一种重组质粒及其构建方法

    公开(公告)号:CN109321591B

    公开(公告)日:2021-07-13

    申请号:CN201811231689.3

    申请日:2018-10-22

    Abstract: 本发明涉及一种重组质粒及其构建方法,所述重组质粒的构建方法包括:(1)PCR法扩增Kan基因及其启动子,并将PCR产物电泳分析和回收纯化;(2)PCR法克隆pGFPuv质粒,并回PCR产物,但质粒中Amp和其启动子不进行克隆;(3)培养上述得到的基因与载体并转化挑取单克隆菌株进行鉴定测序,结果得到绿色荧光蛋白表达载体pKGFPuv;(4)将pKGFPuv转化到DH5α中,即得到重组质粒。本发明重组构建的质粒带卡纳抗性且能够稳定表达GFPuv蛋白,填补了如今带有GFPuv的质粒没有卡纳抗性的空缺,为很多生物学研究提供了很大的便利,同时也对微生物在生物体内的实时观测提供了很大的帮助。

    一种重组质粒及其构建方法

    公开(公告)号:CN109321591A

    公开(公告)日:2019-02-12

    申请号:CN201811231689.3

    申请日:2018-10-22

    Abstract: 本发明涉及一种重组质粒及其构建方法,所述重组质粒的构建方法包括:(1)PCR法扩增Kan基因及其启动子,并将PCR产物电泳分析和回收纯化;(2)PCR法克隆pGFPuv质粒,并回PCR产物,但质粒中Amp和其启动子不进行克隆;(3)培养上述得到的基因与载体并转化挑取单克隆菌株进行鉴定测序,结果得到绿色荧光蛋白表达载体pKGFPuv;(4)将pKGFPuv转化到DH5α中,即得到重组质粒。本发明重组构建的质粒带卡纳抗性且能够稳定表达GFPuv蛋白,填补了如今带有GFPuv的质粒没有卡纳抗性的空缺,为很多生物学研究提供了很大的便利,同时也对微生物在生物体内的实时观测提供了很大的帮助。

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