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公开(公告)号:CN108504677A
公开(公告)日:2018-09-07
申请号:CN201810183494.X
申请日:2018-03-06
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一个用于构建谷氨酸基因家族缺失结核分枝杆菌的重组TM4噬菌体文库及其应用。本发明首先提供了一个构建所述重组TM4噬菌体文库所需的重组穿梭载体文库,所述重组穿梭载体文库包括19个重组穿梭载体,分别插入了结核分枝杆菌谷氨酸家族19个成员基因两侧的同源臂序列。本发明构建的重组TM4噬菌体文库可以用于这些基因的敲除,验证这些基因是否是结核分枝杆菌的必需基因,用于构建基因突变替换菌株,用于构建基因敲除突变菌株,临床分离这些基因突变后对突变基因酶活性功能的研究,为结核分枝杆菌氨基酸代谢药物开发提供潜在靶点。
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公开(公告)号:CN118360226A
公开(公告)日:2024-07-19
申请号:CN202410552660.4
申请日:2024-05-07
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种用于表达结核分枝杆菌蛋白的耻垢分枝杆菌表达菌株,所述耻垢分枝杆菌表达菌株为敲除和/或沉默msmeg1583蛋白和/或msmeg1583基因的耻垢分枝杆菌,所述msmeg1583蛋白在NCBI数据库中的登录号为ABK71399.1,所述msmeg1583基因为编码所述msmeg1583蛋白的基因。利用上述耻垢分枝杆菌表达菌株结合分枝杆菌整合型质粒和/或游离型质粒,均能够产生结核分枝杆菌蛋白,并且能够得到表达量相对更高且纯化的蛋白纯度更高的结核分枝杆菌蛋白。
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公开(公告)号:CN108314740B
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN201810186457.4
申请日:2018-03-07
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种蛋白定向固定化修饰的细胞培养容器。本发明首先构建了一种GMCSF与IL4的融合蛋白,以及一种内壁包被有蛋白的细胞培养容器。该细胞培养容器的制备方法为:给蛋白加上His标签;对细胞培养容器的内壁进行硅烷化处理;对细胞培养容器的内壁进行AB‑NTA孵育修饰;加入NiCl2溶液使AB‑NTA与Ni偶联;加入含有His标签的蛋白,与AB‑NTA中的镍离子进行亲和,使其固定在细胞培养容器的内壁。使用本发明的细胞培养容器培养细胞的过程中,包被的蛋白不会在更换培养液时损失掉,因此无需多次重新加入,也保证了所用蛋白质量的一致性,使得整个培养过程的不可控因素减小,保证细胞培养及分化的效果,同时,具有可逆性、多次利用
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公开(公告)号:CN113493788B
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202110567959.3
申请日:2021-05-24
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种分枝杆菌启动子库及其应用,所述分枝杆菌启动子库,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其中,N代表A、T、C、G中任一种。本发明针对目前分枝杆菌启动子可选用少,以及因而以此为基础而开发的分子生物学研究工具(表达系统、诱导调控系统等)受限的问题,提供了一种新的分枝杆菌强启动子库。本发明解决了分枝杆菌启动子数目少、表达强度不理想等问题。本发明方法制备得到的分枝杆菌启动子库数目较多、表达强度较高、表达强度梯度范围较广。为开发新疫苗和新型分枝杆菌研究工具打基础。
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公开(公告)号:CN113493788A
公开(公告)日:2021-10-12
申请号:CN202110567959.3
申请日:2021-05-24
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种分枝杆菌启动子库及其应用,所述分枝杆菌启动子库,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其中,N代表A、T、C、G中任一种。本发明针对目前分枝杆菌启动子可选用少,以及因而以此为基础而开发的分子生物学研究工具(表达系统、诱导调控系统等)受限的问题,提供了一种新的分枝杆菌强启动子库。本发明解决了分枝杆菌启动子数目少、表达强度不理想等问题。本发明方法制备得到的分枝杆菌启动子库数目较多、表达强度较高、表达强度梯度范围较广。为开发新疫苗和新型分枝杆菌研究工具打基础。
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公开(公告)号:CN113416746A
公开(公告)日:2021-09-21
申请号:CN202110322375.X
申请日:2021-03-25
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
IPC: C12N15/74
Abstract: 本发明公开了一种aTc诱导表达结核分枝杆菌基因的整合型质粒,建立了一种整合型基于小分子aTc诱导的分枝杆菌表达系统,本诱导表达系统调控动态范围广、适用范围广。本发明调控的基因通过qRT‑PCR检测:Rv3875基因的表达量提高了51.68倍,MSMEG0129基因的表达量降低了6.53倍。该表达系统为分枝杆菌较难表达的蛋白如膜蛋白等提供了稳定的平台,以及对分枝杆菌不能敲除的必需基因提供了敲低的方法,从而对基因功能研究提供了思路。
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公开(公告)号:CN113121703A
公开(公告)日:2021-07-16
申请号:CN202110236741.X
申请日:2021-03-03
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种具有结核杆菌免疫原性的融合蛋白及其应用,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。其具有结核杆菌的免疫原性,相较于常用结核免疫原ESAT6该融合蛋白具有更明显的免疫原性,可作为结核免疫原蛋白初步筛选中的阳性标志物。从而为进一步结核病的早期诊断和新型疫苗的研制奠定了基础,具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN113121703B
公开(公告)日:2023-04-25
申请号:CN202110236741.X
申请日:2021-03-03
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种具有结核杆菌免疫原性的融合蛋白及其应用,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。其具有结核杆菌的免疫原性,相较于常用结核免疫原ESAT6该融合蛋白具有更明显的免疫原性,可作为结核免疫原蛋白初步筛选中的阳性标志物。从而为进一步结核病的早期诊断和新型疫苗的研制奠定了基础,具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN111303301B
公开(公告)日:2022-04-05
申请号:CN202010193338.9
申请日:2020-03-18
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种结核分枝杆菌免疫原蛋白ESAT6的制备方法。本发明提供了一种CFP10‑ESAT6重组融合蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该重组融合蛋白表达量高且为上清表达、活性好;纯化该重组融合蛋白后,经酶切、镍柱分离,洗脱,制备得到了结核分枝杆菌免疫原蛋白ESAT6;该方法制备得到的ESAT6蛋白的表达量高、抗原性好、活性好、纯度高,解决了ESAT6蛋白抗原性较差、可溶性不好、原核表达大部分为包涵体的问题,为结核病的早期诊断和新型疫苗的研制奠定了基础,具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN113416745A
公开(公告)日:2021-09-21
申请号:CN202110322361.8
申请日:2021-03-25
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种aTc诱导表达结核分枝杆菌基因的游离型质粒,建立了一种游离型基于小分子aTc诱导的分枝杆菌表达系统,本诱导表达系统调控动态范围广、适用范围广。本发明调控的基因通过qRT‑PCR检测:Rv3875基因的表达量提高了5.95倍,荧光检测强度eGFP基因的表达量提高了100%。该表达系统为分枝杆菌较难表达的蛋白如膜蛋白等提供了稳定的平台。
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