公开(公告)号：CN101962650A

公开(公告)日：2011-02-02

申请号：CN201010263570.1

申请日：2010-08-26

申请人： 上海师范大学

发明人： 开国银 ,  许辉 ,  廖攀 ,  周伟 ,  张林

IPC分类号： C12N15/54 ,  C12N15/82 ,  C12Q1/68 ,  G01N30/89 ,  G01N21/31 ,  A01H5/00 ,  A01H5/06

摘要： 本发明属于基因工程技术，一种转SmGGPPS基因提高丹参毛状根丹参酮含量的方法。现有技术丹参生长周期长；丹参酮产量低，无法满足人类医疗对丹参酮的需求。本发明从丹参中克隆SmGGPPS基因的编码序列，并构建其植物高效表达载体，遗传转化丹参叶片获得转SmGGPPS基因的丹参毛状根，半定量RT-PCR分析SmGGPPS基因在丹参转基因毛状根中的表达情况，高效液相色谱法测定丹参转基因毛状根中包括隐丹参酮，丹参酮Ⅰ，丹参酮ⅡA的总丹参酮含量，DPPH清除自由基法测定丹参转基因毛状根中丹参酮的抗氧化活性。本发明的优点是：显著提高丹参毛状根中总丹参酮含量；发明效果可靠；丹参酮成本低；生产过程无环境污染。

公开(公告)号：CN101942467A

公开(公告)日：2011-01-12

申请号：CN201010264203.3

申请日：2010-08-27

申请人： 上海师范大学

发明人： 开国银 ,  许辉 ,  廖攀 ,  周伟 ,  张林

IPC分类号： C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/82 ,  A01H5/06 ,  C12Q1/68 ,  G01N30/89 ,  G01N21/31

摘要： 本发明属于提高中药材丹参中丹参酮含量的方法，双基因转化提高丹参毛状根丹参酮含量的方法。丹参酮类物质具有抗肿瘤，抗菌消炎，抗氧化，抗动脉粥样硬化等多种药理活性，但是丹参中丹参酮含量低，无法满足医疗需要。本发明从丹参中克隆SmHMGR和SmGGPPS基因，构建含SmHMGR和SmGGPPS基因的表达载体，遗传转化丹参叶片获得转SmHMGR和SmGGPPS基因的丹参毛状根，半定量RT-PCR分析、高效液相色谱法测定丹参酮含量，DPPH清除自由基法测定转基因毛状根中丹参酮的抗氧化活性。本发明优点是：转基因丹参毛状根中丹参酮含量显著提高；丹参酮成本低。生产过程无环境污染。

公开(公告)号：CN101942467B

公开(公告)日：2012-12-19

申请号：CN201010264203.3

申请日：2010-08-27

申请人： 上海师范大学

发明人： 开国银 ,  许辉 ,  廖攀 ,  周伟 ,  张林

IPC分类号： C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/82 ,  A01H5/06 ,  C12Q1/68 ,  G01N30/89 ,  G01N21/31

摘要： 本发明属于提高中药材丹参中丹参酮含量的方法，双基因转化提高丹参毛状根丹参酮含量的方法。丹参酮类物质具有抗肿瘤，抗菌消炎，抗氧化，抗动脉粥样硬化等多种药理活性，但是丹参中丹参酮含量低，无法满足医疗需要。本发明从丹参中克隆SmHMGR和SmGGPPS基因，构建含SmHMGR和SmGGPPS基因的表达载体，遗传转化丹参叶片获得转SmHMGR和SmGGPPS基因的丹参毛状根，半定量RT-PCR分析、高效液相色谱法测定丹参酮含量，DPPH清除自由基法测定转基因毛状根中丹参酮的抗氧化活性。本发明优点是：转基因丹参毛状根中丹参酮含量显著提高；丹参酮成本低。生产过程无环境污染。

公开(公告)号：CN101948855A

公开(公告)日：2011-01-19

申请号：CN201010263299.1

申请日：2010-08-26

申请人： 上海师范大学

发明人： 开国银 ,  许辉 ,  廖攀 ,  张倩飞 ,  黄志伟

IPC分类号： C12N15/60 ,  C12N15/82 ,  C12Q1/68 ,  G01N33/53 ,  G01N30/02 ,  A01H5/00

摘要： 本发明涉及基因工程技术，一种提高水稻种子γ-氨基丁酸含量的方法。天然的水稻种子中γ-氨基丁酸含量很低，无法满足人类治疗和预防高血压疾病的保健要求。本发明包括以下步骤：从水稻中克隆出5.3kbGt1启动子序列和谷氨酸脱羧酶GAD2ΔC30序列，构建含5.3kbGt1启动子序列和GAD2ΔC30序列的植物表达载体，遗传转化水稻获得转基因水稻植株，PCR检测目的基因5.3kbGt1启动子序列和GAD2ΔC30序列的整合，RT-PCR分析检测转基因水稻种子中GAD2ΔC30蛋白的表达，测定水稻种子中γ-氨基丁酸含量。本发明方法可显著提高水稻种子中γ-氨基丁酸含量，具有遗传功能，有利于保护人民的健康。

公开(公告)号：CN101475947A

公开(公告)日：2009-07-08

申请号：CN200910045446.5

申请日：2009-01-16

申请人： 上海师范大学

发明人： 开国银 ,  王敬 ,  廖攀 ,  张林 ,  许辉

IPC分类号： C12N15/52 ,  C12N9/00 ,  C12N15/63 ,  C12N15/82 ,  C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  C12N5/10 ,  A01H5/00

摘要： 本发明公开了一种丹参1－脱氧木酮糖－5－磷酸合成酶II基因及其编码的蛋白质和应用，填补了从我国传统中药材丹参中分离克隆出1－脱氧木酮糖－5－磷酸合成酶II基因的空白。本发明所提供的1－脱氧木酮糖－5－磷酸合成酶II基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个核苷酸的同源序列或其等位基因及其衍生的核苷酸序列，其编码的蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个氨基酸的同源序列。本发明的丹参1－脱氧木酮糖－5－磷酸合成酶II基因对于通过基因过量表达技术来提高丹参中丹参酮的含量具有显著作用。

公开(公告)号：CN101962650B

公开(公告)日：2013-05-29

申请号：CN201010263570.1

申请日：2010-08-26

申请人： 上海师范大学

发明人： 开国银 ,  许辉 ,  廖攀 ,  周伟 ,  张林

IPC分类号： C12N15/54 ,  C12N15/82 ,  C12Q1/68 ,  G01N30/89 ,  G01N21/31 ,  A01H5/00 ,  A01H5/06

摘要： 本发明属于基因工程技术，一种转SmGGPPS基因提高丹参毛状根丹参酮含量的方法。现有技术丹参生长周期长；丹参酮产量低，无法满足人类医疗对丹参酮的需求。本发明从丹参中克隆SmGGPPS基因的编码序列，并构建其植物高效表达载体，遗传转化丹参叶片获得转SmGGPPS基因的丹参毛状根，半定量RT-PCR分析SmGGPPS基因在丹参转基因毛状根中的表达情况，高效液相色谱法测定丹参转基因毛状根中包括隐丹参酮，丹参酮Ⅰ，丹参酮ⅡA的总丹参酮含量，DPPH清除自由基法测定丹参转基因毛状根中丹参酮的抗氧化活性。本发明的优点是：显著提高丹参毛状根中总丹参酮含量；发明效果可靠；丹参酮成本低；生产过程无环境污染。

公开(公告)号：CN101475947B

公开(公告)日：2011-02-09

申请号：CN200910045446.5

申请日：2009-01-16

申请人： 上海师范大学

发明人： 开国银 ,  王敬 ,  廖攀 ,  张林 ,  许辉

IPC分类号： C12N15/52 ,  C12N9/00 ,  C12N15/63 ,  C12N15/82 ,  C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  C12N5/10 ,  A01H5/00

摘要： 本发明公开了一种丹参1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶Ⅱ基因及其编码的蛋白质和应用，填补了从我国传统中药材丹参中分离克隆出1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶Ⅱ基因的空白。本发明所提供的1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶Ⅱ基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所述，其编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.2所述。本发明的丹参1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶Ⅱ基因对于通过基因过量表达技术来提高丹参中丹参酮的含量具有显著作用。