一种利用CRISPR-Cas13敲降目的基因的载体及其应用方法

    公开(公告)号:CN116286974A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310137565.3

    申请日:2023-02-20

    Inventor: 费俭 刘宇慧

    Abstract: 本发明公开了一种同时表达Cas13b和针对拟下调靶基因sgRNA的载体及其在制备转基因动物中的应用。针对目的基因,运用CRISPR‑Cas9技术以及同源重组原理,在小鼠Rosa26基因位点exon1与exon2之间定点插入此种类载体表达框,获得可以靶向拟敲降目的基因的基因修饰动物模型。这一模型可以针对拟下调基因的mRNA,利用CRISPR/Cas13靶向沉默mRNA单链的特性,下调其目的基因转录组的表达水平。这一载体模型具有在体内高效下调目标基因转录组水平的能力,针对不同的基因的敲降仅需更换不同的sgRNA序列即可实现。此载体可以应用到疾病的相关基因通路的研究,相较传统RNAi转基因动物模型,有更高效便捷的优点。

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