基于谷氨酰胺合成酶的工程菌及其实现方法

    公开(公告)号:CN104140945A

    公开(公告)日:2014-11-12

    申请号:CN201410374683.7

    申请日:2014-07-31

    Abstract: 一种基因工程技术领域的基于谷氨酰胺合成酶的工程菌及其实现方法,以灰略红链霉菌基因组DNA为模板,与含有酶切位点的引物进行PCR扩增得到谷氨酰胺合成酶编码基因;然后将该基因插入大肠杆菌表达载体pET‐22b(+)中得到含有谷氨酰胺合成酶编码基因的重组表达载体;再将重组表达载体导入大肠杆菌表达菌株,筛选得到谷氨酰胺合成酶的工程菌。本发明针对现有技术存在的由于谷氨酰胺合成酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足,应用基因工程手段实现其体外的大量表达合成。

    一种有机垃圾腐熟菌剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN102765972B

    公开(公告)日:2014-07-02

    申请号:CN201210246276.9

    申请日:2012-07-17

    CPC classification number: Y02A40/216 Y02W30/43

    Abstract: 本发明公开了一种有机垃圾腐熟菌剂及其制备方法和应用,该菌剂由Ⅰ号复合菌剂和Ⅱ号复合菌剂组成,其中Ⅰ号复合菌剂占55-60%重量分数,Ⅱ号复合菌剂占40-45%重量分数,Ⅰ号复合菌剂和Ⅱ号复合菌剂由菌液和载体组成,分别由菌液吸附在载体上形成,菌液和载体的比例为2-3亿菌数/g载体。按有机垃圾堆体重量的0.5-1%均匀加入该有机垃圾腐熟菌剂,通过其中的多菌种之间协同作用,可有效加快有机垃圾腐熟速度,并提高产出有机肥的质量。该有机垃圾腐熟菌剂的使用,能够有效解决因有机垃圾堆放造成的污水横流、气味恶臭和蚊虫乱飞等污染问题,并可产出高质量有机肥。

    一株秸秆降解放线菌及其应用

    公开(公告)号:CN102703344A

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201210144682.4

    申请日:2012-05-10

    Abstract: 本发明涉及秸秆降解技术领域,特别涉及一株秸秆降解放线菌及其应用。本发明的秸秆降解放线菌,属于灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens),保藏编号为CGMCC No.5706。与现有技术相比,本发明有以下优点:1、本发明的灰略红链霉菌具有较强的纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和木质素酶产生能力,不会对自然界的碳循环产生负面影响,不会对环境造成危害;2、本发明的灰略红链霉菌具有较强的秸秆降解能力,在秸秆降解培养基中30天可使秸秆失重率达76%,且培养成本低,操作方便,易于产业化实施;3、本发明的灰略红链霉菌对土壤中的植物病害微生物有一定拮抗作用。

    一种灰略红链霉菌果胶酯酶及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN106636035A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201610711425.2

    申请日:2016-08-23

    Abstract: 本发明公开了一种灰略红链霉菌果胶酯酶及其编码基因和应用。该果胶酯酶基因从灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)克隆得到,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1或其密码子优化后的SEQ ID NO.2所示,上述编码的果胶酯酶,其氨基酸序列为SEQ ID NO.3,以及该果胶酯酶及其编码基因在降解果胶中的应用。本发明通过对目的蛋白添加可溶性标签和目的蛋白的周外空间表达,保证了蛋白生物活性的同时便于后续蛋白的纯化。该酶是一种碱性、耐高温的果胶水解酶,该酶对多种金属离子及酶活性抑制剂均有很强的耐受能力,因此在实际的生产和应用中具有重要的意义。

    基于硝酸盐还原酶的工程菌及其实现方法

    公开(公告)号:CN104140944A

    公开(公告)日:2014-11-12

    申请号:CN201410373906.8

    申请日:2014-07-31

    CPC classification number: Y02A40/12

    Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域的硝酸盐还原酶的工程菌及其实现方法,以灰略红链霉菌基因组DNA为模板,与含有酶切位点的引物进行PCR扩增依次得到编码硝酸盐还原酶催化亚基及电子转移亚基的核苷酸序列;然后将扩增得到的基因序列依次连接到共表达载体pETDuet‐1,最终获得重组共表达载体pETDuet‐NB‐NA;之后将该硝酸盐还原酶表达载体转化到大肠杆菌表达菌株。本发明针对现有技术存在的由于硝酸盐还原酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足,应用基因工程手段实现硝酸盐还原酶体外的大量表达合成,对于次生盐渍化土壤的快速修复乃至实现精准农业具有重大意义。

    一种有机垃圾腐熟菌剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN102765972A

    公开(公告)日:2012-11-07

    申请号:CN201210246276.9

    申请日:2012-07-17

    CPC classification number: Y02A40/216 Y02W30/43

    Abstract: 本发明公开了一种有机垃圾腐熟菌剂及其制备方法和应用,该菌剂由Ⅰ号复合菌剂和Ⅱ号复合菌剂组成,其中Ⅰ号复合菌剂占55-60%重量分数,Ⅱ号复合菌剂占40-45%重量分数,Ⅰ号复合菌剂和Ⅱ号复合菌剂由菌液和载体组成,分别由菌液吸附在载体上形成,菌液和载体的比例为2-3亿菌数/g载体。按有机垃圾堆体重量的0.5-1%均匀加入该有机垃圾腐熟菌剂,通过其中的多菌种之间协同作用,可有效加快有机垃圾腐熟速度,并提高产出有机肥的质量。该有机垃圾腐熟菌剂的使用,能够有效解决因有机垃圾堆放造成的污水横流、气味恶臭和蚊虫乱飞等污染问题,并可产出高质量有机肥。

    基于AA3型流动注射分析仪的土壤全氮含量测定方法

    公开(公告)号:CN102128835A

    公开(公告)日:2011-07-20

    申请号:CN201010564603.6

    申请日:2010-11-30

    Abstract: 一种环境检测技术领域的基于AA3型流动注射分析仪的土壤全氮含量测定方法,通过将新鲜土样颗粒经浓硫酸和高氯酸进行氧化处理后,经定容过滤后取出2~3mL的滤液与4mol/L的NaOH溶液等体积混合均匀并过滤,得到土样消解液;再根据消解液中铵氮浓度配铵氮合适的标准系列溶液并进样,按照水样中铵态氮含量的测定方法用AA3型流动注射分析仪测定土样消解液中的铵氮浓度,最后计算出土样中的总氮含量。本发明可以快速、准确和批量测定各种类型土壤中的全氮含量,省时省力。

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