公开(公告)号：CN104531762A

公开(公告)日：2015-04-22

申请号：CN201410765155.4

申请日：2014-12-12

Applicant: 东南大学

Inventor： 余文敏 ,  陈平圣 ,  王智 ,  丁粉干 ,  刘静 ,  刘蕾

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明提供了一种RAB7A基因和EGFP基因过表达融合绿色荧光蛋白慢病毒载体及其构建方法和应用。本发明载体以慢病毒载体LV11为骨架载体，在LV11载体的CMV启动子后面按5’到3’方向插入EGFP基因和RAB7A基因片段，本发明构建的EGFP和RAB7A基因过表达的融合绿色荧光蛋白慢病毒载体，解决了RAB7A基因研究中过表达载体有效和直观等问题。该载体以CMV为启动子，能够保证真核基因高效表达；采用EGFP为标记物，能够通过直观观察表达荧光的强弱来判断细胞发生自噬和内吞的程度以及RAB7A基因在细胞缺氧过程中的作用，为研究RAB7A基因的功能提供了良好的工具，为后续的RAB7A的相关研究提供基础。

公开(公告)号：CN104531762B

公开(公告)日：2017-06-23

申请号：CN201410765155.4

申请日：2014-12-12

Applicant: 东南大学

Inventor： 余文敏 ,  陈平圣 ,  王智 ,  丁粉干 ,  刘静 ,  刘蕾

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明提供了一种RAB7A基因和EGFP基因过表达融合绿色荧光蛋白慢病毒载体及其构建方法和应用。本发明载体以慢病毒载体LV11为骨架载体，在LV11载体的CMV启动子后面按5’到3’方向插入EGFP基因和RAB7A基因片段，本发明构建的EGFP和RAB7A基因过表达的融合绿色荧光蛋白慢病毒载体，解决了RAB7A基因研究中过表达载体有效和直观等问题。该载体以CMV为启动子，能够保证真核基因高效表达；采用EGFP为标记物，能够通过直观观察表达荧光的强弱来判断细胞发生自噬和内吞的程度以及RAB7A基因在细胞缺氧过程中的作用，为研究RAB7A基因的功能提供了良好的工具，为后续的RAB7A的相关研究提供基础。

公开(公告)号：CN103525950A

公开(公告)日：2014-01-22

申请号：CN201310504021.2

申请日：2013-10-23

Applicant: 东南大学

Inventor： 孟继鸿 ,  余文敏

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2531/113

Abstract: 本发明提供的一种用于鉴别CVA6和非CVA6肠道病毒的RT-PCR引物对，包括：上游引物序列为：5’-TCGAAATGGGGTTAATGAGGCG-3’；下游引物序列为：5’-CRCCTTCATAATCMGTGGTGG-3’；其中R为A或G，M为A或C。本发明还提供了一种用于鉴别CVA6和非CVA6肠道病毒的双重一步法引物，包括权利要求1所述的RT-PCR引物对以及肠道病毒通用引物。应用本发明提供的用于鉴别CVA6和非CVA6肠道病毒的RT-PCR引物对，能够实现一次性完成CVA6型与非CVA6型肠道病毒相关基因的扩增，显著提高CVA6型与非CVA6型手足口病的检测效率，敏感性好、特异性高。

公开(公告)号：CN103525950B

公开(公告)日：2015-07-01

申请号：CN201310504021.2

申请日：2013-10-23

Applicant: 东南大学

Inventor： 孟继鸿 ,  余文敏

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供的一种用于鉴别CVA6和非CVA6肠道病毒的RT-PCR引物对，包括：上游引物序列为：5’-TCGAAATGGGGTTAATGAGGCG-3’；下游引物序列为：5’-CRCCTTCATAATCMGTGGTGG-3’；其中R为A或G，M为A或C。本发明还提供了一种用于鉴别CVA6和非CVA6肠道病毒的双重一步法引物，包括权利要求1所述的RT-PCR引物对以及肠道病毒通用引物。应用本发明提供的用于鉴别CVA6和非CVA6肠道病毒的RT-PCR引物对，能够实现一次性完成CVA6型与非CVA6型肠道病毒相关基因的扩增，显著提高CVA6型与非CVA6型手足口病的检测效率，敏感性好、特异性高。