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公开(公告)号：CN118421602A
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202410504648.6
申请日：2024-04-25
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 一种羊肚菌纤维二糖水解酶的生产方法，包括下列步骤：提取RNA，反转录成cDNA作为模板，然后进行PCR扩增；进行纤维二糖水解酶基因片段回收；将纤维二糖水解酶基因片段和载体质粒4T‑1和pET28a进行无缝克隆；将连接体系转入大肠杆菌Top 10感受态细胞转化培养，选择测序比对成功的菌株，作为重组载体；将重组载体转至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中制备重组菌，选取验证成功的菌株作为表达纤维二糖水解酶的大肠杆菌工程菌株。本发明获得的异源表达纤维二糖水解酶的大肠杆菌工程菌株，能够高效提升纤维二糖水解酶活性，有利于农业废弃物中纤维素的高效降解，促进资源的合理利用。
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公开(公告)号：CN118006722A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202410311695.9
申请日：2024-03-19
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 一种判定羊肚菌菌丝活力的方法，该方法通过测量羊肚菌菌丝生长速度和菌丝分叉距离判定羊肚菌菌株菌丝活力，可以应用到羊肚菌品种选育上，为筛选活力强的羊肚菌菌株节省大量栽培成本和时间。本发明基于羊肚菌在培养温度为15℃下，菌丝生长速度大于10mm/d，菌丝分叉距离在20‑26μm之间，即可判定羊肚菌菌丝活力佳。
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公开(公告)号：CN117660493A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311718793.6
申请日：2023-12-14
申请人： 上海市农业科学院
IPC分类号： C12N15/31 , C12Q1/04 , C12Q1/6895 , C12Q1/6869 , C12R1/645
摘要： 一种调控羊肚菌风味的基因及其筛选方法，所述调控羊肚菌风味的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明通过不同培养温度筛选羊肚菌风味相关基因，可用于开发羊肚菌鲜味剂来发挥羊肚菌提鲜作用。
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公开(公告)号：CN118325733A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410447218.5
申请日：2024-04-15
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 一种筛选产量超亲羊肚菌杂交菌株的方法，首先将羊肚菌杂交菌株分别接种于含20mL淀粉固体培养基直径为90mm的圆形培养皿中，每皿接入直径为0.5cm活化菌丝圆片，分别置于5℃、10℃和15℃的恒温培养箱中培养，在培养的第7d、5d和3d时进行划线，测量在不同温度条件下的测量菌丝直径。再滴加1％卢戈氏碘液，观察菌落周围淀粉水解圈的大小及透明程度，并采用十字划线法对水解圈进行划线，测量水解圈大小。最后计算水解圈直径(D)与菌株菌落直径(d)之比。判断在每个温度下的杂交菌株产量高的标准为：5℃时菌落直径大于36.24mm且D/d比值大于0.7的杂交菌株；10℃时菌落直径大于35.84mm且D/d比值大于0.66的杂交菌株；15℃时菌落直径大于33.45mm且D/d比值大于0.6的杂交菌株。
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公开(公告)号：CN118280451A
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202410278376.2
申请日：2024-03-12
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 一种羊肚菌产量的预测方法，由于羊肚菌产量的多变性，人工培养羊肚菌一直是全球研究的热点。了解栽培土壤微生物生态对提高羊肚菌产量和减轻病原菌危害具有重要意义。本发明选取上海市生态林、水田、温室大棚大棚、果林4种土壤类型的羊肚菌9个栽培试验，探讨羊肚菌生长与土壤微生物生态的潜在生态关系。本发明首次通过土壤钾肥和土壤真菌群落丰富度预测羊肚菌产量，为解读微生物生态对羊肚菌农业生态系统的重要性提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN118726339A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202411069394.6
申请日：2024-08-06
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 一种获得大球盖菇高产蛋白新菌株的方法，本发明提供的方法操作简单、污染率低和通量高的优点。该方法具体操作步骤如下：（1）将大球盖菇菌丝体破碎静置培养5天；（2）利用均质仪将菌丝体破碎3‑4min；（3）将菌丝片段与10%甘油1:1混合进行ARTP诱变150s；（4）将诱变后的混合物涂布在PDA再生培养基上；（5）挑取单菌落进行培养，然后利用拮抗实验和RAPD技术筛选ARTP诱变的新菌株。进一步对新菌株群体进行高产蛋白筛选，获得新菌株‘Y43’较亲本蛋白含量提高7.8%。此外，本发明可用于多种用途的高通量筛选，例如：用于基质降解效率高、产量高或品质优良菌株的选育。
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公开(公告)号：CN118325773A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410447216.6
申请日：2024-04-15
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 一种筛选耐高温的羊肚菌杂交菌株的方法，包括下列步骤：步骤1：将羊肚菌杂交菌株以及其亲本菌株分别接种于含PDA固体培养基的培养皿中，每培养皿接入直径为0.4‑0.6cm活化菌丝圆片，分别置于18‑22℃、23‑27℃和28‑32℃的条件下进行培养；步骤2：采用十字划线法在培养到第1.8‑2.2d和第2.5‑3.5d时分别进行划线，测量菌丝直径，将第1.8‑2.2d和第2.5‑3.5d的菌丝直径相加，除以生长时间得到平均生长速度；在18‑22℃条件下，筛选菌丝生长速度大于16.5mm/d的杂交菌株；在23‑27℃条件下，筛选菌丝生长速度大于18.5mm/d的杂交菌株；在28‑32℃条件下，筛选菌丝生长速度大于15.0mm/d的杂交菌株；将18‑22℃、23‑27℃和28‑32℃的条件下，属于快速生长的羊肚菌杂交菌株进行重合对照，最终筛选出耐高温的羊肚菌杂交菌株。本发明方的法用于预测羊肚菌杂交菌株的耐高温特性准确率很高。
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公开(公告)号：CN118216369A
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202410495815.5
申请日：2024-04-24
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 一种添加钾盐提高羊肚菌种植产量的方法，包括下列步骤：在接种间超净工作台上接种步骤1培养得到的菌种，并放入发菌室避光培养直至菌丝长满接种袋；在田地中添加钾盐；钾盐的添加量为50g/m2‑500g/m2；将接种袋中的栽培种揉散后均匀撒播在步骤3的田地中的土壤中，并在大田上覆一层土；配置含钾盐的外源营养，分装到营养袋中，高压灭菌；将灭好菌的外源营养袋用刀划口后均匀摆放压实在大田土壤的菌霜上，使营养袋内的营养料与土壤接触。本发明通过添加一定合适浓度钾盐提高羊肚菌产量的方法，可应用于开发羊肚菌栽培添加剂，有助于进一步优化人工栽培技术，提升羊肚菌栽培效益，推动羊肚菌产业发展的壮大。
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公开(公告)号：CN118140757A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410495817.4
申请日：2024-04-24
申请人： 上海市农业科学院
摘要： 一种添加钾盐促进羊肚菌原基形成的方法，包括下列步骤：在接种间超净工作台上接种步骤1获得的羊肚菌菌种，并放入发菌室避光培养直至菌丝长满接种袋；步骤3：在田地中添加钾盐，添加量为50g/m2‑500g/m2；步骤4：将接种袋中的栽培种揉成1‑3cm大小的小块，均匀地撒播在步骤3的田地中的土壤中，并在大田上覆2‑3cm薄土；步骤5：配置含有钾盐的外源营养，分装到营养包中，高压灭菌；步骤6：冷却后的外源营养包划口后，均匀平放在大田土壤的菌霜上；步骤7：浇水催菇，浇水后7‑10天，原基形成。本发明通过探究不同浓度钾盐添加并促进羊肚菌原基形成的方法，可应用于开发羊肚菌栽培添加剂，有助于进一步缩短大田栽培周期，推动羊肚菌栽培技术精准化发展。
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