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公开(公告)号：CN110357948B
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN201910048712.3
申请日：2019-01-18
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明属于蛋白质技术领域，公开了一种MdrP突变体的基因、氨基酸、蛋白功能及药物积累活性检测，在含有阳离子(Na+、K+)的Buffer中加入CCCP移除跨膜H+梯度只保留跨膜阳离子梯度驱动蛋白转运，或在buffer中分别加入Monensin或Nigericin移除阳离子梯度只保留跨膜H+梯度来驱动蛋白转运，实现不同驱动作用之间的相对定量对比。本发明明确了MdrP蛋白高度保守氨基酸位点的重要功能，证明了MdrP蛋白是一个H+和Na+驱动的药物外排蛋白；N146是H+结合位点，D223、Q242是Na+、H+竞争结合位点，或可以成为对MFS家族抗药蛋白理解的有利理论支撑。
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公开(公告)号：CN110357948A
公开(公告)日：2019-10-22
申请号：CN201910048712.3
申请日：2019-01-18
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明属于蛋白质技术领域，公开了一种MdrP突变体的基因、氨基酸、蛋白功能及药物积累活性检测，在含有阳离子(Na+、K+)的Buffer中加入CCCP移除跨膜H+梯度只保留跨膜阳离子梯度驱动蛋白转运，或在buffer中分别加入Monensin或Nigericin移除阳离子梯度只保留跨膜H+梯度来驱动蛋白转运，实现不同驱动作用之间的相对定量对比。本发明明确了MdrP蛋白高度保守氨基酸位点的重要功能，证明了MdrP蛋白是一个H+和Na+驱动的药物外排蛋白；N146是H+结合位点，D223、Q242是Na+、H+竞争结合位点，或可以成为对MFS家族抗药蛋白理解的有利理论支撑。
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公开(公告)号：CN109628474B
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN201910048713.8
申请日：2019-01-18
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/31 , C07K14/195 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种游动球菌耐盐碱基因mceT及其鉴定方法，耐盐碱基因mceT，含一个921bp的完整开放阅读框ORF；从德昌游动球菌中获得含有耐盐碱相关的基因片段；构建含有游动球菌耐盐碱基因mceT基因的原核表达载体；通过化转异源宿主将携带基因mceT的质粒电击转化的方法导入至KNabc宿主中，对基因mceT生理功能及编码的蛋白活性进行鉴定。本发明能够抑制一株Zn2+敏感型大肠杆菌突变株在含0.75mM ZnCl2的培养基中的生长。并且构建了MceT蛋白的多种突变体，使其只能行使耐盐碱或促进Zn2+向细胞内扩散的其中一种功能。
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公开(公告)号：CN109628474A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201910048713.8
申请日：2019-01-18
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/31 , C07K14/195 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12R1/19
CPC classification number: C07K14/195 , C12N15/70
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种游动球菌耐盐碱基因mceT及其鉴定方法，耐盐碱基因mceT，含一个921bp的完整开放阅读框ORF；从德昌游动球菌中获得含有耐盐碱相关的基因片段；构建含有游动球菌耐盐碱基因mceT基因的原核表达载体；通过化转异源宿主将携带基因mceT的质粒电击转化的方法导入至KNabc宿主中，对基因mceT生理功能及编码的蛋白活性进行鉴定。本发明能够抑制一株Zn2+敏感型大肠杆菌突变株在含0.75mM ZnCl2的培养基中的生长。并且构建了MceT蛋白的多种突变体，使其只能行使耐盐碱或促进Zn2+向细胞内扩散的其中一种功能。
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