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公开(公告)号：CN115896162A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202211576356.0
申请日：2022-12-09
申请人： 上海市农业科学院
发明人： 王波 , 姚泉洪 , 熊爱生 , 彭日荷 , 田永生 , 王雅慧 , 邓元杰 , 许晶 , 高建杰 , 李振军 , 韩红娟 , 王丽娟 , 王宇 , 邓永东 , 张文慧 , 钱岑 , 左志豪
摘要： 本发明公开了一种通过基因工程技术创制可用于合成甜菜苷的胡萝卜愈伤组织的方法。本发明对来源于米曲霉的melO基因、红甜菜的DODA1和CYP76AD1基因进行了结构优化，其优化后核苷酸序列分别如SEQ ID No 1、SEQ ID No 2和SEQ ID No 3所示。并为每个功能基因都连接上独立的35S启动子和NOS终止子，用于构建植物多基因表达载体。通过农杆菌介导的遗传转化，实现在胡萝卜愈伤组织中无需额外添加任何底物合成甜菜苷。通过对阳性愈伤组织的悬浮培养，甜菜苷的总量从最初的43.9μg经过4周达到465.9μg，因此本发明所述方法可用于发酵培养生产甜菜苷。
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公开(公告)号：CN115820689A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211529242.0
申请日：2022-11-30
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 本发明提供了一种多基因串联法提高蔬菜中NMN含量的方法及其应用，涉及生物基因工程技术领域。本发明提供了将AgPRS3基因和Nampt基因结合，经密码子优化后分别构建基因表达盒，而后将两个基因表达盒以串联的方式连接入植物表达载体中，获得重组植物转化载体；利用所述重组植物转化载体转化蔬菜作物，可显著提高蔬菜中NMN含量。经转化后获得的转基因蔬菜合成NMN的能力显著提高，在转基因蔬菜中检测出了NMN的含量是野生型蔬菜的5.68倍。转基因蔬菜既可以作为生产NMN的原材料，还大大增加了蔬菜附加价值，具有重要的生产应用价值。
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公开(公告)号：CN112322640B
公开(公告)日：2022-11-22
申请号：CN202011238798.5
申请日：2020-11-09
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 一种在大肠杆菌中表达并降解4‑氟苯酚的基因组及其应用，利用合成生物学技术将节杆菌的4‑氟苯酚降解系统中各个催化元件进行设计、改造，获得源于节杆菌的、按大肠杆菌表达模式优化后的fpdA2S基因、fpdBS基因、fpdCS基因和fpdDS基因，将该四段基因分别与T7启动子和终止子连接，分别构建基因表达盒，并连接入大肠杆菌表达载体，获得降解4‑氟苯酚的多基因大肠杆菌转化载体。本发明将源于节杆菌的完整异源分解代谢途径引入到大肠杆菌中，从而赋予大肠杆菌原本不具备的降解和耐受4‑氟苯酚的功能，提高细菌对4‑氟苯酚的降解效率，丰富工业应用降解菌资源。
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公开(公告)号：CN109486841B
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN201811326763.X
申请日：2018-11-08
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 本发明公开了一种利用稻麦种子生产植酸酶、β‑葡聚糖酶和木聚糖酶方法，具体过程是：利用种子特异表达启动子控制植酸酶、β‑葡聚糖酶和木聚糖酶基因，构建三种重要饲料用酶的种子特异表达单元，将三种重要饲料用酶的种子特异表达单元构建到一个植物表达载体，然后通过农杆菌介导转化到水稻和大麦中，实现在稻麦种子中大量表达并积累上述三种饲料用酶。利用本发明，可以将生产的稻麦种子直接加工成饲料，不需再额外增加颗粒饲料用酶。
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公开(公告)号：CN111662892B
公开(公告)日：2022-07-01
申请号：CN202010742556.3
申请日：2020-07-29
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 本发明公开了一种优化后适用于大肠杆菌表达的β‑酮己二酸代谢相关的三个基因及其应用。每个基因都由独立的T7启动子和终止子控制，其核苷酸序列分别如SEQ ID No 1、SEQ ID No 2和SEQ ID No 3所示，其编码的蛋白质的氨基酸序列分别如SEQ ID No 4、SEQ ID No 5和SEQ ID No 6所示。本发明优化合成的基因能够在大肠杆菌中成功表达，工程菌能够将β‑酮己二酸完全降解且以β‑酮己二酸为碳源生长，优化后基因可用于构建有机污染修复工程生物。
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公开(公告)号：CN114591999A
公开(公告)日：2022-06-07
申请号：CN202011406164.6
申请日：2020-12-03
申请人： 上海市农业科学院
摘要： RibAS、RibBS、RibGS和RibHS基因在水稻种子中提高VB2含量的应用及方法，将枯草杆菌中的RibA、RibB、RibG和RibH基因序列分别进行优化，获得RibAS、RibBS、RibGS和RibHS四个基因序列，之后分别与水稻胚乳特异储存蛋白GluB‑1基因启动子和终止子融合，构建基因表达盒，再连接入植物表达载体，获得含RibAS、RibBS、RibGS和RibHS四基因表达盒的植物多基因转化载体，转化至水稻，获得转基因水稻，其胚乳中VB2大量含量提高，与野生型水稻相比，VB2含量提高了大约3.5倍，既可以直接用于食用，也可以作为生产VB2的原材料种子，对于新型功能性作物育种具有重要的指导意义和生产应用价值。
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公开(公告)号：CN113957031A
公开(公告)日：2022-01-21
申请号：CN202111478911.1
申请日：2021-12-06
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/53 , C12N15/55 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/70 , C02F3/34 , C12R1/19 , C02F101/38
摘要： 本发明提供了一种完全降解硝基苯的大肠杆菌工程菌的构建方法及其应用，涉及基因工程领域，构建方法包括如下步骤：将来源于恶臭假单胞菌属的十个基因nbzA,nbzB,nbzCa,nbzcb,nbzD,nbzE,nbzF,nbzG,nbzH,和nbzI按照大肠杆菌的密码子偏好性进行结构优化，获得nbzAS,nbzBS,nbzCaS,nbzCbS,nbzDS,nbzES,nbzFS,nbzGS,nbzHS,和nbzIS基因；选择T7启动子和终止子控制所述优化后的十个个基因的表达，完成优化后的十个基因原核表达单元的拼接；在两个相容质粒基础上组装硝基苯完全降解的表达单元；将带有硝基苯完全降解的表达单元的双质粒转入带有T7RNAP基因的大肠杆菌，获得含有十个基因原核表达单元的大肠杆菌工程菌株。该工程菌能在8h内将浓度3mM的硝基苯完全降解，该工程菌具备降解有机污染物硝基苯的能力。
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公开(公告)号：CN112458098A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN202011405326.4
申请日：2020-12-03
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/20
摘要： 一种来源于葡萄的耐镉基因Vvmrp1S及其应用，利用基因合成法将源于葡萄的Vvmrp1基因进行了改造，得到了核苷酸序列如SEQ ID No1所示的Vvmrp1S基因，并构建了重组表达载体，将耐镉基因Vvmrp1S成功导入拟南芥中，得到的转基因拟南芥植株都具有很强的抗和富集镉能力。经5mM以内镉溶液处理后，转基因株系的生物量比对照株系多，且转基因株系中的镉含量是对照株系的3‑5倍，表明本发明改造合成的Vvmrp1S基因具有提高植物抗和富集镉的能力，可用于培育富集镉植物。
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公开(公告)号：CN111944832A
公开(公告)日：2020-11-17
申请号：CN202010883945.8
申请日：2020-08-28
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 用于植物的自生固氮基因、固氮酶表达盒、其制备方法及应用，通过合成生物学，将类芽胞杆菌属固氮基因簇的固氮酶相关基因按植物表达模式进行特定的优化设计，获得自生固氮基因，利用CaMV35SΩ启动子控制所有优化后固氮基因的表达，构建成植物组成型表达单元，通过同尾克隆，将所有表达单元组装在一个植物表达载体中，获得的固氮酶表达盒中各表达单元连接稳定，不易断裂，将其转化到植物细胞内，使固氮酶在细胞质中表达，培育出能够将氮气转化为氨的植物，实现植物的自生固氮。
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公开(公告)号：CN111808871A
公开(公告)日：2020-10-23
申请号：CN202010741963.2
申请日：2020-07-29
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12N15/53 , C12N15/55 , C12N15/61 , C12N9/02 , C12N9/90 , C12N9/18 , C12N15/70 , C12N1/21 , C02F3/34 , C12R1/19 , C02F101/36 , C02F101/34
摘要： 本发明公开了一种优化后适用于大肠杆菌表达的3-氯邻苯二酚降解基因簇及其应用。该基因簇包含四个相关基因，每个基因都由独立的T7启动子和终止子控制，其核苷酸序列分别如SEQ ID No 1、SEQ ID No 2、SEQ ID No 3和SEQ ID No 4所示，其编码的蛋白质的氨基酸序列分别如SEQ ID No 5、SEQ ID No 6、SEQ ID No 7和SEQ ID No 8所示。本发明优化合成的基因能够在大肠杆菌中成功表达，发现阳性株系不仅能够降解3-氯邻苯二酚，还可以降解邻苯二酚和4-氯邻苯二酚，因此本发明所优化的基因簇可用于制备降解3-氯邻苯二酚、邻苯二酚和4-氯邻苯二酚的微生物。
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