一种适用于单细胞测序的小鼠视网膜冰冻组织细胞核悬液及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN114015752B

    公开(公告)日:2023-08-22

    申请号:CN202111248805.4

    申请日:2021-10-26

    Abstract: 本发明公开了一种小鼠视网膜组织单细胞测序细胞核悬液的制备方法,所述方法包括:配置细胞核裂解液、细胞核洗涤缓冲液、碘克沙醇‑蔗糖溶液1、碘克沙醇‑蔗糖溶液2,并置于冰上预冷;将小鼠视网膜冰冻组织取出至置于冰上的培养皿中,用预冷的PBS洗涤后,转移至离心管中;离心管埋于冰中,加入细胞核裂解液,使用电动匀浆破碎组织并孵育;使用细胞筛进行过滤至新的离心管中,离心弃上清;使用碘克沙醇‑蔗糖溶液进行密度梯度离心;向细胞核沉淀中加入细胞核洗涤缓冲液,离心弃上清;用细胞核洗涤缓冲液重悬沉淀,吸取单细胞核进行镜检细胞核浓度、细胞核碎片比例及细胞核结团比例。本发明还公开了上述制备方法在单细胞转录组测序中的应用。

    一种适用于单细胞测序的低温解离试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN113604539B

    公开(公告)日:2023-07-14

    申请号:CN202110901060.0

    申请日:2021-08-06

    Abstract: 本发明公开了一种适用于单细胞测序的低温解离试剂盒,所述试剂盒包括酶解液、酶解缓冲液1、酶解缓冲液2。本发明还公开了所述试剂盒在单细胞测序中的应用。本发明提供的适用于单细胞测序的低温解离试剂盒将有力的促进低温解离的开展和广泛应用,进一步提升单细胞测序数据质量。本发明提供的试剂盒成分可以直接使用,操作人员不需要再进行解离液的配置;提升效率的同时,使操作步骤实现“标准化”,更有利于避免因为人为配置带来的操作误差,提升数据质量。

    一种在同一肝内胆管组织样本中同时进行外泌体、单细胞、单细胞核测序的方法

    公开(公告)号:CN115992086A

    公开(公告)日:2023-04-21

    申请号:CN202211484254.6

    申请日:2022-11-24

    Abstract: 本发明公开了一种从同一肝内胆管组织样本出发,基于同一组织样本同时进行外泌体、单细胞悬液和单细胞核悬液的制备方法。本发明所述的方法可以在同一份样本中得到更多有意义的数据,挖掘到更深层次的生物学信息,从而解析出生物现象背后这个网络最关键的一个动态机制。本发明创新改进地将外泌体制备、单细胞悬液制备和单细胞核悬液制备三种技术相结合,突破了现有的技术障碍,得到样本中更全面的细胞类型的同时,又真正解析了生命现象背后这种细胞互作的网络机制(既能了解单个细胞的功能,又能了解细胞之间是如何传递信号的以及特定的细胞对信号会有什么响应。)从而丰富了研究数据,为挖掘更深层次的生物学机理提供了基础。

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