等温单向生长的基因合成方法

    公开(公告)号:CN100510069C

    公开(公告)日:2009-07-08

    申请号:CN200610028886.6

    申请日:2006-07-13

    Abstract: 本发明涉及的是一种基因工程技术领域的等温单向生长的基因合成方法。具体包括以下步骤:(1)根据目标DNA序列设计并合成用于延伸的寡核苷酸链,或者纯化合成的寡核苷酸链;(2)在多种酶的协同作用下进行等温生长,合成目标DNA长链;(3)以步骤(2)中所得的产物为模板进行PCR扩增,获取目标序列长度的PCR产物。本发明具有成功率高,出错率低,设计简单,适用面广,自动化高等特点,因而具有潜在的低成本优势,对于基因合成的推广,生物工程,生物医学和生物信息学等领域的发展存在潜在的应用价值。

    原子力显微镜诱导单分子DNA定位突变方法

    公开(公告)号:CN1766104A

    公开(公告)日:2006-05-03

    申请号:CN200510029293.7

    申请日:2005-09-01

    Abstract: 一种生物技术领域的原子力显微镜诱导单分子DNA定位突变方法,在单分子水平上,通过原子力显微镜针尖的机械力定位扫描诱导DNA突变,包括以下步骤:(1)制备氨基硅烷修饰的云母衬底;(2)DNA样品的末端标记;(3)标记后DNA样品的拉直制备;(4)原子力显微镜对DNA进行诱导突变;(5)原子力显微镜对诱导后DNA片段的拾取分离;(6)分离后的DNA片段的单分子扩增;(7)琼脂糖凝胶电泳检测扩增情况;(8)扩增样品的DNA序列测定,筛选出突变样品。本发明具有精确定位,高分辨率,效率较高,操作简单,易于实行的优点。理论上可以诱导多点定位突变。

    原子力显微镜诱导单分子DNA定位突变方法

    公开(公告)号:CN100424174C

    公开(公告)日:2008-10-08

    申请号:CN200510029293.7

    申请日:2005-09-01

    Abstract: 一种生物技术领域的原子力显微镜诱导单分子DNA定位突变方法,在单分子水平上,通过原子力显微镜针尖的机械力定位扫描诱导DNA突变,包括以下步骤:(1)制备氨基硅烷修饰的云母衬底;(2)DNA样品的末端标记;(3)标记后DNA样品的拉直制备;(4)原子力显微镜对DNA进行诱导突变;(5)原子力显微镜对诱导后DNA片段的拾取分离;(6)分离后的DNA片段的单分子扩增;(7)琼脂糖凝胶电泳检测扩增情况;(8)扩增样品的DNA序列测定,筛选出突变样品。本发明具有精确定位,高分辨率,效率较高,操作简单,易于实行的优点。理论上可以诱导多点定位突变。

    核酸聚合酶链式反应扩增的优化方法

    公开(公告)号:CN1297667C

    公开(公告)日:2007-01-31

    申请号:CN200410099186.7

    申请日:2004-12-29

    Abstract: 一种核酸聚合酶链式反应扩增的优化方法,通过向PCR体系中添加单质金材料来实现对PCR扩增的优化,具体如下:(1)单质金材料制备,①金箔、金片、金丝或金粉的制备,②镀金薄膜的制备,③胶体金制备;(2)单质金材料灭菌;(3)PCR体系优化;(4)PCR产物检测;(5)优化材料从反应结束体系中的分离,需要回收扩增得到的PCR产物,则可从反应结束体系中分离出优化材料。本发明具有优化扩增的效果显著,制备简便,成本低廉,易于保存,应用广泛,优化材料易于从体系中分离的优点。对基因检测与克隆、遗传分析、临床诊断、基因芯片以及新材料等领域有着潜在而巨大的应用价值。

    核酸聚合酶链式反应扩增的优化方法

    公开(公告)号:CN1289687C

    公开(公告)日:2006-12-13

    申请号:CN200510023780.2

    申请日:2005-02-03

    Abstract: 一种核酸聚合酶链式反应扩增的低成本优化方法,通过向PCR体系中添加以下任一种优化介质材料:单质钛材料、单质镍材料、单质铋材料、单质锑材料、单质硒材料、单质铬材料来实现对PCR扩增的优化,具体如下:(1)优化介质材料的准备;(2)材料的灭菌;(3)PCR体系优化;(4)PCR产物检测;(5)优化材料从反应结束体系中的分离。本发明具有优化扩增的效果显著,操作更加简便,成本低廉,易于保存,应用广泛,优化材料易于从体系中分离等优点。PCR扩增优化方法对多种PCR体系都具有优化作用,适用于各种PCR扩增,也适用于聚合酶延伸以及基于PCR方法基础的其他生化方法,对基因检测与克隆、遗传分析、临床诊断、基因芯片以及新材料等领域有着潜在而巨大的应用价值。

    核酸聚合酶链式反应扩增的优化方法

    公开(公告)号:CN1661029A

    公开(公告)日:2005-08-31

    申请号:CN200410099186.7

    申请日:2004-12-29

    Abstract: 一种核酸聚合酶链式反应扩增的优化方法,通过向PCR体系中添加单质金材料来实现对PCR扩增的优化,具体如下:(1)单质金材料制备,①金箔、金片、金丝或金粉的制备,②镀金薄膜的制备,③胶体金制备;(2)单质金材料灭菌;(3)PCR体系优化;(4)PCR产物检测;(5)优化材料从反应结束体系中的分离,需要回收扩增得到的PCR产物,则可从反应结束体系中分离出优化材料。本发明具有优化扩增的效果显著,制备简便,成本低廉,易于保存,应用广泛,优化材料易于从体系中分离的优点。对基因检测与克隆、遗传分析、临床诊断、基因芯片以及新材料等领域有着潜在而巨大的应用价值。

    核酸聚合酶链式反应扩增的优化方法

    公开(公告)号:CN1680573A

    公开(公告)日:2005-10-12

    申请号:CN200510023780.2

    申请日:2005-02-03

    Abstract: 一种核酸聚合酶链式反应扩增的低成本优化方法,通过向PCR体系中添加以下任一种优化介质材料:单质钛材料、单质镍材料、单质铋材料、单质锑材料、单质硒材料、单质铬材料来实现对PCR扩增的优化,具体如下:(1)优化介质材料的准备;(2)材料的灭菌;(3)PCR体系优化;(4)PCR产物检测;(5)优化材料从反应结束体系中的分离。本发明具有优化扩增的效果显著,操作更加简便,成本低廉,易于保存,应用广泛,优化材料易于从体系中分离等优点。PCR扩增优化方法对多种PCR体系都具有优化作用,适用于各种PCR扩增,也适用于聚合酶延伸以及基于PCR方法基础的其他生化方法,对基因检测与克隆、遗传分析、临床诊断、基因芯片以及新材料等领域有着潜在而巨大的应用价值。

    等温单向生长的基因合成方法

    公开(公告)号:CN1908167A

    公开(公告)日:2007-02-07

    申请号:CN200610028886.6

    申请日:2006-07-13

    Abstract: 本发明涉及的是一种基因工程技术领域的等温单向生长的基因合成方法。具体包括以下步骤:(1)根据目标DNA序列设计并合成用于延伸的寡核苷酸链,或者纯化合成的寡核苷酸链;(2)在多种酶的协同作用下进行等温生长,合成目标DNA长链;(3)以步骤(2)中所得的产物为模板进行PCR扩增,获取目标序列长度的PCR产物。本发明具有成功率高,出错率低,设计简单,适用面广,自动化高等特点,因而具有潜在的低成本优势,对于基因合成的推广,生物工程,生物医学和生物信息学等领域的发展存在潜在的应用价值。

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