公开(公告)号：CN106092987A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610400672.0

申请日：2016-06-08

Applicant: 上海应用技术学院

Inventor： 龚钢明 ,  杨树丽 ,  魏晓聪

IPC: G01N21/64

CPC classification number: G01N21/6428

Abstract: 本发明提供了一种测定乙醇脱氢酶酶活力的方法，包括一个配置缓冲体系的步骤，所述的缓冲体系为甘氨酸‑氢氧化钠缓冲液；一个配置一定浓度的酰胺腺嘌呤二核苷酸溶液，并测定其荧光值，选取线性范围的步骤；一个制备酶液的步骤，将培养好的细胞离心收集菌体，加磷酸盐缓冲液制成菌悬液，经超声细胞粉碎仪破碎后离心收集上清液，上清液即为待测酶液；将酶液与反应体系分别在30‑37℃，温育3‑5min，混合后，在3‑5min内，以320nm‑380nm，激发波长和440nm‑480nm发射波长下，测定测反应体系中每分钟的荧光变化值，计算酶活力，酶活力单位（U/ml）=△荧光值/分钟。本发明提高了酶活测定的灵敏度。

公开(公告)号：CN104792760B

公开(公告)日：2018-04-06

申请号：CN201510214484.4

申请日：2015-04-29

Applicant: 上海应用技术学院

Inventor： 龚钢明 ,  魏晓聪 ,  吴范宏

IPC: G01N21/64

Abstract: 本发明公开一种利用荧光分光光度计对乙醛脱氢酶活性进行快速检测的方法，即首先用Tris‑HCl缓冲液将辅酶I配置成不同浓度梯度的辅酶I溶液，检测不同浓度的辅酶I溶液的荧光值，制作辅酶I浓度与荧光值相对应的标准曲线，将由粗乙醛脱氢酶酶液、pH7.0‑9.0，0.1 mol/L Tris‑HCl缓冲液等形成的反应体系控制温度为25‑40℃保持10‑30min后，在激发波长为320nm‑380nm，发射波长为440nm‑480nm下测定反应体系中粗乙醛脱氢酶酶液酶液每分钟的荧光变化值，最后依公式酶活力单位=△荧光值/3来计算乙的醛脱氢酶酶活力单位。该测定方法操作简便，灵敏度高。

公开(公告)号：CN104792760A

公开(公告)日：2015-07-22

申请号：CN201510214484.4

申请日：2015-04-29

Applicant: 上海应用技术学院

Inventor： 龚钢明 ,  魏晓聪 ,  吴范宏

IPC: G01N21/64

Abstract: 本发明公开一种利用荧光分光光度计对乙醛脱氢酶活性进行快速检测的方法，即首先用Tris-HCl缓冲液将辅酶I配置成不同浓度梯度的辅酶I溶液，检测不同浓度的辅酶I溶液的荧光值，制作辅酶I浓度与荧光值相对应的标准曲线，将由粗乙醛脱氢酶酶液、pH7.0-9.0，0.1 mol/L Tris-HCl缓冲液等形成的反应体系控制温度为25-40℃保持10-30min后，在激发波长为320nm-380nm，发射波长为440nm-480nm下测定反应体系中粗乙醛脱氢酶酶液酶液每分钟的荧光变化值，最后依公式酶活力单位=△荧光值/3来计算乙的醛脱氢酶酶活力单位。该测定方法操作简便，灵敏度高。