一种蛋白固定化修饰的细胞培养容器

    公开(公告)号:CN108314740B

    公开(公告)日:2024-02-27

    申请号:CN201810186457.4

    申请日:2018-03-07

    Abstract: 本发明公开了一种蛋白定向固定化修饰的细胞培养容器。本发明首先构建了一种GMCSF与IL4的融合蛋白,以及一种内壁包被有蛋白的细胞培养容器。该细胞培养容器的制备方法为:给蛋白加上His标签;对细胞培养容器的内壁进行硅烷化处理;对细胞培养容器的内壁进行AB‑NTA孵育修饰;加入NiCl2溶液使AB‑NTA与Ni偶联;加入含有His标签的蛋白,与AB‑NTA中的镍离子进行亲和,使其固定在细胞培养容器的内壁。使用本发明的细胞培养容器培养细胞的过程中,包被的蛋白不会在更换培养液时损失掉,因此无需多次重新加入,也保证了所用蛋白质量的一致性,使得整个培养过程的不可控因素减小,保证细胞培养及分化的效果,同时,具有可逆性、多次利用

    一种分枝杆菌启动子库及其应用

    公开(公告)号:CN113493788B

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202110567959.3

    申请日:2021-05-24

    Abstract: 本发明公开了一种分枝杆菌启动子库及其应用,所述分枝杆菌启动子库,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其中,N代表A、T、C、G中任一种。本发明针对目前分枝杆菌启动子可选用少,以及因而以此为基础而开发的分子生物学研究工具(表达系统、诱导调控系统等)受限的问题,提供了一种新的分枝杆菌强启动子库。本发明解决了分枝杆菌启动子数目少、表达强度不理想等问题。本发明方法制备得到的分枝杆菌启动子库数目较多、表达强度较高、表达强度梯度范围较广。为开发新疫苗和新型分枝杆菌研究工具打基础。

    一种分枝杆菌启动子库及其应用

    公开(公告)号:CN113493788A

    公开(公告)日:2021-10-12

    申请号:CN202110567959.3

    申请日:2021-05-24

    Abstract: 本发明公开了一种分枝杆菌启动子库及其应用,所述分枝杆菌启动子库,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其中,N代表A、T、C、G中任一种。本发明针对目前分枝杆菌启动子可选用少,以及因而以此为基础而开发的分子生物学研究工具(表达系统、诱导调控系统等)受限的问题,提供了一种新的分枝杆菌强启动子库。本发明解决了分枝杆菌启动子数目少、表达强度不理想等问题。本发明方法制备得到的分枝杆菌启动子库数目较多、表达强度较高、表达强度梯度范围较广。为开发新疫苗和新型分枝杆菌研究工具打基础。

    一种aTc诱导表达结核分枝杆菌基因的整合型质粒

    公开(公告)号:CN113416746A

    公开(公告)日:2021-09-21

    申请号:CN202110322375.X

    申请日:2021-03-25

    Abstract: 本发明公开了一种aTc诱导表达结核分枝杆菌基因的整合型质粒,建立了一种整合型基于小分子aTc诱导的分枝杆菌表达系统,本诱导表达系统调控动态范围广、适用范围广。本发明调控的基因通过qRT‑PCR检测:Rv3875基因的表达量提高了51.68倍,MSMEG0129基因的表达量降低了6.53倍。该表达系统为分枝杆菌较难表达的蛋白如膜蛋白等提供了稳定的平台,以及对分枝杆菌不能敲除的必需基因提供了敲低的方法,从而对基因功能研究提供了思路。

    一种结核分枝杆菌免疫原蛋白ESAT6的制备方法

    公开(公告)号:CN111303301B

    公开(公告)日:2022-04-05

    申请号:CN202010193338.9

    申请日:2020-03-18

    Abstract: 本发明公开了一种结核分枝杆菌免疫原蛋白ESAT6的制备方法。本发明提供了一种CFP10‑ESAT6重组融合蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该重组融合蛋白表达量高且为上清表达、活性好;纯化该重组融合蛋白后,经酶切、镍柱分离,洗脱,制备得到了结核分枝杆菌免疫原蛋白ESAT6;该方法制备得到的ESAT6蛋白的表达量高、抗原性好、活性好、纯度高,解决了ESAT6蛋白抗原性较差、可溶性不好、原核表达大部分为包涵体的问题,为结核病的早期诊断和新型疫苗的研制奠定了基础,具有广泛的应用前景。

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