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公开(公告)号：CN101824420B
公开(公告)日：2011-07-27
申请号：CN201010300286.7
申请日：2010-01-14
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的纳豆芽孢杆菌谷氨酸脱氢酶基因的突变基因及编码蛋白；所述纳豆芽孢杆菌谷氨酸脱氢酶编码基因的突变基因的碱基序列如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：5、SEQID NO：7、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：15所示；所述纳豆芽孢杆菌谷氨酸脱氢酶编码基因的突变基因编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：4、SEQ IDNO：6、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：16所示；本发明还涉及一种包含前述突变基因的重组载体。通过同源重组将该本发明的突变引入野生菌株后，可获得低产氨且发生长速度不变的基因工程菌，从而生产出无氨味纳豆。
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公开(公告)号：CN101692772B
公开(公告)日：2011-01-19
申请号：CN200910308615.X
申请日：2009-10-22
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的提高细胞中灵芝酸含量的灵芝细胞培养方法，包括如下步骤：配制种子培养基和发酵培养基；将灵芝菌丝体接入种子培养基中，培养，得一级种子培养液；取一级种子培养液，接入种子培养基中，培养，得二级种子培养液；取二级种子培养液，接入发酵培养基中，培养，得发酵细胞；将发酵细胞置于静止培养器皿中，静止培养，在细胞生长对数期加入苯巴比妥或咪康唑，继续静止培养至收获期，收取上层细胞。本发明的方法使得灵芝菌丝体中总灵芝酸含量达到41.4mg/g干细胞，同时单体灵芝酸的含量也得到提高15％～60％。
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公开(公告)号：CN101845074A
公开(公告)日：2010-09-29
申请号：CN201010199508.0
申请日：2010-06-13
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07J9/00
Abstract: 一种中药提取技术领域的基于化学合成法的灵芝酸T及灵芝酸Me的提纯方法，通过将灵芝酸粗提液经旋转蒸发处理浓缩至浸膏状的灵芝细胞提取浸膏，然后将灵芝细胞提取浸膏溶于有机溶剂中并加入乙酰化试剂，在反相液相色谱监控下进行乙酰化反应，用中和液萃取乙酰化试剂，然后将乙酰化后的灵芝细胞提取液经旋转蒸发处理浓缩至浸膏状后重新溶于甲醇或甲醇和水的混合体系中，并加入酸催化剂后在反相液相色谱监控下进行酸催化反应，最后将酸催化反应产物中和后置于旋转蒸发仪中挥干，即得到灵芝酸T含量超过45％，灵芝酸Me含量超过25％的灵芝酸粗品。
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公开(公告)号：CN101845074B
公开(公告)日：2013-05-29
申请号：CN201010199508.0
申请日：2010-06-13
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07J9/00
Abstract: 一种中药提取技术领域的基于化学合成法的灵芝酸T及灵芝酸Me的提纯方法，通过将灵芝酸粗提液经旋转蒸发处理浓缩至浸膏状的灵芝细胞提取浸膏，然后将灵芝细胞提取浸膏溶于有机溶剂中并加入乙酰化试剂，在反相液相色谱监控下进行乙酰化反应，用中和液萃取乙酰化试剂，然后将乙酰化后的灵芝细胞提取液经旋转蒸发处理浓缩至浸膏状后重新溶于甲醇或甲醇和水的混合体系中，并加入酸催化剂后在反相液相色谱监控下进行酸催化反应，最后将酸催化反应产物中和后置于旋转蒸发仪中挥干，即得到灵芝酸T含量超过45％，灵芝酸Me含量超过25％的灵芝酸粗品。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101824420A
公开(公告)日：2010-09-08
申请号：CN201010300286.7
申请日：2010-01-14
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的纳豆芽孢杆菌谷氨酸脱氢酶基因的突变基因及编码蛋白；所述纳豆芽孢杆菌谷氨酸脱氢酶编码基因的突变基因的碱基序列如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：5、SEQID NO：7、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：15所示；所述纳豆芽孢杆菌谷氨酸脱氢酶编码基因的突变基因编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：14或SEQ ID NO：16所示；本发明还涉及一种包含前述突变基因的重组载体。通过同源重组将该本发明的突变引入野生菌株后，可获得低产氨且发生长速度不变的基因工程菌，从而生产出无氨味纳豆。
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公开(公告)号：CN101692772A
公开(公告)日：2010-04-14
申请号：CN200910308615.X
申请日：2009-10-22
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的提高细胞中灵芝酸含量的灵芝细胞培养方法，包括如下步骤：配制种子培养基和发酵培养基；将灵芝菌丝体接入种子培养基中，培养，得一级种子培养液；取一级种子培养液，接入种子培养基中，培养，得二级种子培养液；取二级种子培养液，接入发酵培养基中，培养，得发酵细胞；将发酵细胞置于静止培养器皿中，静止培养，在细胞生长对数期加入苯巴比妥或咪康唑，继续静止培养至收获期，收取上层细胞。本发明的方法使得灵芝菌丝体中总灵芝酸含量达到41.4mg/g干细胞，同时单体灵芝酸的含量也得到提高15％～60％。
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公开(公告)号：CN101691391A
公开(公告)日：2010-04-07
申请号：CN200910308433.2
申请日：2009-10-19
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07J9/00
Abstract: 一种有机物提纯技术领域的羊毛甾醇粗品分离提纯的方法，包括：将羊毛甾醇粗品在25-40℃条件下经超声处理溶解于有机溶剂中，制成羊毛甾醇溶液；将羊毛甾醇溶液由过滤膜过滤后用高效液相制备色谱采用重叠进样进行分离纯化处理，得到提纯羊毛甾醇。本发明采用反相高效液相色谱法，能够保证分离度佳、产量高、回收率高、纯度好等特点，能直接分离得到97％以上纯度的羊毛甾醇，可以用于各类甾醇相关疾病和多种天然产物生物合成途径的研发。运用重叠进样，线性放大等技术弥补了使用反相色谱分离羊毛甾醇溶解度低的劣势，使用内径20mm，柱长250mm的制备柱，日制备量可达到近250mg，能满足多种科研需求。
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公开(公告)号：CN101671383B
公开(公告)日：2012-06-13
申请号：CN200910308432.8
申请日：2009-10-19
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种有机物提纯技术领域的单体7-乙氧基灵芝酸O及其单体灵芝酸T的分离纯化方法，包括：制备干菌体提取液，筛选含有7-乙氧基灵芝酸O条带的组分，结晶处理，制成提纯晶体；使用反向液相色谱分析灵芝酸晶体的晶体纯度；使用甲醇溶液溶解灵芝酸晶体，并向甲醇溶液中添加盐酸，然后置于酸解反应器内进行酸解处理获得单体灵芝酸粗液，最后经旋转蒸发处理后结晶制得单体灵芝酸T。本发明能直接得到纯度超过98％的灵芝酸T单体或95％以上纯度的7-乙氧基灵芝酸O单体，易于操作，方便推广，可为今后单体灵芝酸相关的药物开发和生产奠定稳固的基础。
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公开(公告)号：CN101671383A
公开(公告)日：2010-03-17
申请号：CN200910308432.8
申请日：2009-10-19
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种有机物提纯技术领域的单体7-乙氧基灵芝酸O及其单体灵芝酸T的分离纯化方法，包括：制备干菌体提取液，筛选含有7-乙氧基灵芝酸O条带的组分，结晶处理，制成提纯晶体；使用反向液相色谱分析灵芝酸晶体的晶体纯度；使用甲醇溶液溶解灵芝酸晶体，并向甲醇溶液中添加盐酸，然后置于酸解反应器内进行酸解处理获得单体灵芝酸粗液，最后经旋转蒸发处理后结晶制得单体灵芝酸T。本发明能直接得到纯度超过98％的灵芝酸T单体或95％以上纯度的7-乙氧基灵芝酸O单体，易于操作，方便推广，可为今后单体灵芝酸相关的药物开发和生产奠定稳固的基础。
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