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公开(公告)号:CN118166067A
公开(公告)日:2024-06-11
申请号:CN202311780745.X
申请日:2023-12-22
Applicant: 上海欧易生物医学科技有限公司
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6869 , C12Q1/24
Abstract: 本发明公开了一种适用于全转录测序的人硬骨组织细胞的获得方法,包括如下步骤:组织清洗和预处理:将人硬骨组织置于离心管中,用DPBS浸泡,颠倒离心管清洗人硬骨组织,并用预冷的BL缓冲液孵育进行预处理;组织处理和酶解:将孵育后的人硬骨组织和BL缓冲液通过细胞筛网,用预冷的PBS冲洗组织2~3次;将细胞筛网上的人硬骨组织转移到培养皿中并加入BE溶液,剪小组织,补加BE溶液;将培养皿放入37℃恒温培养箱,酶解15min,每5min摇晃培养皿;酶解结束后,使用移液器将酶解液转移到新的离心管中;细胞分离和收集:使用细胞筛过滤酶解液,用含0.1%(m/v)BSA的预冷DPBS冲洗细胞筛网;将滤液置于水平离心机中离心,收集细胞。
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公开(公告)号:CN117448424A
公开(公告)日:2024-01-26
申请号:CN202311611970.0
申请日:2023-11-29
Applicant: 上海欧易生物医学科技有限公司
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6869 , C40B50/06
Abstract: 本发明公开了一种适用于单细胞全转录组测序的建库方法,所述方法包括细胞核预处理和生成单细胞全转录组文库步骤。本发明还公开了一种试剂盒,及所述试剂盒在细胞核固定、在细胞核单细胞全转录组建库中的应用。本发明提出的建库方法填补了目前技术空白,目前尚缺少单细胞全转录组的测序技术;解决了现有技术中对于样本限制,本发明的技术方案以固定的细胞核作为实验材料,允许样本复杂性,有效提高样本利用率;操作流程简单,成本低廉,本发明提供的技术方案不依赖于复杂的仪器设备,全程是移液操作,实现了能够以低廉成本进行单细胞测序,有望实现单细胞测序技术平民化,有力促进单细胞测序技术发展,推动了单细胞在生命科学领域的研究。
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公开(公告)号:CN117247887A
公开(公告)日:2023-12-19
申请号:CN202211622695.8
申请日:2022-12-16
Applicant: 上海欧易生物医学科技有限公司
IPC: C12N5/04 , C12N15/10 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明属于生物技术领域,提供了一种拟南芥叶片组织同时制备原生质体和单细胞核的方法及应用。本发明方法可以同时得到同一植物组织的原生质体和细胞核,且可以实现对同一植物组织的原生质体和细胞核进行测序,较为全面地获取植物细胞的遗传信息。目前并未发现有在植物同一组织中同时进行原生质体制备和单细胞核提取的技术,本发明弥补现有技术的技术空白,具有广泛应用前景。
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公开(公告)号:CN115976172A
公开(公告)日:2023-04-18
申请号:CN202211482201.0
申请日:2022-11-24
Applicant: 上海欧易生物医学科技有限公司
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6869
Abstract: 一种中性粒细胞标志基因集和提高低丰度基因检出率的cDNA扩增方法。本发明公开了一种针对人‑全血中性粒细胞的标志基因集(MarkerGeneSet),所述基因集包括33个中性粒细胞标志基因及相应的引物池序列,可以有效帮助鉴定细胞类型;本发明还针对中性粒细胞标志基因集公开了一种cDNA线性扩增方法,在一定程度上能很好的富集目的基因片段,且能提高单细胞转录组灵敏度、避免扩增偏差和错误,改善了后续单细胞测序过程中部分标志基因丢失进而导致的细胞类型丢失的状况。
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公开(公告)号:CN119913240A
公开(公告)日:2025-05-02
申请号:CN202311427348.4
申请日:2023-10-31
Applicant: 上海欧易生物医学科技有限公司
IPC: C12Q1/6869 , C12Q1/6895 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明提出了一种适用于烟草叶柄组织的空间全转录测序方法和应用。本发明方法中,采用适用于烟草叶柄的组织包埋方法、冷冻切片方法,有效保证烟草叶柄切片均匀平整,维持结构完整;采用适用于植物组织透化前的预处理液,可有效酶解植物组织细胞壁并增加细胞膜通透性,使RNA更好释放;采用适用于烟草叶柄组织原位聚腺苷酸化的处理方法,可有效对切片样本中非编码RNA进行原位聚腺苷酸化,提高非编码RNA的捕获效率;采用适用于空间全转录组测序流程的可从cDNA文库中去除rRNA的方法,可有效通过湿实验端从文库中去除rRNA,避免由于捕获核糖体RNA量过高而导致其他RNA种类的测序深度降低,极大提高数据利用率。本发明具有广泛应用前景。
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公开(公告)号:CN115074309B
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202210722601.8
申请日:2022-06-24
Applicant: 上海欧易生物医学科技有限公司
IPC: C12N5/071 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明首次创新公开了一种在同一小鼠肾脏样本中同时进行单细胞悬液和单细胞核悬液制备、同时进行单细胞测序和单细胞核测序的方法。本发明还公开用于前述方法中的试剂盒。本发明填补现有技术空白,获取样本中更全面的细胞类型,为挖掘更深层次生物学机理提供了新的技术方案,具有广泛应用前景。
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公开(公告)号:CN115612720A
公开(公告)日:2023-01-17
申请号:CN202211189716.1
申请日:2022-09-28
Applicant: 上海欧易生物医学科技有限公司
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明公开了一种适用于单细胞测序的猕猴桃根组织细胞核的制备方法,通过独创的裂解液配方和细胞核悬液优化方法制备得到细胞核质量很高。与现有技术中6~7种组分的裂解液配方相比,本发明裂解液配方显著减少;实验流程在30分钟内即可完成细胞核的制备。本发明所述方法避免蔗糖沉积等步骤,节约试剂、耗材,降低成本,同时大大缩短时间,提高效率,便于大量样本实验的开展。本发明还公开了一种KR裂解液,试剂/试剂盒及其在制备适用于单细胞测序的猕猴桃根组织细胞核的方法中的应用。
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公开(公告)号:CN116179649B
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202310060852.9
申请日:2023-01-19
Applicant: 上海欧易生物医学科技有限公司
IPC: C12Q1/6806
Abstract: 本发明公开了一种富集单细胞测序小片段cDNA以用于鉴定单细胞转录组中miRNA表达的方法,采用SPRISlect磁珠分选文库片段,在磁珠结合液中加入PEG10000、异丙醇和三氯六氨络合钴,以提高小片段100~300bp富集。本发明创新地将DNA线性扩增和磁珠小片段分选技术与10xGenomics单细胞文库构建方法相融合,解决现有技术中存在的单细胞测序过程中由小片段富集能力不足而导致小片段PrimRNA数据丢失的问题。本发明具有广泛应用前景。
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公开(公告)号:CN115612720B
公开(公告)日:2025-03-14
申请号:CN202211189716.1
申请日:2022-09-28
Applicant: 上海欧易生物医学科技有限公司
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明公开了一种适用于单细胞测序的猕猴桃根组织细胞核的制备方法,通过独创的裂解液配方和细胞核悬液优化方法制备得到细胞核质量很高。与现有技术中6~7种组分的裂解液配方相比,本发明裂解液配方显著减少;实验流程在30分钟内即可完成细胞核的制备。本发明所述方法避免蔗糖沉积等步骤,节约试剂、耗材,降低成本,同时大大缩短时间,提高效率,便于大量样本实验的开展。本发明还公开了一种KR裂解液,试剂/试剂盒及其在制备适用于单细胞测序的猕猴桃根组织细胞核的方法中的应用。
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公开(公告)号:CN115975904B
公开(公告)日:2025-02-28
申请号:CN202211622537.2
申请日:2022-12-16
Applicant: 上海欧易生物医学科技有限公司
IPC: C12N5/04 , C12N15/10 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明公开了一种适用于拟南芥叶片组织同时提取细胞核和外泌体及测序的方法,包括配置试剂、样品处理、细胞核悬液制备、外泌体纯化。本发明所述方法填补了植物界这一技术空白,促进了植物外泌体的研究及单细胞核测序技术在植物组织中的应用,是植物研究领域一大技术突破。
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