公开(公告)号：CN111944833B

公开(公告)日：2023-04-18

申请号：CN202010856997.6

申请日：2020-08-24

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 周志刚 ,  李斯琪 ,  毕燕会

IPC: C12N15/55 ,  C12N9/18 ,  C12P7/6418

Abstract: 本发明属于基因工程领域，公开了缺刻缘绿藻磷脂酶A2的基因序列及其编码蛋白和应用。缺刻缘绿藻磷脂酶A2(MiPLA2)的基因序列如SEQ ID NO:3所示，可用于绿藻油脂合成调控，通过特异性地断裂甘油磷脂中甘油碳骨架sn‑2位的酯键，将磷脂酰胆碱水解为溶血磷脂酰胆碱和游离脂肪酸，经游离脂肪酸生产富含花生四烯酸的三酰甘油。本发明通过构建MiPLA2所编码蛋白的原核表达载体pET32a‑MiPLA2，将其转化至大肠杆菌中诱导表达和纯化获得重组蛋白MiPLA2，经检测MiPLA2能将磷脂酰胆碱水解成溶血磷脂酰胆碱，从而鉴定MiPLA2的基因功能。

公开(公告)号：CN111944833A

公开(公告)日：2020-11-17

申请号：CN202010856997.6

申请日：2020-08-24

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 周志刚 ,  李斯琪 ,  毕燕会

IPC: C12N15/55 ,  C12N9/18 ,  C12P7/64

Abstract: 本发明属于基因工程领域，公开了缺刻缘绿藻磷脂酶A2的基因序列及其编码蛋白和应用。缺刻缘绿藻磷脂酶A2(MiPLA2)的基因序列如SEQ ID NO:3所示，可用于绿藻油脂合成调控，通过特异性地断裂甘油磷脂中甘油碳骨架sn-2位的酯键，将磷脂酰胆碱水解为溶血磷脂酰胆碱和游离脂肪酸，经游离脂肪酸生产富含花生四烯酸的三酰甘油。本发明通过构建MiPLA2所编码蛋白的原核表达载体pET32a-MiPLA2，将其转化至大肠杆菌中诱导表达和纯化获得重组蛋白MiPLA2，经检测MiPLA2能将磷脂酰胆碱水解成溶血磷脂酰胆碱，从而鉴定MiPLA2的基因功能。