-
公开(公告)号：CN102191220B
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201010124579.4
申请日：2010-03-12
Applicant: 上海市第一人民医院
IPC: C12N5/079
Abstract: 本发明属于细胞生物学领域，涉及一种从利用脂肪组织分离、纯化许旺细胞的方法及其应用。该方法步骤包括：(1)无菌情况下剥离脂肪组织，切碎并清洗；(2)用3-20倍组织量的消化酶溶液消化脂肪组织碎块；所述的消化酶是酵素酶、胶原酶NB4或者两者的混合液；(3)将得到的混悬液用吸管反复吹打3～5分钟；(4)对解离的细胞在600-1500g离心3-10分钟，得到细胞团块；(5)用许旺细胞培养液重悬步骤(4)得到的细胞接种于纤维粘连蛋白包被的培养皿。许旺细胞的纯度就可以接近95％。利用本发明能够低成本、高效率的获得大量高纯度的优质许旺细胞。
-
公开(公告)号：CN102021140B
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN200910195923.6
申请日：2009-09-18
Applicant: 上海市第一人民医院
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明属于细胞生物学领域，涉及一种分离、纯化许旺细胞的方法。该方法依次由下述步骤组成：首先，无菌情况下取神经段，去除神经外膜；然后用复合胶原酶NB4和dispase混合消化酶溶液消化神经束，弃溶液；再置于胰蛋白酶和EDTA中作用5～10分钟，得到去除神经束膜的神经纤维；随后将得到的神经纤维置于混合酶溶液中，振荡得到细胞混悬液；最后离心，重悬。利用本发明能够低成本、高效率的获得大量高纯度的许旺细胞，为损伤神经修复提供丰富优质许旺细胞。
-
公开(公告)号：CN102191217A
公开(公告)日：2011-09-21
申请号：CN201010124593.4
申请日：2010-03-12
Applicant: 上海市第一人民医院
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明属于细胞生物学领域，涉及一种诱导脐带间充质干细胞分化为类神经细胞的方法。该方法将脐带间充质干细胞与许旺细胞用0.4μm孔径的Transwell小室隔离共培养，所用培养液为许旺细胞培养液；每三天全量或者半量换一次液，培养两周即可得到类神经细胞。本发明应用隔离共培养的方法，复合胶原酶和透明质酸酶混合后消化脐带可以大量分离脐带间充质细胞，经传代至第3代就可以获得高纯度的间充质干细胞。使脐带间充质干细胞诱导分化为了神经细胞，细胞分化率达到70％以上。其细胞表达NF-200，nestin，β-III-tubulin等神经细胞特异性标记率达到70～80％。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102021144A
公开(公告)日：2011-04-20
申请号：CN200910195922.1
申请日：2009-09-18
Applicant: 上海市第一人民医院
IPC: C12N5/08
Abstract: 本发明属于细胞生物学领域，涉及一种快速充分获得脐带间充质干细胞的方法。本发明将在无菌情况下获得的脐带去除动、静脉，制成组织碎块，再加入含有青霉素和链霉素的磷酸盐缓冲液清洗，离心弃上清；随后用胶原酶NB4和透明质酸酶消化脐带碎块，并在乙二胺四乙酸磷酸盐溶液中置于摇床振荡；用100-200目滤网过滤，收集滤过液；最后以600g离心5-10分钟，弃去上清液，用DMEM培养基清洗2-3次，即获得脐带间充质干细胞。本发明可以在短时间内获得大量脐带间充质干细胞。且经过实验证实，获得的脐带干细胞表达干细胞的特异性标记，能够向脂肪、骨、软骨等诱导分化。
-
公开(公告)号：CN102191216A
公开(公告)日：2011-09-21
申请号：CN201010123962.8
申请日：2010-03-11
Applicant: 上海市第一人民医院
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明属于细胞生物学领域，涉及一种诱导人脐带间充质干细胞分化为类许旺细胞的方法。其包括步骤为：(1)将脐带间充质干细胞培养至亚融合状态后，弃去旧的培养液，加入含有1mM β-巯基乙醇培养液诱导过夜；(2)弃去诱导液，用DMEM培养基清洗，加入全反式维甲酸诱导60-84小时；(3)弃去诱导液，用DMEM培养基清洗，加入含有5ng/ml-6ng/ml血小板源生长因子、9-10ng/ml碱性成纤维细胞生长因子、13μM-15μM福司柯林以及250-260ng/ml胶质细胞生长因子或200-210ng/ml神经生长因子的复合诱导液，诱导10-16天，每72小时换一次液。本发明的方法诱导率可达到90％以上。
-
公开(公告)号：CN102191220A
公开(公告)日：2011-09-21
申请号：CN201010124579.4
申请日：2010-03-12
Applicant: 上海市第一人民医院
IPC: C12N5/079
Abstract: 本发明属于细胞生物学领域，涉及一种从利用脂肪组织分离、纯化许旺细胞的方法及其应用。该方法步骤包括：(1)无菌情况下剥离脂肪组织，切碎并清洗；(2)用3-20倍组织量的消化酶溶液消化脂肪组织碎块；所述的消化酶是酵素酶、胶原酶NB4或者两者的混合液；(3)将得到的混悬液用吸管反复吹打3～5分钟；(4)对解离的细胞在600-1500g离心3-10分钟，得到细胞团块；(5)用许旺细胞培养液重悬步骤(4)得到的细胞接种于纤维粘连蛋白包被的培养皿。许旺细胞的纯度就可以接近95％。利用本发明能够低成本、高效率的获得大量高纯度的优质许旺细胞。
-
公开(公告)号：CN102021141A
公开(公告)日：2011-04-20
申请号：CN200910195924.0
申请日：2009-09-18
Applicant: 上海市第一人民医院
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明属于细胞生物学领域，涉及一种利用胶原酶和酵素酶分离、纯化许旺细胞的方法及其应用。首先，在无菌情况下剥离神经段的神经外膜，切碎、清洗，离心弃上清；然后用酵素酶、胶原酶NB4或者两者的混合液消化神经碎块30～60分钟，反复吹打，然后离心、弃上清，得到细胞团块；最后用许旺细胞培养液重悬，即可。本发明使用复合胶原酶和酵素酶分离纯化许旺细胞，经过第一次纯化后，许旺细胞的纯度就可达到98％。再次纯化扩增后，许旺细胞的纯度就可以接近100％。利用本发明能够低成本、高效率的获得大量高纯度的许旺细胞，为损伤神经修复提供丰富优质许旺细胞。
-
公开(公告)号：CN102021140A
公开(公告)日：2011-04-20
申请号：CN200910195923.6
申请日：2009-09-18
Applicant: 上海市第一人民医院
IPC: C12N5/06
Abstract: 本发明属于细胞生物学领域，涉及一种分离、纯化许旺细胞的方法。该方法依次由下述步骤组成：首先，无菌情况下取神经段，去除神经外膜；然后用复合胶原酶NB4和dispase混合消化酶溶液消化神经束，弃溶液；再置于胰蛋白酶和EDTA中作用5～10分钟，得到去除神经束膜的神经纤维；随后将得到的神经纤维置于混合酶溶液中，振荡得到细胞混悬液；最后离心，重悬。利用本发明能够低成本、高效率的获得大量高纯度的许旺细胞，为损伤神经修复提供丰富优质许旺细胞。
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
8
records
(took 0.02 seconds)
