一种适用于全转录测序的人硬骨组织细胞的获得方法及应用

    公开(公告)号:CN118166067A

    公开(公告)日:2024-06-11

    申请号:CN202311780745.X

    申请日:2023-12-22

    Abstract: 本发明公开了一种适用于全转录测序的人硬骨组织细胞的获得方法,包括如下步骤:组织清洗和预处理:将人硬骨组织置于离心管中,用DPBS浸泡,颠倒离心管清洗人硬骨组织,并用预冷的BL缓冲液孵育进行预处理;组织处理和酶解:将孵育后的人硬骨组织和BL缓冲液通过细胞筛网,用预冷的PBS冲洗组织2~3次;将细胞筛网上的人硬骨组织转移到培养皿中并加入BE溶液,剪小组织,补加BE溶液;将培养皿放入37℃恒温培养箱,酶解15min,每5min摇晃培养皿;酶解结束后,使用移液器将酶解液转移到新的离心管中;细胞分离和收集:使用细胞筛过滤酶解液,用含0.1%(m/v)BSA的预冷DPBS冲洗细胞筛网;将滤液置于水平离心机中离心,收集细胞。

    一种适用于单细胞核全转录组测序的建库方法、试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN117448424A

    公开(公告)日:2024-01-26

    申请号:CN202311611970.0

    申请日:2023-11-29

    Abstract: 本发明公开了一种适用于单细胞全转录组测序的建库方法,所述方法包括细胞核预处理和生成单细胞全转录组文库步骤。本发明还公开了一种试剂盒,及所述试剂盒在细胞核固定、在细胞核单细胞全转录组建库中的应用。本发明提出的建库方法填补了目前技术空白,目前尚缺少单细胞全转录组的测序技术;解决了现有技术中对于样本限制,本发明的技术方案以固定的细胞核作为实验材料,允许样本复杂性,有效提高样本利用率;操作流程简单,成本低廉,本发明提供的技术方案不依赖于复杂的仪器设备,全程是移液操作,实现了能够以低廉成本进行单细胞测序,有望实现单细胞测序技术平民化,有力促进单细胞测序技术发展,推动了单细胞在生命科学领域的研究。

    一种适用于烟草叶柄组织的空间全转录测序方法及应用

    公开(公告)号:CN119913240A

    公开(公告)日:2025-05-02

    申请号:CN202311427348.4

    申请日:2023-10-31

    Abstract: 本发明提出了一种适用于烟草叶柄组织的空间全转录测序方法和应用。本发明方法中,采用适用于烟草叶柄的组织包埋方法、冷冻切片方法,有效保证烟草叶柄切片均匀平整,维持结构完整;采用适用于植物组织透化前的预处理液,可有效酶解植物组织细胞壁并增加细胞膜通透性,使RNA更好释放;采用适用于烟草叶柄组织原位聚腺苷酸化的处理方法,可有效对切片样本中非编码RNA进行原位聚腺苷酸化,提高非编码RNA的捕获效率;采用适用于空间全转录组测序流程的可从cDNA文库中去除rRNA的方法,可有效通过湿实验端从文库中去除rRNA,避免由于捕获核糖体RNA量过高而导致其他RNA种类的测序深度降低,极大提高数据利用率。本发明具有广泛应用前景。

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