公开(公告)号：CN116790363A

公开(公告)日：2023-09-22

申请号：CN202310722555.6

申请日：2023-06-16

Applicant: 上海交通大学医学院

Inventor： 殷堃 ,  李慧敏 ,  胡沁沁

IPC: C12M1/34 ,  C12M1/24 ,  C12M1/00 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/689 ,  C12N15/11 ,  C12R1/42

Abstract: 本发明涉及生化分析和分子诊断领域，具体的说是一种适用于RPA‑CRISPR反应的时空双维度分隔检测装置及其应用。装置包括外管和设置在其内的内管，内管带有上下底面，其下底面设有至少一个供RPA扩增产物扩散的毛细通道；所述内管的外壁与外管内壁贴合。本发明将RPA置于外管，CRISPR/Cas12a置于内管；反应初始，两体系被物理屏障隔绝。随着RPA反应进行，扩增产物积累，逐步通过毛细通道向上扩散至内管，从而激活内管中CRISPR/Cas12a检测体系。在内管中，Cas12a效应蛋白与RPA扩增产物特异性结合，发挥反式切割活性，非特异性切割单链DNA报告探针，产生荧光信号，实现一管式高灵敏检测。应用该方法可检测低至100CFU/mL肠炎沙门氏菌。操作简单方便、特异性强、灵敏、无污染。

公开(公告)号：CN116694798A

公开(公告)日：2023-09-05

申请号：CN202310810838.6

申请日：2023-07-04

Applicant: 上海交通大学医学院

Inventor： 修乐山 ,  殷堃 ,  李慧敏

IPC: C12Q1/6893 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/113 ,  B01L3/00 ,  C12N15/11 ,  C12R1/90

Abstract: 本发明属于分子生物学检测技术领域，涉及一种病原体的检测方法，特别涉及一种疟原虫种属鉴定和分型的引物和检测方法。检测疟原虫专用等温扩增引物为一组RPA扩增引物，碱基序列依次为SEQ ID NO.1‑2所示。本发明设计了包含多个反应腔室和一个中心进样口的微流控芯片，将CRISPR/Cas12a反应体系分别预置于反应腔室中，自中心进样口加入的RPA试剂均匀流向四周，进行一步法RPA‑CRISPR反应。通过判读各腔室的荧光信号有无即可判断样本种属鉴别结果，实现现场快速即时检测，提高检测效率。