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公开(公告)号：CN108314740B
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN201810186457.4
申请日：2018-03-07
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种蛋白定向固定化修饰的细胞培养容器。本发明首先构建了一种GMCSF与IL4的融合蛋白，以及一种内壁包被有蛋白的细胞培养容器。该细胞培养容器的制备方法为：给蛋白加上His标签；对细胞培养容器的内壁进行硅烷化处理；对细胞培养容器的内壁进行AB‑NTA孵育修饰；加入NiCl2溶液使AB‑NTA与Ni偶联；加入含有His标签的蛋白，与AB‑NTA中的镍离子进行亲和，使其固定在细胞培养容器的内壁。使用本发明的细胞培养容器培养细胞的过程中，包被的蛋白不会在更换培养液时损失掉，因此无需多次重新加入，也保证了所用蛋白质量的一致性，使得整个培养过程的不可控因素减小，保证细胞培养及分化的效果，同时，具有可逆性、多次利用
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公开(公告)号：CN108384739B
公开(公告)日：2020-03-27
申请号：CN201810023134.3
申请日：2018-01-10
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种产烟酸的整合型重组耻垢分枝杆菌及其构建方法。本发明要求保护一种产烟酸的重组耻垢分枝杆菌，其特征在于，所述重组耻垢分枝杆菌含有重组整合型质粒，其中重组整合型质粒含有nudC基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。通过本发明制备得到的工程菌可以一步直接获得烟酸，而不依赖于添加3‑氰基吡啶，不仅避免了现有在烟酸化学合成过程中的各种缺点，而且生产条件简单，无污染，简便易行，易放大，成本低，适合于大规模工业化生产应用，有很大的推广应用的价值。
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公开(公告)号：CN108330094B
公开(公告)日：2020-04-21
申请号：CN201810022610.X
申请日：2018-01-10
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种产烟酸的游离型重组耻垢分枝杆菌及其构建方法。本发明要求保护一种产烟酸的重组耻垢分枝杆菌，所述重组耻垢分枝杆菌含有重组游离型质粒，其中重组游离型质粒含有nudC基因，nudC基因核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。通过本发明制备得到的工程菌可以一步直接获得烟酸，而不依赖于添加3‑氰基吡啶，不仅避免了现有烟酸化学合成过程中的各种缺点，而且生产条件简单，无污染，简便易行，易放大，成本低，适合于大规模工业化生产应用，有很大的推广应用的价值。
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公开(公告)号：CN109385439A
公开(公告)日：2019-02-26
申请号：CN201811088220.9
申请日：2018-09-18
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一个用于构建NADH脱氢酶基因家族缺失结核分枝杆菌的重组TM4噬菌体文库及其应用。本发明首先提供了一个构建所述重组TM4噬菌体文库所需的重组穿梭载体文库，所述重组穿梭载体文库包括16个重组穿梭载体，分别插入了结核分枝杆菌NADH脱氢酶基因家族16个成员基因两侧的同源臂序列。本发明为了方便NADH脱氢酶基因功能研究及疫苗开发，构建了一个同源重组噬菌体文库，该文库可以用于结核分枝杆菌NADH脱氢酶基因敲除，验证基因是否必需基因，构建NADH脱氢酶敲除菌株，用于BCG疫苗优化改良。利用本发明所述噬菌体文库进行敲除时，敲除特异性好，阳性率高。
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公开(公告)号：CN108330094A
公开(公告)日：2018-07-27
申请号：CN201810022610.X
申请日：2018-01-10
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种产烟酸的游离型重组耻垢分枝杆菌及其构建方法。本发明要求保护一种产烟酸的重组耻垢分枝杆菌，所述重组耻垢分枝杆菌含有重组游离型质粒，其中重组游离型质粒含有nudC基因，nudC基因核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。通过本发明制备得到的工程菌可以一步直接获得烟酸，而不依赖于添加3-氰基吡啶，不仅避免了现有烟酸化学合成过程中的各种缺点，而且生产条件简单，无污染，简便易行，易放大，成本低，适合于大规模工业化生产应用，有很大的推广应用的价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108359666B
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN201810023635.1
申请日：2018-01-10
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种nudC基因及其在制备烟酸方面的应用。所述nudC基因的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，其编码蛋白nudC蛋白的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。利用本发明发现的nudC基因构建的工程菌可以一步直接获得烟酸，不仅避免了现有烟酸化学合成过程中的各种缺点，而且生产条件简单，无污染，简便易行，易放大，成本低，适合于大规模工业化生产应用，有很大的推广价值。
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公开(公告)号：CN108504677A
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201810183494.X
申请日：2018-03-06
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一个用于构建谷氨酸基因家族缺失结核分枝杆菌的重组TM4噬菌体文库及其应用。本发明首先提供了一个构建所述重组TM4噬菌体文库所需的重组穿梭载体文库，所述重组穿梭载体文库包括19个重组穿梭载体，分别插入了结核分枝杆菌谷氨酸家族19个成员基因两侧的同源臂序列。本发明构建的重组TM4噬菌体文库可以用于这些基因的敲除，验证这些基因是否是结核分枝杆菌的必需基因，用于构建基因突变替换菌株，用于构建基因敲除突变菌株，临床分离这些基因突变后对突变基因酶活性功能的研究，为结核分枝杆菌氨基酸代谢药物开发提供潜在靶点。
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公开(公告)号：CN108384739A
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201810023134.3
申请日：2018-01-10
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种产烟酸的整合型重组耻垢分枝杆菌及其构建方法。本发明要求保护一种产烟酸的重组耻垢分枝杆菌，其特征在于，所述重组耻垢分枝杆菌含有重组整合型质粒，其中重组整合型质粒含有nudC基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。通过本发明制备得到的工程菌可以一步直接获得烟酸，而不依赖于添加3-氰基吡啶，不仅避免了现有在烟酸化学合成过程中的各种缺点，而且生产条件简单，无污染，简便易行，易放大，成本低，适合于大规模工业化生产应用，有很大的推广应用的价值。
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公开(公告)号：CN108191979B
公开(公告)日：2021-01-01
申请号：CN201711296510.8
申请日：2017-12-08
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种利用荧光互补检测人趋化因子生物学活性的方法。一种用于检测人趋化因子的生物学活性的融合蛋白组合，包括蛋白CXCR2‑VC和蛋白β‑Arrestin2‑VN，蛋白CXCR2‑VC的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，蛋白β‑Arrestin2‑VN的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过优化黄色荧光蛋白Venus的拆分位点和linker序列的选择，成功的构建了用于检测人趋化因子的生物学活性的融合蛋白组合。通过两个重组载体分别转化，克服了两个重组载体共转化本底荧光较强无法达到检测目的的问题。本发明构建的融合蛋白组进行趋化因子的活性检测，简单易行，步骤简单，检测效果好，结果可靠。
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公开(公告)号：CN108504677B
公开(公告)日：2020-05-12
申请号：CN201810183494.X
申请日：2018-03-06
Applicant: 上海晶诺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一个用于构建谷氨酸基因家族缺失结核分枝杆菌的重组TM4噬菌体文库及其应用。本发明首先提供了一个构建所述重组TM4噬菌体文库所需的重组穿梭载体文库，所述重组穿梭载体文库包括19个重组穿梭载体，分别插入了结核分枝杆菌谷氨酸家族19个成员基因两侧的同源臂序列。本发明构建的重组TM4噬菌体文库可以用于这些基因的敲除，验证这些基因是否是结核分枝杆菌的必需基因，用于构建基因突变替换菌株，用于构建基因敲除突变菌株，临床分离这些基因突变后对突变基因酶活性功能的研究，为结核分枝杆菌氨基酸代谢药物开发提供潜在靶点。
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