得到上清液d与底渣d;(5)向上清液d中加入异丙醇,离心得到上清液e与底渣e;(6)将步骤(4)中得到的底渣e用乙醇洗涤,离心收集底渣即得到番石榴叶片基因组DNA。本发明DNA纯度高、提取率高。
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公开(公告)号:CN109097319A
公开(公告)日:2018-12-28
申请号:CN201810803117.1
申请日:2018-07-20
Abstract: 本发明公开了一种番石榴叶悬浮细胞的培养方法,包括以下步骤:(1)采集番石榴成熟叶片,洗净后进行表面灭菌处理,切块得到外植体;(2)将外植体接种至愈伤组织诱导培养基中进行诱导培养得到愈伤组织;(3)将愈伤组织接种至愈伤组织增殖培养基中进行继代培养得到增殖愈伤组织;(4)将增殖愈伤组织接种至液体培养基中进行继代培养,培养过程中保持振荡,继代培养更换培养液时,用吸管取出单细胞或小细胞团进行下一代振荡培养;最终得到只含有单细胞或小细胞团的培养物,将这些培养物混匀即得到番石榴叶悬浮细胞。本发明还提供一种上述番石榴叶悬浮细胞的应用。本发明的方法具有生产成本低、生产周期短、生产效率高等优点。
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公开(公告)号:CN108977475A
公开(公告)日:2018-12-11
申请号:CN201810804985.1
申请日:2018-07-20
Abstract: 本发明公开了一种番石榴叶黄酮苷元的生产方法,包括以下步骤:(1)从番石榴叶中提取黄酮类化合物;(2)将步骤(1)中得到的黄酮类化合物加入到含灰色链霉菌(Streptomyces griseus)的液体培养基中培养,振荡发酵培养得到发酵溶液;(3)将步骤(2)中得到的发酵溶液振荡酶解得到酶解溶液;(4)将步骤(3)中得到的酶解溶液静置、离心,沉淀用甲醇溶解,过滤后得到含有黄酮苷元的甲醇溶液。本发明番石榴叶黄酮苷元的生产方法简便、易于操作,最终得到的黄酮苷元的杂质含量小,后续提纯工艺简单。
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