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公开(公告)号:CN101092353B
公开(公告)日:2010-12-01
申请号:CN200710043693.2
申请日:2007-07-12
Applicant: 上海交通大学 , 深圳市利世隆科技有限公司
Abstract: 本发明涉及的是一种生物能源技术领域的无废物排放可全循环利用的动植物油脂转化脂肪酸单酯的制备方法。本发明包括:将动植物油脂原料、一元醇原料和催化剂用泵输送到耐压力反应罐中;将耐压力反应罐密封,搅拌混合,加热至酯交换反应温度后,恒温至转酯反应完成;将转酯反应混合物从耐压力反应罐中直接喷入蒸发器中,过量的原料醇和催化剂挥发成蒸汽,引入冷凝器冷凝成液体,回收循环;醇和催化剂完全挥发后剩余的母液分层,比重轻的层为脂肪酸单酯,比重大的层为甘油副产物。本发明的原料来源广泛、催化剂回收循环容易、生产条件温和、反应时间短、工艺简单,适于大规模工业化生产。
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公开(公告)号:CN101092353A
公开(公告)日:2007-12-26
申请号:CN200710043693.2
申请日:2007-07-12
Applicant: 上海交通大学 , 深圳市利世隆科技有限公司
Abstract: 本发明涉及的是一种生物能源技术领域的无废物排放可全循环利用的动植物油脂转化脂肪酸单酯的制备方法。本发明包括:将动植物油脂原料、一元醇原料和催化剂用泵输送到耐压力反应罐中;将耐压力反应罐密封,搅拌混合,加热至酯交换反应温度后,恒温至转酯反应完成;将转酯反应混合物从耐压力反应罐中直接喷入蒸发器中,过量的原料醇和催化剂挥发成蒸汽,引入冷凝器冷凝成液体,回收循环;醇和催化剂完全挥发后剩余的母液分层,比重轻的层为脂肪酸单酯,比重大的层为甘油副产物。本发明的原料来源广泛、催化剂回收循环容易、生产条件温和、反应时间短、工艺简单,适于大规模工业化生产。
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公开(公告)号:CN1958797B
公开(公告)日:2010-12-08
申请号:CN200610118672.8
申请日:2006-11-23
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明提供了一种南极假丝酵母脂肪酶的制备方法,属于分子生物学领域。按照毕赤酵母偏爱密码子结构,通过化学方法人工合成了CALB基因,人工合成的DNA分子,编码具有与野生型CALB蛋白在氨基酸水平上具有相同功能的核苷酸序列,所述的核苷酸序列能在中度严谨条件下与SEQ ID NO.1中从核苷酸第1-957位的核苷酸序列杂交。本发明所说基因在毕赤酵母细胞中高效表达,所表达的脂肪酶量达到21.6mg/L,从而提供了一种按毕赤酵母偏爱密码子设计合成在毕赤酵母中表达的南极假丝酵母脂肪酶基因,为解决酶成本高、满足工业大规模生产需要具有重要意义。
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公开(公告)号:CN1970745B
公开(公告)日:2010-05-12
申请号:CN200610119253.6
申请日:2006-12-07
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N9/20
Abstract: 本发明涉及一种脂肪酶的仿生亲和纯化方法,属于工业生物技术领域的。本发明包括下列步骤:(1)制备仿生亲和分离材料:首先用带氨基的基础层析介质与三氯三氮嗪进行反应,然后在50℃与烯丙胺反应,最后在95℃与环己胺反应,合成仿生亲和分离材料;(2)用仿生亲和分离材料纯化脂肪酶粗品:用上述制备的仿生亲和分离材料装入层析柱,得到亲和层析柱,随后将含脂肪酶的样品上至该亲和层析柱中,脂肪酶被柱中仿生亲和分离材料专一地吸附留在层析柱中,其它不能被吸附的蛋白随缓冲液流出,最后用洗脱缓冲液将脂肪酶从柱中专一洗脱下来,得到纯脂肪酶。本发明能够高效率、低成本的大规模生产高纯度的脂肪酶。
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公开(公告)号:CN1970745A
公开(公告)日:2007-05-30
申请号:CN200610119253.6
申请日:2006-12-07
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N9/20
Abstract: 本发明涉及一种脂肪酶的仿生亲和纯化方法,属于工业生物技术领域的。本发明包括下列步骤:(1)制备仿生亲和分离材料:首先用带氨基的基础层析介质与三氯三氮嗪进行反应,然后在50℃与烯丙胺反应,最后在95℃与环己胺反应,合成仿生亲和分离材料;(2)用仿生亲和分离材料纯化脂肪酶粗品:用上述制备的仿生亲和分离材料装入层析柱,得到亲和层析柱,随后将含脂肪酶的样品上至该亲和层析柱中,脂肪酶被柱中仿生亲和分离材料专一地吸附留在层析柱中,其它不能被吸附的蛋白随缓冲液流出,最后用洗脱缓冲液将脂肪酶从柱中专一洗脱下来,得到纯脂肪酶。本发明能够高效率、低成本的大规模生产高纯度的脂肪酶。
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公开(公告)号:CN1958797A
公开(公告)日:2007-05-09
申请号:CN200610118672.8
申请日:2006-11-23
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明提供了一种按毕赤酵母偏爱密码子设计合成在毕赤酵母中表达的南极假丝酵母脂肪酶基因,属于分子生物学领域。按照毕赤酵母偏爱密码子结构,通过化学方法人工合成了CALB基因,人工合成的DNA分子,编码具有与野生型CALB蛋白在氨基酸水平上具有相同功能的核苷酸序列,所述的核苷酸序列能在中度严谨条件下与SEQ ID NO.1中从核苷酸第1-957位的核苷酸序列杂交。本发明所说基因在毕赤酵母细胞中高效表达,所表达的脂肪酶量达到21.6mg/l,从而提供了一种按毕赤酵母偏爱密码子设计合成在毕赤酵母中表达的南极假丝酵母脂肪酶基因,为解决酶成本高、满足工业大规模生产需要具有重要意义。
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公开(公告)号:CN1986558A
公开(公告)日:2007-06-27
申请号:CN200610147229.3
申请日:2006-12-14
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及的是一种分子生物技术领域的南极假丝酵母脂肪酶的核苷酸序列。按照毕赤酵母偏爱密码子结构,通过化学方法人工合成了MuCALB1基因,人工合成的DNA分子,编码具有与野生型CALB蛋白在氨基酸水平具有相同功能并提高了酰基转移活力的核苷酸序列,所述的核苷酸序列能在中度严谨条件下与SEQID NO.1中从核苷酸第1-957位的核苷酸序列杂交。所述的编码具有MuCALB1脂肪酶活性的多肽的核苷酸序列,具有SEQ ID NO.1中从核苷酸第1-957位的核苷酸序列有至少85%的同源性。本发明其基因在毕赤酵母细胞中高效表达的脂肪酶量达到21.6mg/L,酰基转移活力转化率是野生型CALB的3.08倍,为酶法制备生物柴油中酰基转移酶活力低的问题具有重要意义。
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