公开(公告)号：CN109321591B

公开(公告)日：2021-07-13

申请号：CN201811231689.3

申请日：2018-10-22

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 李家乐 ,  张学书 ,  徐晓雁 ,  沈玉帮 ,  张猛 ,  白玉麟 ,  缪一恒 ,  王沈同 ,  张家华 ,  孟新展 ,  方圆 ,  王安琪 ,  代雅凡 ,  周丰林

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及一种重组质粒及其构建方法，所述重组质粒的构建方法包括：(1)PCR法扩增Kan基因及其启动子，并将PCR产物电泳分析和回收纯化；(2)PCR法克隆pGFPuv质粒，并回PCR产物，但质粒中Amp和其启动子不进行克隆；(3)培养上述得到的基因与载体并转化挑取单克隆菌株进行鉴定测序，结果得到绿色荧光蛋白表达载体pKGFPuv；(4)将pKGFPuv转化到DH5α中，即得到重组质粒。本发明重组构建的质粒带卡纳抗性且能够稳定表达GFPuv蛋白，填补了如今带有GFPuv的质粒没有卡纳抗性的空缺，为很多生物学研究提供了很大的便利，同时也对微生物在生物体内的实时观测提供了很大的帮助。

公开(公告)号：CN109321591A

公开(公告)日：2019-02-12

申请号：CN201811231689.3

申请日：2018-10-22

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 李家乐 ,  张学书 ,  徐晓雁 ,  沈玉帮 ,  张猛 ,  白玉麟 ,  缪一恒 ,  王沈同 ,  张家华 ,  孟新展 ,  方圆 ,  王安琪 ,  代雅凡 ,  周丰林

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及一种重组质粒及其构建方法，所述重组质粒的构建方法包括：(1)PCR法扩增Kan基因及其启动子，并将PCR产物电泳分析和回收纯化；(2)PCR法克隆pGFPuv质粒，并回PCR产物，但质粒中Amp和其启动子不进行克隆；(3)培养上述得到的基因与载体并转化挑取单克隆菌株进行鉴定测序，结果得到绿色荧光蛋白表达载体pKGFPuv；(4)将pKGFPuv转化到DH5α中，即得到重组质粒。本发明重组构建的质粒带卡纳抗性且能够稳定表达GFPuv蛋白，填补了如今带有GFPuv的质粒没有卡纳抗性的空缺，为很多生物学研究提供了很大的便利，同时也对微生物在生物体内的实时观测提供了很大的帮助。

公开(公告)号：CN108849648A

公开(公告)日：2018-11-23

申请号：CN201810820367.6

申请日：2018-07-24

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 李家乐 ,  缪一恒 ,  陶丽竹 ,  王安琪 ,  徐晓雁 ,  沈玉帮 ,  张猛

IPC: A01K61/10 ,  A01K63/04

Abstract: 本发明涉及一种基于养殖桶循环系统的培育大规格草鱼鱼种的方法，所述方法包括以下步骤：骤S1.基于养殖桶的循环养殖系统；步骤S2.鱼苗的放养投饲；步骤S3.日常水质调控；步骤S4.后期养殖；步骤S5.饲料搭配。其优点表现在：本发明的一种基于养殖桶循环系统的培育大规格草鱼鱼种的方法，仅便于养殖管理，保证存活率，更有利于培育出大小较为均一、体质健康的鱼种。大大降低鱼苗死亡率，鱼种满足池塘和网箱养殖要求，以达到增加产量和提高效益的目的。