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公开(公告)号:CN106318934B
公开(公告)日:2020-06-05
申请号:CN201610838271.3
申请日:2016-09-21
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/10 , C12N15/54 , C12N15/113 , C12N15/82
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及悬浮胡萝卜细胞基因组中β(1,2)木糖转移酶的基因全序列及其相应的用于转染双子叶植物的CRISPR/CAS9的质粒构建。本发明首次发现和确定了胡萝卜β(1,2)木糖转移酶的基因全序列,并针对此序列设计了两个有效的gRNA,合成相应的CRISPR/CAS9质粒,从而达到敲除悬浮胡萝卜细胞基因组中β(1,2)木糖转移酶的目的。本发明还发现β(1,2)木糖转移酶的基因序列中存在两段STR位点,这对于胡萝卜种属鉴定及其进化方面具有重大意义。
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公开(公告)号:CN110172101A
公开(公告)日:2019-08-27
申请号:CN201811624768.0
申请日:2018-12-28
Applicant: 上海交通大学
Inventor: 李大伟 , 周冰洁 , 黑泰诗·巴格宛拜·曼古奇亚 , 裘德莎·萨海尔 , 武正华 , 司瓦·巴拉斯·麦卢古 , 黑玛·纳吉
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域,具体涉及一种His-AGR2-DsRed融合蛋白及其制备方法和应用。可以简便、高效地获得具有活性的人源AGR2,有利于对his-AGR2-DsRed重组蛋白进行生物学功能和临床应用研究,特异性强;因DsRed可直接发光,不需再加任何辅助因子,操作简便,且灵敏度高,重复性好;结合荧光成像技术可以指示蛋白的定位,用于相关机制研究;结合流式细胞检测分析技术可以用于检测该蛋白及表达在细胞表面的抗AGR2抗体的结合情况,从而用于抗AGR2真核细胞抗体库的筛选;由于采用大肠杆菌生产本发明融合蛋白,其生产成本低廉;所采用的的改进后的pMAL系统,使用的his标签既能最小化标签对蛋白结构和功能的影响,且使纯化过程简便经济,还提高了目的蛋白的纯度表达量。
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公开(公告)号:CN103987731B
公开(公告)日:2018-04-13
申请号:CN201280033663.2
申请日:2012-07-05
Applicant: 赛诺菲(中国)投资有限公司上海分公司 , 上海交通大学
CPC classification number: C07K16/40 , A61K39/3955 , A61K45/06 , A61K2039/505 , C07K16/22 , C07K2317/24 , C07K2317/34 , C07K2317/56 , C07K2317/565 , C07K2317/73 , C07K2317/76 , C12N2510/02 , G01N33/5011
Abstract: 本发明涉及一种AGR2阻断性单克隆抗体,尤其是阻断AGR2的人源化单克隆抗体。本发明还涉及包含所述抗体的药物组合物,制备方法及用途。该抗体可用于阻断肿瘤生长和转移。
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公开(公告)号:CN102268089A
公开(公告)日:2011-12-07
申请号:CN201110186469.5
申请日:2011-07-05
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07K16/40 , C12P21/08 , A61K39/395 , A61P35/00
CPC classification number: C07K16/40 , A61K39/3955 , A61K45/06 , A61K2039/505 , C07K16/22 , C07K2317/24 , C07K2317/34 , C07K2317/56 , C07K2317/565 , C07K2317/73 , C07K2317/76 , C12N2510/02 , G01N33/5011
Abstract: 一种遗传免疫及分子生物技术领域的AGR2阻断抗体及其用途,该抗体为单克隆抗体,其重链和轻链的氨基酸序列如Seq ID No.1和2所示,通过杂交瘤细胞株18A4制备得到单克隆抗体,可用于阻断AGR2促进肿瘤生长和转移。
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公开(公告)号:CN102242143A
公开(公告)日:2011-11-16
申请号:CN201110099371.6
申请日:2011-04-20
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种分子生物技术领域的pGreen Max1真核表达载体及其制备方法。由Mex、IRES-EGFP片段和真核表达载体重组获得序列1,序列1共计7976bp,其中在第1769bp-2415bp之间插入了含有647bp的Mex片段,在第3120bp-4428bp之间插入了含有1309bp的IRES-EGFP序列;制备方法包括:设计引物从质粒中通过PCR的方法克隆得到Mex,并将PCR产物经过SmaI位点定向插入到表达载体中,并经过BamHI和NotI双酶切将IRES-EGFP插入到载体中,构建重组的pGreenMax真核表达载体。本发明载体作为在真核细胞中获取目的蛋白或抗体的应用,并为高产哺乳动物细胞株的筛选提供蛋白表达及筛选的标记。
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公开(公告)号:CN101633915B
公开(公告)日:2011-06-08
申请号:CN200910056686.5
申请日:2009-08-20
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的酶的布氏锥虫苯丙氨酰tRNA合成酶的制备方法,具体步骤如下:分别设计引物,扩增布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶的α亚基和β亚基基因;将α亚基和β亚基基因分别克隆到原核表达载体pET21a(+)中,构建pET21a(+)-PheRSα及pET21a(+)-PheRSβ表达载体;将α亚基的操纵子亚克隆到pET21a(+)-PheRSβ中,形成重组共表达载体pET21a(+)-PheRSαβ;将重组共表达载体pET21a(+)-PheRSαβ转化大肠杆菌BL21(DE3)RIPL中,IPTG诱导表达;收集裂解后的菌液上清,纯化蛋白,得布氏锥虫苯丙氨酰tRNA合成酶。本发明构建布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶(PheRS)的重组质粒,表达纯化出布氏锥虫苯丙氨酸tRNA合成酶蛋白,为抗寄生虫药物的筛选奠定了基础。
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公开(公告)号:CN101935638A
公开(公告)日:2011-01-05
申请号:CN200910048246.5
申请日:2009-03-26
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种生物技术领域的布氏锥虫亮氨酰tRNA合成酶活性蛋白的制备方法,步骤包括:设计特异引物,扩增布氏锥虫全基因组;切胶回收,得到布氏锥虫亮氨酰tRNA合成酶基因;将步骤二得到的基因连接到克隆载体中,构建基因克隆质粒;将克隆质粒亚克隆进表达载体,鉴定,转化大肠杆菌,培养转化的大肠杆菌单克隆,诱导;纯化表达的融合蛋白,得到布氏锥虫亮氨酰tRNA合成酶活性蛋白。本发明所得的亮氨酰tRNA合成酶可以作为药物筛选的靶标,广泛的应用于药物筛选领域。
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公开(公告)号:CN104593333A
公开(公告)日:2015-05-06
申请号:CN201410769174.4
申请日:2014-12-12
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/574 , A61K39/395 , A61P35/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及一种稳定表达抗AGR2人源化单克隆抗体的CHO细胞株及其应用。本发明提供一种稳定表达抗AGR2人源化单克隆抗体的CHO细胞株K70E10-1D6,所述细胞株的保藏号为CCTCC NO:C2014189。本发明所提供的CHO细胞株K70E10-1D6能够稳定表达抗AGR2人源化单克隆抗体,且制备获得的抗AGR2人源化单克隆抗体能够与AGR2特异性结合,亲和力高达9.09×108L/mol,并能够抑制乳腺癌细胞MCF7的生长。
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公开(公告)号:CN103305546B
公开(公告)日:2014-08-27
申请号:CN201310268113.5
申请日:2011-04-20
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种的是分子生物技术领域的pGreen Max1真核表达载体及其制备方法。由Mex、IRES-EGFP片段和真核表达载体重组获得序列1,序列1共计8003bp,其中在第1769bp-2415bp之间插入了含有647bp的Mex片段,在第3120bp-4428bp之间插入了含有1309bp的IRES-EGFP序列;制备方法包括:设计引物从质粒中通过PCR的方法克隆得到Mex,并将PCR产物经过SmaI位点定向插入到表达载体中,并经过BamHI和NotI双酶切将IRES-EGFP插入到载体中,构建重组的pGreen Max真核表达载体。本发明载体作为在真核细胞中获取目的蛋白或抗体的应用,并为高产哺乳动物细胞株的筛选提供蛋白表达及筛选的标记。
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公开(公告)号:CN103305546A
公开(公告)日:2013-09-18
申请号:CN201310268113.5
申请日:2011-04-20
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种的是分子生物技术领域的pGreen Max1真核表达载体及其制备方法。由Mex、IRES-EGFP片段和真核表达载体重组获得序列1,序列1共计7976bp,其中在第1769bp-2415bp之间插入了含有647bp的Mex片段,在第3120bp-4428bp之间插入了含有1309bp的IRES-EGFP序列;制备方法包括:设计引物从质粒中通过PCR的方法克隆得到Mex,并将PCR产物经过SmaI位点定向插入到表达载体中,并经过BamHI和NotI双酶切将IRES-EGFP插入到载体中,构建重组的pGreen Max真核表达载体。本发明载体作为在真核细胞中获取目的蛋白或抗体的应用,并为高产哺乳动物细胞株的筛选提供蛋白表达及筛选的标记。
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