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公开(公告)号：CN102495011A
公开(公告)日：2012-06-13
申请号：CN201110376853.1
申请日：2011-11-24
Applicant: 上海应用技术学院
IPC: G01N21/31
Abstract: 本发明公开了一种细菌亚硝酸还原酶活性测定方法，包括标准曲线的制作、细菌亚硝酸盐还原酶的提取、测定过程中所用的反应混合液的配制、细菌亚硝酸盐还原酶促反应及细菌亚硝酸盐还原酶活性的测定，即通过多孔板和酶标仪测定反应前、后亚硝酸盐溶液吸光值并根据标准曲线可测得酶促反应前、后NaNO2含量，再通过酶活力计算公式计算待测细菌亚硝酸盐还原酶的活力。本发明的一种细菌亚硝酸还原酶活性测定方法，在酶促反应后采用多孔板和酶标仪分析方法，即节省分析试剂的用量，同时节省人力和测试时间，大大提高了检测效率。
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公开(公告)号：CN102495011B
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201110376853.1
申请日：2011-11-24
Applicant: 上海应用技术学院
IPC: G01N21/31
Abstract: 本发明公开了一种细菌亚硝酸还原酶活性测定方法，包括标准曲线的制作、细菌亚硝酸盐还原酶的提取、测定过程中所用的反应混合液的配制、细菌亚硝酸盐还原酶促反应及细菌亚硝酸盐还原酶活性的测定，即通过多孔板和酶标仪测定反应前、后亚硝酸盐溶液吸光值并根据标准曲线可测得酶促反应前、后NaNO2含量，再通过酶活力计算公式计算待测细菌亚硝酸盐还原酶的活力。本发明的一种细菌亚硝酸还原酶活性测定方法，在酶促反应后采用多孔板和酶标仪分析方法，即节省分析试剂的用量，同时节省人力和测试时间，大大提高了检测效率。
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公开(公告)号：CN102559715A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201210037774.2
申请日：2012-02-20
Applicant: 上海应用技术学院
IPC: C12N15/53 , C12N15/63 , C12N15/70 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12N9/06 , C12R1/25 , C12R1/19 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶基因，含有该基因的重组载体、用该载体转化的宿主以及利用该转化体生产该基因的表达产物及其应用。即以金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌、布鲁氏杆菌;大肠杆菌的亚硝酸盐还原酶基因为参考，进行引物设计，用植物乳杆菌提取的基因组DNA为模板，通过PCR技术扩增植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶的基因片段，将该片的连接到pET-32a（+）表达载体中，再转入大肠杆菌BL21（DE3）细胞中，经IPTG诱导后，进行植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶(NiRL)蛋白表达，从而获得植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶蛋白。
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公开(公告)号：CN102558353A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201110407260.7
申请日：2011-12-09
Applicant: 上海应用技术学院
Abstract: 一种大肠杆菌NrfA基因表达蛋白的多克隆抗体制备方法：以大肠杆菌基因组DNA为模板，PCR扩增得到NrfA基因编码区，构建pET-28a（+）-NrfA表达载体，转入大肠杆菌BL21（DE3）后，经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白；再免疫新西兰雄兔，制备多克隆抗体；免疫获得的多克隆抗体用ELISA检测，其效价为1：204900，经Westernblotting分析，抗体的特异性较好。该多克隆抗体可用于研究其他微生物中亚硝酸盐还原酶与大肠杆菌亚硝酸盐还原酶之间的相关结构与功能。也为进一步深入研究大肠杆菌亚硝酸盐还原酶的作用机理与活性调节提供基础。
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